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[PDF] GB/T 8313-2018 - 自动发货. 英文版

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GB/T 8313-2018 英文版 165 GB/T 8313-2018 3分钟内自动发货[PDF],有增值税发票。 茶叶中茶多酚和儿茶素类含量的检测方法 有效

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基本信息
标准编号 GB/T 8313-2018 (GB/T8313-2018)
中文名称 茶叶中茶多酚和儿茶素类含量的检测方法
英文名称 Determination of total polyphenols and catechins content in tea
行业 国家标准 (推荐)
中标分类 X55
国际标准分类 67.140.10
字数估计 10,135
发布日期 2018-07-13
实施日期 2018-11-01
起草单位 中华全国供销合作总社杭州茶叶研究院、国家茶叶质量监督检验中心、泉州出入境检验检疫局综合技术服务中心、福建日春实业有限公司
归口单位 全国茶叶标准化技术委员会(SAC/TC 339)
提出机构 中华全国供销合作总社
发布机构 国家市场监督管理总局、中国国家标准化管理委员会

GB/T 8313-2018: 茶叶中茶多酚和儿茶素类含量的检测方法
GB/T 8313-2018 英文名称: Determination of total polyphenols and catechins content in tea
1 范围
本标准规定了用高效液相色谱法(HPLC)测定茶叶中儿茶素类含量,用分光光度法测定茶叶中茶
多酚含量的方法。
本标准适用于茶及茶制品中儿茶素类及茶多酚含量的测定。
2 规范性引用文件
下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件,仅注日期的版本适用于本文
件。凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。
GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法
GB/T 8302 茶 取样(GB/T 8302-2013,ISO 1839:1980,NEQ)
GB/T 8303 茶 磨碎试样的制备及其干物质含量测定(GB/T 8303-2013,ISO 1572:1980,
MOD)
3 茶叶中儿茶素类的检测---HPLC法
3.1 原理
茶叶磨碎试样中的儿茶素类用70%的甲醇水溶液在70℃水浴上提取,儿茶素类的测定用C18柱、
检测波长278nm、梯度洗脱、HPLC分析,用儿茶素类标准物质外标法直接定量,也可用ISO 国际环试
结果儿茶素类与咖啡碱的相对校正因子(RRFStd)来定量。
3.2 仪器
3.2.1 分析天平:精度0.0001g。
3.2.2 水浴:70℃±1℃。
3.2.3 离心机:转速3500r/min。
3.2.4 高效液相色谱仪(HPLC):包含梯度洗脱、紫外检测器及色谱工作站。
3.3 试剂
3.3.1 除非另有说明,在分析中所使用试剂均为分析纯,用水为GB/T 6682规定的三级水。
3.3.2 乙腈:色谱纯。
3.3.3 甲醇。
3.3.4 乙酸:色谱纯。
3.3.5 70%甲醇水溶液。
3.3.6 乙二胺四乙酸二钠(EDTA-2Na)溶液:10mg/mL(现配)。
3.3.7 抗坏血酸溶液:10mg/mL(现配)。
3.3.8 稳定溶液:分别将25mLEDTA-2Na溶液(3.3.6),25mL抗坏血酸溶液(3.3.7),50mL乙腈
(3.3.2)加入500mL容量瓶中,用水定容至刻度,摇匀。
3.3.9 液相色谱流动相
3.3.9.1 流动相A:分别将90mL乙腈(3.3.2),20mL乙酸(3.3.4),2mLEDTA-2Na溶液 (3.3.6)加入
1000mL容量瓶中,用水定容至刻度,摇匀。溶液需过0.45μm膜(3.3.12)。
3.3.9.2 流动相B:分别将800mL乙腈(3.3.2),20mL乙酸(3.3.4),2mLEDTA-2Na溶液 (3.3.6)加
入1000mL容量瓶中,用水定容至刻度,摇匀。溶液需过0.45μm膜(3.3.12)。
3.3.10 标准储备溶液
3.3.10.1 咖啡碱储备溶液:2.00mg/mL。
3.3.10.2 没食子酸(GA)储备溶液:0.100mg/mL。
