路径: 主页 > GB/T > 第721页 > GB/T 43584.1-2025 | 标准编号 | GB/T 43584.1-2025 (GB/T43584.1-2025) | | 中文名称 | 生物技术 大规模并行测序 第1部分：核酸与文库制备 | | 英文名称 | Biotechnology - Massively parallel sequencing - Part 1: Nucleic acid and library preparation | | 行业 | 国家标准 (推荐) | | 中标分类 | A40 | | 国际标准分类 | 07.080 | | 字数估计 | 18,165 | | 发布日期 | 2025-10-31 | | 实施日期 | 2026-05-01 | | 发布机构 | 国家市场监督管理总局、国家标准化管理委员会 | GB/T 43584.1-2025: 生物技术 大规模并行测序 第1部分：核酸与文库制备
ICS 07.080
CCSA40
中华人民共和国国家标准
生物技术 大规模并行测序
第1部分:核酸与文库制备
(ISO 20397-1:2022,IDT)
2025-10-31发布
2026-05-01实施
国 家 市 场 监 督 管 理 总 局
国 家 标 准 化 管 理 委 员 会 发 布
目次
前言 Ⅲ
引言 Ⅳ
1 范围 1
2 规范性引用文件 1
3 术语和定义 1
4 核酸样品质量评价 2
4.1 通则 2
4.2 样本定量 2
4.3 样本纯度 2
4.4 样本完整性 2
5 核酸文库的制备 3
5.1 通则 3
5.2 片段化 3
5.3 通用序列的添加 4
5.4 大小选择 5
5.5 扩增 5
5.6 纯化和清洗程序 5
5.7 文库定量 6
5.8 文库定性 6
6 验证 6
7 参考资料或对照 7
7.1 通则 7
7.2 对照样品 7
7.3 阳性对照 7
7.4 阴性对照 7
7.5 无模板对照 7
7.6 内参对照 7
7.7 参考资料 8
8 污染 8
8.1 通则 8
8.2 初始样本评估 8
8.3 协议和操作程序 8
附录A(资料性) 文库构建前样品质量评估检查表 9
附录B(资料性) 选定的 MPS平台和应用程序的质量标准示例 10
附录C(资料性) 参考资料清单 12
参考文献 13
前言
本文件按照GB/T 1.1-2020《标准化工作导则 第1部分:标准化文件的结构和起草规则》的规定
起草。
本文件是 GB/T 43584《生物技术 大规模并行测序》的第1部分,GB/T 43584已经发布了以下
部分:
---第1部分:核酸与文库制备;
---第2部分:测序数据的质量评估。
本文件等同采用ISO 20397-1:2022《生物技术 大规模并行测序 第1部分:核酸与文库制备》。
请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。
本文件由全国生化检测标准化技术委员会(SAC/TC387)提出并归口。
本文件起草单位:中国测试技术研究院生物研究所、苏州大学附属第一医院、中国人民解放军总医
院第三医学中心、中国计量科学研究院、赛纳生物科技(北京)有限公司、四川徕伯益自动化技术有限公
司、南京医科大学第一附属医院、迈克生物股份有限公司、深圳市海普洛斯生物科技有限公司、南京大学
医学院附属鼓楼医院、深圳赛陆医疗科技有限公司、深圳华大智造科技股份有限公司、深圳市真迈生物
科技有限公司、圣湘生物科技股份有限公司、成都市第三人民医院、迪飞医学科技(南京)有限公司、上海
睿璟生物科技有限公司、苏州百源基因技术有限公司、瑞孚迪生物医学(上海)有限公司、重庆浦洛通生
命科技集团有限公司、纳昂达(南京)生物科技有限公司、广州金墁利医药科技有限公司、中国计量测试
学会、四川省轻工业研究设计院有限公司、四川振兴检测科技股份有限公司。
本文件主要起草人:周李华、徐杰、易艳、王玉飞、曾昭宇、朱琼芳、许明炎、徐建、刘二凯、陈子天、
沈瀚、龙腾镶、董莲华、周万青、杨丽、梁冬、颜钦、陈芳、刘佳、郑晶、车团结、韩勋领、姜展樾、王永攀、
车妍、张爱铃、杨扬仲夫、孟宪法、李青松、何强、吴强、陈廷龙、姚曾、胡春红、李慧。
引 言
大规模并行测序(MPS)是一种利用大规模并行处理进行核酸测序的高通量分析方法,该方法可在
相对较短时间内对不同生物体的全基因组、转录组和特定靶核酸进行研究。
MPS已用于许多生命科学领域,能对数百万乃至数千万个核苷酸碱基进行测定和高通量分析。生
物体内脱氧核糖核酸和核糖核酸聚合物的生物变异为准确测定序列带来了挑战。通过 MPS测定,序
列质量取决于许多因素,包括但不限于样品质量、文库制备、平台选择及测序数据质量。
GB/T 43584拟由以下部分构成:
---第1部分:核酸与文库制备。目的在于规定测序和数据生成前文库制备和文库质量评估的一
般准则和注意事项。
---第2部分:测序数据的质量评估。目的在于基于第1部分开展具体操作和数据质量控制,并为
第3部分提供研究基础。
---第3部分:宏基因组学的总体要求和指南。目的在于在第1部分和第2部分的基础上,规定宏
基因组学从样品制备、生成和分析测序数据的准则。
MPS制备的核酸与文库的质量对于获得高质量的序列数据至关重要。通过对 MPS的上游处理步
骤进行控制,并系统评估核酸样本和文库的测序适用性,能显著改善 MPS结果的质量、优化下游分析
流程,从而确保基于 MPS数据所得结论的可靠性。
生物技术 大规模并行测序
第1部分:核酸与文库制备
1 范围
本文件规定了核酸样品质量评估的一般要求和指导原则。
本文件规定了测序和数据生成之前的文库制备和文库质量评估的一般指导方针。
2 规范性引用文件
下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中,注日期的引用文
件,仅该日期对应的版本适用于本文件;不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于
本文件。
GB/T 42077-2022 生物技术 核酸靶序列定量方法的性能评价要求 qPCR法和dPCR法
(ISO 20395:2019,IDT)
3 术语和定义
GB/T 42077-2022界定的以及下列术语和定义适用于本文件。
3.1
接头 adapter
一种已知序列的寡核苷酸,经酶促加入(例如连接酶或聚合酶链反应)至DNA/cDNA片段的末端。
3.2
条形码 barcode
索引 index
通常是6个或更多核苷酸组成的短序列,在单个测序通道、芯片上并行测序时,确保能准确区分不
同来源样本的数据。
注:条形码通常位于测序接头(3.1)内。
3.3
编码 barcoding
建立索引 indexing
独特的DNA序列识别。
一种能让多个样本进行测序的方法。
注:每个样本都由一个唯一的条形码(3.2......
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