标准搜索结果: 'NY/T 2288-2021'
| 标准编号 | NY/T 2288-2021 (NY/T2288-2021) | | 中文名称 | 黄瓜绿斑驳花叶病毒检疫检测与鉴定方法 | | 英文名称 | (Cucumber green mottle mosaic virus quarantine, detection and identification method) | | 行业 | 农业行业标准 (推荐) | | 中标分类 | B16 | | 字数估计 | 13,172 | | 发布日期 | 2021-05-07 | | 实施日期 | 2021-11-01 | | 旧标准 (被替代) | NY/T 2288-2012 | | 起草单位 | National Agricultural Technology Extension Service Center | | 归口单位 | 全国农业技术推广服务中心 | | 标准依据 | 农业农村部公告第424号 | NY/T 2288-2021: 黄瓜绿斑驳花叶病毒检疫检测与鉴定方法
NY/T 2288-2021 英文名称: (Cucumber green mottle mosaic virus quarantine, detection and identification method)
中华人民共和国农业行业标准
NY/T 2288—2021
代替NY/T 2288—2012
黄瓜绿斑驳花叶病毒检疫检测与鉴定方法
中华人民共和国农业农村部发布
前 言
本文件按照GB/T 1.1—2020《标准化工作导则第1部分：际准化文的结构和起草规则》的规定起草。
本文件代替NY/T 2288—2012《黄瓜绿斑驳花叶病毒检疫检测与鉴定方法》,与NY/T 2288—2012相比，除结构调整和编辑性改动外，主要技术变化如下：
a) 逆转录聚合酶链式反应检测法反应体系运用的引物修改为更为灵敏的CGMMV-654F/CGM-MV-654R引物序列(上游引物Primer F:5'-CGTGGTAAGCGGCATTCTAAACCTC-3';下游引物Primer R:5'-CCGCAAACCAATGAGCAAACCG-3');
b)修订了结果判定逻辑顺序，调整为典型症状初步判断，快速检测高度疑似，酶联免疫吸附测定法和逆转录聚合酶链式反应检测法最终判定；
c)增加了档案保存章节及要求；
d)修订了样品取样量的规定，区分了果实和叶片的取样量。
请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。
本文件由农业农村部种植业管理司提出。
本文件由全国植物检疫标准化技术委员会(SAC/TC 271)归口。
本文件起草单位：全国农业技术推广服务中心、沈阳农业大学、辽宁省绿色农业发展中心、四川省农业农村厅植物检疫站、四川农业大学。
本文件主要起草人：王福祥、王晓亮、吴元华、夏子豪、毕馨月、蔡明、江冬、郭迪金、李小松、何珊、尚静。
本文件及其所代替文件的历次版本发布情况为：
——2012年首次发布为NY/T 2288—2012;
——本次为第一次修订。
1 范围
本文件规定了黄瓜绿斑驳花叶病毒的取样方法、检疫检测、结果判定和报告、样品处理和档案保存。本文件适用于农业植物检疫中黄瓜绿斑驳花叶病毒的检疫检测与鉴定。
2规范性引用文件
下列文件中的内容通过文中的规范性可用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件用最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。
3 术语和定义
本文件没有需要界定的术语和定义
7取样
7.1 种子
取样数量与方法按GB15569的规定进行，取样要充足，具有代表性。
7.2叶片及果实
随机选取发病或疑似发病叶片或果实，以幼嫩叶片和果实为主。每份果实样品不少于200 g,叶片不少于10g,装入自封袋中密封4℃保存，并注明植物名称、采集时间、地点、采集人等信息。
8 检测
8.1 症状检查
检查叶片、果梗、果实，与黄瓜绿斑驳花叶病毒病的典型症状进行比较(见附录B)。
8.2快速诊断
快速诊断试纸条或诊断试剂盒检测法见附录C。如采用市售的试纸条或试剂盒，按说明操作。
8.3酶联免疫吸附测定
黄瓜绿斑驳花叶病毒酶联免疫吸附测定法见附录D。如采用市售的试剂盒，按说明操作。
8.4逆转录聚合酶链式反应检测(RT-PCR)
黄瓜绿斑驳花叶病毒逆转录聚合酶链式反应检测法(RT-PCR)见附录E。如采用市售的试剂盒，按说明操作。
9 结果判定和报告
9.1 结果判定
9.1.1 典型症状
果实发病且符合典型症状，可初步判定。
9.1.2 快速诊断结果
快速诊断试纸条或诊断试剂盒检测结果为阳性的，可判定为高度疑似。
9.1.3酶联免疫吸附测定法
在阴性对照光密度值OD值≤0.1,且阳性对照OD值大于阴性对照OD值2倍的前提下，样品孔OD值大于阴性对照OD值2倍时，判定为阳性反应，即样品带黄瓜绿斑驳花叶病毒。
9.1.4逆转录聚合酶链式反应检测(RT-PCR)
观察电泳结果，在阳性对照在654 bp处有条带出现，且空白、阴性对照无条带出现的前提下，待测样品在654 bp处有条带出现，判定为阳性反应，即样品带黄瓜......
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