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| 标准编号 | GB/T 42702-2023 (GB/T42702-2023) | | 中文名称 | 纸、纸板和纸制品 抗菌性能的测定 | | 英文名称 | Paper, board and paper products - Determination of antibacterial activity | | 行业 | 国家标准 (推荐) | | 中标分类 | Y30 | | 国际标准分类 | 85.010 | | 字数估计 | 24,249 | | 发布日期 | 2023-05-23 | | 实施日期 | 2023-12-01 | | 发布机构 | 国家市场监督管理总局、中国国家标准化管理委员会 |
GB/T 42702-2023: 纸、纸板和纸制品 抗菌性能的测定
GB/T 42702-2023 英文版: Paper, board and paper products -- Determination of antibacterial activity
中华人民共和国国家标准
纸、纸板和纸制品 抗菌性能的测定
国 家 市 场 监 督 管 理 总 局
国 家 标 准 化 管 理 委 员 会 发 布
前言
本文件按照GB/T 1.1-2020《标准化工作导则 第1部分:标准化文件的结构和起草规则》的规定
起草。
请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。
本文件由中国轻工业联合会提出。
本文件由全国造纸工业标准化技术委员会(SAC/TC141)归口。
本文件起草单位:中轻(晋江)卫生用品研究有限公司、中国制浆造纸研究院有限公司、中轻纸品检
验认证有限公司、福建恒安集团有限公司、珠海红塔仁恒包装股份有限公司、尤妮佳生活用品(中国)有
限公司、住友精化(中国)投资有限公司、金佰利(中国)有限公司、国家纸张质量检验检测中心。
本文件主要起草人:刘洋、孙文刚、李良军、刘俊杰、温建宇、吴晓彪、罗概、马洪生、卢诗强、杨静、
王嘉俊、李春、洪雅文、陈彦娣、李丽娥、曾铮铮、毛萃、袁桃静、王鑫婷。
纸、纸板和纸制品 抗菌性能的测定
1 范围
本文件描述了纸、纸板和纸制品抗菌(抑菌)性能的测定方法,包括载体抗菌试验、抑菌环试验、振荡
烧瓶试验、抑菌成分转移测定试验、高吸水材料抑菌性能试验和长效防霉性能试验。
本文件适用于纸、纸板和纸制品及其原材料。
2 规范性引用文件
下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中,注日期的引用文
件,仅该日期对应的版本适用于本文件;不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于
本文件。
WS/T 650-2019 抗菌和抑菌效果评价方法
3 术语和定义
下列术语和定义适用于本文件。
3.1
抗菌 antibacterial
采用化学或物理方法杀灭或妨碍细菌生长繁殖,可减少其数量以及活性的过程。
3.2
抑菌 antibacterial
采用化学或物理方法抑制或妨碍细菌生长繁殖及其活性的过程。
4 测定方法和试验菌的选择
4.1 测定方法的选择
4.1.1 普通样品
根据样品性能及使用方式选择合适的测定方法。对于含有溶出性抗菌成分的样品,或纤维原料(含
有非溶出性抗菌成分)具有抗菌功能且吸水性较好的样品,可选择载体抗菌试验(第5章)进行定量测
定;对于含有溶出性抑菌成分的样品,如果进行定性测定,可选择抑菌环试验(第6章);对于含有非溶出
性抗菌成分的样品,经鉴定试验确认后,可选择振荡烧瓶试验(第7章)进行定量测定。
样品吸水性判断方法:将样品裁成尺寸为2.0cm×3.0cm的试样(试样可叠放,但片数不得超过
3片),在试样表面滴加100μL菌悬液,如果菌悬液能被试样完全吸收,则视为该样品为吸水性较好的
样品,例如抑菌生活用纸。
4.1.2 特殊样品
根据其样品特性选择相应的测定方法:在鉴别食品接触用纸、纸板和纸制品中的抑菌成分是否发生
转移时,可选择抑菌成分转移测定试验(第8章);对于高吸收性树脂及含高吸收性树脂的吸收芯体,可
选择高吸水材料抑菌性能试验(第9章);对于具有长效防霉作用的纸、纸板和纸制品,可选择长效防霉
性能试验(第10章)。
