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[PDF] SN/T 2531-2010 - 英文版

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SN/T 2531-2010 英文版 369 SN/T 2531-2010 [PDF]天数 >=3 贝类和水样中札如病毒检测方法 普通RT-PCR方法和实时荧光RT-PCR方法 有效
基本信息
标准编号 SN/T 2531-2010 (SN/T2531-2010)
中文名称 贝类和水样中札如病毒检测方法 普通RT-PCR方法和实时荧光RT-PCR方法
英文名称 Determination of Sapovirus in shellfish and water. Conventional RT-PCR and real-time RT-PCR
行业 商检行业标准 (推荐)
中标分类 C53
国际标准分类 07.100.30
字数估计 14,183
发布日期 2010-03-02
实施日期 2010-09-16
引用标准 SN/T 1193
标准依据 National Quality Inspection (2010) 98; industry standard filing Notice 2010 No. 5 (No. 125 overall)
发布机构 海关总署
范围 本标准规定了贝类和水样中札如病毒普通RT-PCR方法和实时荧光RT-RCR方法。本标准适用于贝类和水样中札如病毒的定性检测。

SN/T 2531-2010 Determination of Sapovirus in shellfish and water.Conventional RT-PCR and real-time RT-PCR 书中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 SN/T2531-2010 贝类和水样中札如病毒检测方法 普通 RT-PCR方法和实时荧光RT-PCR方法 2010-03-02发布 2010-09-16实施 中 华 人 民 共 和 国 国家质量监督检验检疫总局 发 布 前言 本标准附录A为规范性附录,附录B为资料性附录。 本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。 本标准起草单位:中华人民共和国上海出入境检验检疫局。 本标准主要起草人:潘良文、卢钟山、邓恬宁、吕蓉、张舒亚、李想、刘月明、高琴。 本标准系首次发布的出入境检验检疫行业标准。 SN/T2531-2010 贝类和水样中札如病毒检测方法 普通 RT-PCR方法和实时荧光RT-PCR方法 1 范围 本标准规定了贝类和水样中札如病毒普通RT-PCR方法和实时荧光RT-PCR方法。 本标准适用于贝类和水样中札如病毒的定性检测。 2 规范性引用文件 下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件,其随后所有 的修改单(不包括勘误的内容)或修订版均不适用于本标准,然而,鼓励根据本标准达成协议的各方研究 是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件,其最新版本适用于本标准。 SN/T 1193 基因检验实验室技术要求 3 术语和定义 下列术语和定义适用于本标准。 3.1 每个反应管内的荧光信号达到设定的域值时所经历的循环数。 3.2 一种包含病毒特异性cDNA片段的重组质粒分子,可作为病毒PCR检测中的阳性对照。 4 方法提要 用合适的裂解液(如Tri-reagent)提取贝类样品中病毒RNA,并根据札如病毒RNA3’末端含有 Poly(A)的结构,用连接Oligo(dT)25的磁珠特异性吸附札如病毒RNA进行纯化。对水样中的病毒进 行富集后,采用合适的方法提取和纯化病毒RNA。利用普通RT-PCR或实时荧光RT-PCR方法进行 检测。本研究通过构建质粒标准分子(每个质粒分子包含1拷贝扩增片段),确定札如病毒普通RT- PCR体系检测下限为100拷贝,实时荧光RT-PCR体系检测下限均为10拷贝。 5 试剂 所有实验用试剂均为分析纯;除特别说明外,实验用水为蒸馏水或去离子水。 5.1 阳性标本:札如病毒,-80℃冰箱保存;或含札如病毒检测目的片段的质粒标准分子,-20℃冰 箱保存。 5.2 甘氨酸缓冲液:见附录A.1.1。 5.3 PEG8000溶液:见附录A.1.2。 5.4 裂解液:Tri-reagent或其他等效裂解液(如:TRIzol)。 5.5 Oligo(dT)25磁珠:Dynabe......

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