3.3.10.3 儿茶素类储备溶液:儿茶素(+C)1.00mg/mL,表儿茶素(EC)1.00mg/mL,表没食子儿茶
素(EGC)2.00mg/mL,表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)2.00mg/mL,表儿茶素没食子酸酯
(ECG)2.00mg/mL。
3.3.11 标准工作溶液:用稳定溶液(3.3.8)配制。
标准工作溶液浓度:没食子酸5μg/mL~25μg/mL、咖啡碱50μg/mL~150μg/mL、+C50μg/mL~
150μg/mL、EC50μg/mL~150μg/mL、EGC100μg/mL~300μg/mL,EGCG100μg/mL~400μg/mL、
ECG50μg/mL~200μg/mL。
3.3.12 0.45μm有机相滤膜。
3.4 操作方法
3.4.1 取样
按GB/T 8302的规定。
3.4.2 试样制备
按GB/T 8303的规定。
3.4.3 测定步骤
3.4.3.1 干物质含量测定
按GB/T 8303的规定。
3.4.3.2 供试液的制备
3.4.3.2.1 母液:称取0.2g(精确到0.0001g)均匀磨碎的试样(3.4.2)于10mL离心管中,加入在70℃
中预热过的70%甲醇水溶液(3.3.5)5mL,用玻璃棒充分搅拌均匀湿润,立即移入70℃水浴(3.2.2)中,
浸提10min(隔5min搅拌一次),浸提后冷却至室温,转入离心机在3500r/min转速下离心10min,
将上清液转移至10mL容量瓶。残渣再用5mL的70%甲醇水溶液提取一次,重复以上操作。合并提
取液定容至10mL,摇匀,用0.45μm膜(3.3.12)过滤,待用(该提取液在4℃下可至多保存24h)。
3.4.3.2.2 测试液:用移液管移取母液(3.4.3.2.1)2mL至10mL容量瓶中,用稳定溶液(3.3.8)定容至
刻度,摇匀,过0.45μm膜(3.3.12),待测。
3.4.3.3 色谱条件
色谱条件如下:
---液相色谱柱:C18(粒径5μm,250mm×4.6mm);
---流动相流速:1mL/min;
---柱温:35℃;
---紫外检测器:λ=278nm;
---进样量:10μL;
梯度条件:100% A相保持10min;
15min内由100%A相→68%A相、32%B相;
68%A相、32%B相保持10min;
100%A相。
3.4.3.4 测定
待流速和柱温稳定后,进行空白运行。准确吸取10μL混合标准系列工作液注射入 HPLC。在相
同的色谱条件下注射10μL测试液。测试液以峰面积定量。
3.4.3.5 儿茶素、咖啡碱标准样品液相色谱图
色谱图参见附录A。
3.5 结果计算
3.5.1 计算方法
以儿茶素类标准物质定量,按式(1)计算;以咖啡碱标准物质定量,按式(2)计算。
3.5.4 重复性
同一样品儿茶素类总量的两次测定值相对误差应≤10%,若测定值相对误差在此范围,则取两次测
得值的算术平均值为结果,保留小数点后两位。
4 茶叶中茶多酚的检测
4.1 原理
茶叶磨碎样中的茶多酚用70%的甲醇水溶液在70℃水浴上提取,福林酚试剂氧化茶多酚中-OH
基团并显蓝色,最大吸收波长λ为765nm,用没食子酸作校正标准定量茶多酚。
4.2 仪器
4.2.1 分析天平:精度0.001g。
4.2.2 水浴:70℃±1℃。
4.2.3 离心机:转速3500r/min。
4.2.4 分光光度计。
4.3 试剂
4.3.1 甲醇。
4.3.2 碳酸钠(Na2CO3)。
4.3.3 70%甲醇水溶液。
4.3.4 福林酚(Folin-Ciocalteu):1mol/L。
4.3.5 10%福林酚试剂(现配):将20mL福林酚试剂(4.3.4)转移到200mL容量瓶中,用水定容并
摇匀。
4.3.6 7.5%碳酸钠(Na2CO3)溶液:称取37.50g±0.01g碳酸钠(Na2CO3)(4.3.2),加适量水溶解,转
移至500mL容量瓶中,定容至刻度,摇匀(室温下可保存1个月)。
4.3.7 没食子酸标准储备溶液(1000μg/mL):称取0.110g±0.001g没食子酸(GA,相对分子质量
188.14),于100mL容量瓶中溶解并定容至刻度,摇匀 (现配)。
4.3.8 没食子酸工作液:用移液管分别移取1.0mL、2.0mL、3.0mL、4.0mL、5.0mL的没食子酸标准
储备溶液(4.3.7)于100mL容量瓶中,分别用水定容至刻度,摇匀,浓度分别为10μg/mL、20μg/mL、
30μg/mL、40μg/mL、50μg/mL。
4.4 操作方法
4.4.1 供试......
   
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