4.2 试验菌的选择
进行抗菌(抑菌)性能测定时,若无特殊说明,应使用方法中规定的细菌进行试验,若标明对真菌或
特定微生物有抗菌(抑菌)作用,则应使用方法中规定的真菌或特定微生物进行测定。
5 载体抗菌试验
5.1 适用范围
本方法适用于含有溶出性抗菌成分的纸、纸板和纸制品及其原材料,或纤维原料(含有非溶出性抗
菌成分)具有抗菌功能且吸水性较好的样品,进行定量抗菌性能测定。
注:若样品中仅部分纤维具有抗菌作用,且不含溶出性抗菌成分,采用此方法的检测结果可能偏低。
5.2 试验材料
5.2.1 培养基和试剂
5.2.1.1 一般要求
试验所用试剂应为分析纯或适合于微生物试验用。宜使用现有商业化的脱水原料制备培养基,并
严格按照相关产品制造商的使用说明操作。
5.2.1.2 营养琼脂培养基
5.2.1.4 磷酸盐缓冲液(PBS)
5.2.2 试验器具
5.2.2.1 Ⅱ级生物安全柜。
5.2.2.2 恒温培养箱:温控精度±1℃。
5.2.2.3 旋涡式振荡器。
5.2.2.4 高压蒸汽灭菌锅。
5.2.2.5 试管、烧杯、锥形瓶、接种环、移液器等实验室常用器具。
5.2.3 试验菌
5.2.3.1 细菌:大肠杆菌(8099或CICC10899)或大肠杆菌(ATCC25922),金黄色葡萄球菌(ATCC6538
或ATCC25923)。
5.2.3.2 真菌:白色念珠菌(ATCC10231)。
5.2.3.3 根据产品特定用途所需用的其他菌株。
5.3 试样、对照样和菌悬液制备
5.3.1 试样的制备
在无菌条件下打开样品包装,避开样品边缘,将样品剪成2.0cm×3.0cm的试样,每片试样应确保
试验过程中的菌悬液被完全吸收(滴加菌液后倾斜平皿,无游离液体流出),如1片试样无法满足要
求,可适当增加试样的片数(不应超过3片)。若试样需进行灭菌处理,可采用高压灭菌法(121℃,
103kPa,15min),如果高压灭菌法不适用,可采用环氧乙烷、紫外线照射或其他合适的方法对试样进行
灭菌。若试样进行过灭菌处理,应在报告中注明灭菌方式。
5.3.2 对照样的制备
可选用与待测样品同等材质、同等大小但未经抗菌处理的样品作为对照样,此时,试验中对照样的
层数应与试样相同;也可选用经验证对微生物生长不产生影响的对照样品(如不含抗菌成分,与试样同
步操作,作用相同时间,接种相同菌量,回收菌数与空白试验回收菌数的比值>90%的样品),将其裁剪
成与待测试样同等大小作为对照样。对照样应经高压消毒灭菌(121℃,103kPa,15min),如果高压灭
菌法不适用,可采用环氧乙烷或其他合适方法进行灭菌。报告中应注明对照样品的种类和灭菌方式。
5.3.3 菌悬液的制备
取菌株第2代~第5代的营养琼脂培养基(真菌为沙氏琼脂培养基)新鲜斜面培养物(18h~
24h),用5.0mL的PBS洗下菌苔,使菌悬浮均匀后用PBS稀释至适宜浓度,试验时每份对照组回收菌
数应为1.0×104CFU~5.0×104CFU。
5.4 试验步骤
取试验样片和对照样片各1份,分别置于无菌平皿内,用新鲜制备的菌悬液分别在试验样片与对照
样片上均匀滴加100μL,每份对照组回收菌数应为1.0×104CFU~5.0×104CFU。开始计时,作用至
说明书规定的时间(最长不超过120min),用无菌镊子将试验样片和对照样片分别放入5mL的
PBS中,充分混匀,进行10倍系列稀释,选择适宜稀释度,吸取0.5mL接种平皿,每个稀释度接种2个
平皿,将冷却至40℃~45℃的熔化营养琼脂培养基或沙氏琼脂培养基倾注于已加入样液的平皿中,每
平皿15mL~20mL,转动平皿,使其充分混匀,琼脂凝固后翻转平皿,36℃±1℃培养48h(细菌)或
72h(真菌),进行活菌菌落计数。试验重复3次,分别计算抑菌率。
5.5 计算公式
5.6 结果表述
5.6.1 各次抑菌率均≥50%,表明该样品相对于对照样具有抗菌作用。
5.6.2 各次抑菌率均≥90%,表明该样品相对于对照样具有较强的抗菌作用。
5.7 注意事项
试验过程中,对于实际使用时间较短的产品(如抑菌生活用纸),作用时间不应超过5min;其他产
品应不超过120min。
6 抑菌环试验
6.1 适用范围
本方法适用于含溶出性抑菌成分,且厚度不超过4.0mm的片(块)状物的纸、纸板和纸制品及其原
材料的抑菌性能定性测定;也可用于鉴别试样中是否含有溶出性抑菌成分。
6.2 试验材料
6.2.1 培养基和试剂
