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标准编号 | GB/T 40183-2021 (GB/T40183-2021) | 中文名称 | DNA甲基化的测定 焦磷酸测序法 | 英文名称 | Determination of DNA methylation - Pyrosequencing | 行业 | 国家标准 (推荐) | 中标分类 | A21 | 国际标准分类 | 07.080 | 字数估计 | 6,635 | 发布日期 | 2021-05-21 | 实施日期 | 2021-12-01 | 起草单位 | 河北医科大学、中国标准化研究院、河北省食品检验研究院、中国科学院遗传与发育生物学研究所农业资源研究中心、河北师范大学 | 归口单位 | 中国标准化研究院 | 标准依据 | 国家标准公告2021年第7号 | 提出机构 | 中国标准化研究院 | 发布机构 | 国家市场监督管理总局、国家标准化管理委员会 |
GB/T 40183-2021
Determination of DNA methylation - Pyrosequencing
ICS 07.080
A21
中华人民共和国国家标准
DNA甲基化的测定 焦磷酸测序法
2021-05-21发布
2021-12-01实施
国 家 市 场 监 督 管 理 总 局
国 家 标 准 化 管 理 委 员 会 发 布
前言
本标准按照GB/T 1.1-2009给出的规则起草。
本标准由中国标准化研究院提出并归口。
本标准起草单位:河北医科大学、中国标准化研究院、河北省食品检验研究院、中国科学院遗传与发
育生物学研究所农业资源研究中心、河北师范大学。
本标准主要起草人:吕品、马爱进、张岩、林浩、李永鹏、李东明、黄芸、杨宏超。
DNA甲基化的测定 焦磷酸测序法
1 范围
本标准规定了用焦磷酸测序法测定DNA甲基化的方法。
本标准适用于动植物组织或体外培养细胞DNA甲基化测定。
2 规范性引用文件
下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件,仅注日期的版本适用于本文
件。凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。
GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法
3 术语和定义、缩略语
3.1 术语和定义
下列术语和定义适用于本文件。
3.1.1
DNA甲基化 DNAmethylation
在DNA甲基转移酶的催化下,以S-腺苷甲硫氨酸为甲基供体,将甲基转移至碱基特定结构上的
过程。
3.2 缩略语
下列缩略语适用于本文件。
4 原理
DNA经重硫酸盐硫化处理后,DNA双链中未甲基化的胞嘧啶转化为尿嘧啶,通过PCR将尿嘧啶
转化为胸腺嘧啶,根据PCR产物中相应甲基化位点的胞嘧啶和胸腺嘧啶的比例进行定量。
5 试剂或材料
除非另有规定,仅使用分析纯试剂。
5.1 水:GB/T 6682,二级水。
5.2 动物基因组DNA提取试剂盒。
5.3 植物基因组DNA提取试剂盒。
5.4 20pmol/μL焦磷酸测序用引物。
5.5 PCR试剂盒。
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