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| 标准编号 | SN/T 1146-2010 (SN/T1146-2010) | | 中文名称 | 烟草环斑病毒检疫鉴定方法 | | 英文名称 | Detection and identification of tobacco ringspot virus | | 行业 | 商检行业标准 (推荐) | | 中标分类 | B16 | | 国际标准分类 | 07.080 | | 字数估计 | 9,915 | | 发布日期 | 2010-05-27 | | 实施日期 | 2010-12-01 | | 旧标准 (被替代) | SN/T 1146-2002 | | 引用标准 | SN/T 1840; SN/T 2122 | | 标准依据 | National Quality Inspection (2010) 290; industry standard filing Notice 2010 No. 10 (No. 130 overall) | | 发布机构 | 海关总署 | | 范围 | 本标准规定了进出境植物检疫中对烟草环斑病毒的检疫鉴定方法。本标准适用于进出境植物及其产品中烟草环斑病毒的检疫鉴定。 |
SN/T 1146-2010
Detection and identification of tobacco ringspot virus
中华人民共和国出入境检验检疫行业标准
代替SN/T 1146-2002
烟草环斑病毒检疫鉴定方法
2010-05-27发布
2010-12-01实施
中 华 人 民 共 和 国
国家质量监督检验检疫总局 发 布
前言
本标准按照GB/T 1.1-2009给出的规则起草。
本标准代替SN/T 1146-2002《烟草环斑病毒检疫鉴定方法》。
本标准与SN/T 1146-2002相比,主要技术变化如下:
---现场检疫抽样按照SN/T 2122-2008《进出境植物及植物产品检疫抽样》执行(见6.2);
---删除了原标准规范性附录A;
---增加了“症状检查”一节(见6.3);
---免疫电镜方法按照SN/T 1840-2006《植物病毒免疫电镜检测方法》标准(见7.3)。
本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。
本标准起草单位:中华人民共和国深圳出入境检验检疫局。
本标准主要起草人:陈枝楠、邓琼、郑耘、凌杏园、郑文华、王东勇。
本标准所代替标准的历次版本发布情况为:
---SN/T 1146-2002。
烟草环斑病毒检疫鉴定方法
1 范围
本标准规定了进出境植物检疫中对烟草环斑病毒的检疫鉴定方法。
本标准适用于进出境植物及其产品中烟草环斑病毒的检疫鉴定。
2 规范性引用文件
下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件,仅注日期的版本适用于本文
件,凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。
SN/T 1840 植物病毒免疫电镜检测方法
SN/T 2122 进出境植物及植物产品检疫抽样规则
3 原理
virus1)。该病毒为等轴多面体球状病毒,直径为25nm~29nm,属线虫传多面体病毒属成员,可侵染
54科、300多种植物,其中主要的经济作物有豆类、马铃薯、甘薯、烟草、西瓜、黄瓜、甜瓜、胡萝卜、唐菖
蒲、百合、鸢尾、李属、苹果、葡萄、甜樱桃等。受TRSV侵染的植株症状因寄主而异,通常叶片出现环状
或线状纹、褪绿斑或斑驳、坏死斑;根腐烂、茎顶枯、所结的果畸形等。该病毒主要依靠线虫和种子进行
传播,主要分布于北美洲、大洋洲、欧洲、非洲等地区,具有寄主广泛,危害症状明显、免疫原性强、容易制
备高滴度、专化性强的病毒抗血清等特点(参见附录A)。通过血清学双抗体夹心法(DAS-ELISA)结合
鉴别寄主生物学鉴定方法或免疫电镜检测,作为检疫工作中鉴定该病毒的依据。
4 用具、设备、设施
研钵、微量榨汁机、酶标仪、低速离心机(转速为4000r/min)、生物培养箱(具有光照,温度可调范
围为0℃~50℃)、酶联板(48孔或96孔)、Eppendorf管(体积为1.5mL)、单道移液器(10μL、100
μL、1000μL)、8道移液器(100μL或200μL)、恒温水浴锅或恒温培养箱、分析电子天平、pH计、白瓷
盘(40cm×50cm)、钝头镊子、隔离检疫温(网)室。
5 试剂
5.1 10×PBST缓冲液
将氯化钠(NaCl)80g、磷酸二氢钾(KH2PO4)2g、磷酸氢二钠(Na2HPO4)11.5g、氯化钾(KCl)
2g、吐温-20(Tween-20)5......
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