同5.2.1。
6.2.2 试验器具
6.2.2.1 Ⅱ级生物安全柜。
6.2.2.2 恒温培养箱:温控精度±1℃。
6.2.2.3 旋涡式振荡器。
6.2.2.4 高压蒸汽灭菌锅。
6.2.2.5 游标卡尺。
6.2.2.6 试管、烧杯、锥形瓶、接种环、移液器等实验室常用器具。
6.2.3 试验菌
同5.2.3。
6.3 试样、阴性对照样和试验菌制备
6.3.1 试样的制备
在无菌条件下打开样品包装,避开样品边缘,将其制成直径为5.0mm、厚度不超过4.0mm的圆片
(块),每4片(块)一组。若试样需进行灭菌处理,可采用高压灭菌法(121℃,103kPa,15min),如果高
压灭菌法不适用,可采用环氧乙烷、紫外线照射或其他合适方法对试样进行灭菌。若试样进行过灭菌处
理,应在报告中注明灭菌方式。
6.3.2 阴性对照样的制备
可选用与待测样品同等材质、同等大小但未经抑菌处理的样品作为阴性对照样,此时,试验中对照
样的层数应与试样相同;也可选用经验证不含溶出性抑菌成分的纸或纸板(如定性滤纸),将其制成与待
测试样同等大小,作为阴性对照样。阴性对照样应经高压消毒灭菌(121℃,103kPa,15min),如果高
压灭菌法不适用,可采用环氧乙烷或其他合适方法进行灭菌。报告中应注明对照样品的种类和灭菌
方式。
6.3.3 试验菌的制备
取菌株第2代~第5代的营养琼脂培养基(真菌为沙氏琼脂培养基)新鲜斜面培养物(18h~24h),用
PBS洗下菌苔并做适当稀释,制成浓度为5×105CFU/mL~5×106CFU/mL的菌悬液,用无菌棉拭子
蘸取该菌悬液在适宜的培养基平板表面均匀涂抹3次。每涂抹1次,平板应转动60°,最后将棉拭子绕
平板边缘涂抹一周。盖好平板,置于室温干燥5min。
6.4 试验步骤
每次试验贴放1个染菌平板,每个平板贴放4片试验样片,1片阴性对照样片,共5片。用无菌镊
子取样片贴放于平板表面,阴性对照样片贴于平板中心位置,试验样片贴于四周。各样片中心之间相距
25mm以上,与平板的周缘相距15mm以上。贴放好后,用无菌镊子轻压样片,使其紧贴于平板表面。
盖好平皿,置于36℃±1℃培养16h~18h后测量结果。试验重复3次。
用游标卡尺测量抑菌环的直径(包括贴片)并记录,测量抑菌环时,应选均匀而完全无菌生长的抑菌
环进行,测量其直径应以抑菌环外沿为界。
6.5 抑菌作用判别
阴性对照样片应无抑菌环产生,否则试验无效。试验样片抑菌环直径>7mm者,判别为具有抑菌
作用;抑菌环直径≤7mm者,判别为无抑菌作用。
6.6 结果表述
3次重复试验,共12个样片,均有抑菌作用结果者,表明试样具有溶出性抑菌作用,否则表明试样
无溶出性抑菌作用,即样品中不含有溶出性抑菌成分。
7 振荡烧瓶试验
7.1 适用范围
本方法适用于含非溶出性抗菌成分的纸、纸板和纸制品及原材料的抗菌性能测定,不适用于含有高
吸收性树脂的样品。
在进行振荡烧瓶试验前,需要鉴定试验样品抗菌成分是否可溶出,只有不含溶出性抗菌成分,才能
选用振荡烧瓶法进行抗菌性能测定。如果含有溶出性抗菌成分,则参照第5章载体抗菌试验测定抗菌
性能。
7.2 试验材料
7.2.1 培养基和试剂
同5.2.1。
7.2.2 试验器具
7.2.2.1 Ⅱ级生物安全柜。
7.2.2.2 恒温培养箱:温控精度±1℃。
7.2.2.3 旋涡式振荡器。
7.2.2.4 高压蒸汽灭菌锅。
7.2.2.5 振荡摇床:250r/min~300r/min。
7.2.2.6 具塞锥形瓶:250mL。
7.2.2.7 试管、烧杯、锥形瓶、接种环、移液器等实验室常用器具。
7.2.3 试验菌
同5.2.3。
7.3 试样、对照样和菌悬液制备
7.3.1 试样的制备
在无菌条件下打开样品包装,避开样品边缘,将样品剪成约为2mm×2mm的小块,对于定量较低
的样品(如生活用纸等),可将其剪成约为10mm×10mm的小块,称取0.75g试验样片分装包好,每个
样品至少称取6份试样备用。必要时,可采用高压灭菌法(121℃,103kPa,15min)对试样进行灭
菌,如果高压灭菌法不适用,可采用环氧乙烷或其他合适方法对试样进行灭菌。若试样进行过灭菌处
理,应在报告中注明灭菌方式。
7.3.2 对照样的制备
可选用与待测样品同等材质、同等大小但未......
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