标准搜索结果: 'SN/T 2574-2019'
| 标准编号 | SN/T 2574-2019 (SN/T2574-2019) | | 中文名称 | 出口蜂王浆中双甲脒及其代谢产物残留量的测定 液相色谱-质谱/质谱法 | | 英文名称 | Determination of amitraz and metabolites residues in royal-jelly for import and export -- LC-MS/MS method | | 行业 | 商检行业标准 (推荐) | | 中标分类 | C53 | | 国际标准分类 | 67.050 | | 字数估计 | 9,929 | | 发布日期 | 2019 | | 实施日期 | 2020-07-01 | | 发布机构 | 海关总署 | SN/T 2574-2019: 出口蜂王浆中双甲脒及其代谢产物残留量的测定 液相色谱-质谱/质谱法
SN/T 2574-2019 英文名称: Determination of amitraz and metabolites residues in royal-jelly for import and export -- LC-MS/MS method
中华人民共和国出入境检验检疫行业标准
中华人民共和国海关总署 发 布
出口蜂王浆中双甲脒及其代谢产物残留 量的测定 液相色谱 - 质谱/ 质谱法
代替 SN/T 2574- 2010
1 范围
本标准规定了蜂王浆中双甲脒及其代谢产物单甲脒，2, 4- 二甲基苯基甲酰胺和 2, 4- 二甲基苯胺
残留量的液相色谱 - 质谱/ 质谱法测定方法。
本标准适用于蜂王浆中双甲脒及其代谢产物单甲脒，2, 4- 二甲基苯基甲酰胺和 2, 4- 二甲基苯胺
残留量的测定和确证。
2 规范性引用文件
下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文
件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。
GB/T 6682 分析实验室用水规格和实验方法。
3 方法提要
试样加氨水溶液稀释后用氨水乙腈溶液沉淀蛋白并提取，通过中性氧化铝固相萃取柱对提取液
进行净化，采用液相色谱-质谱/ 质谱仪检测，双甲脒、单甲脒和 2, 4- 二甲基苯胺采用内标法定量，
2, 4- 二甲基苯基甲酰胺采用外标法定量。
4 试剂和材料
除非另有说明，所有试剂均为分析纯，水为 GB/T 6682 规定的一级水。
4.1 乙腈：色谱纯。
4.2 甲酸：色谱纯。
4.3 氨水：含量 25%~28%，分析纯。
4.4 5% 氨水溶液：量取 95 mL 水和 5 mL 氨水（4.3），混匀。
4.5 5% 氨水乙腈溶液：量取 95 mL 乙腈（4.1）和 5 mL 氨水（4.3），混匀。
4.6 0.15% 甲酸溶液：量取 900 mL 水和 1.5 mL 的甲酸（4.2），混匀，定容至 1 000 mL。
4.7 双甲脒标准品（C19H23N3，CAS 号： 33089-61-1）：纯度大于 99.0％。
4.8 2, 4- 二甲基苯胺标准品（C8H11N，CAS 号： 95-68-1）：纯度大于 99.0％。
4.9 单甲脒标准品（C10H14N2，CAS 号： 33089-74-6）：纯度大于 99.0％。
4.10 2, 4- 二甲基苯基甲酰胺标准品（C9H11NO，CAS 号： 60397-77-5 ：纯度大于 99.0％。
4.11 双甲脒 -D6 同位素内标标准品（C19H17D6N3）：纯度大于 99.0％。
4.12 2, 4- 二甲基苯胺 -D6 同位素内标标准品（C8H5D6N）：纯度大于 99.0％。
4.13 双甲脒标准储备液：准确称取 10 mg（精确到 0.1 mg）双甲脒标准品（4.7）于 100 mL 容量瓶中，
用乙腈（4.1）溶解并定容至刻度，配制成浓度为 100 μg/mL 的标准储备液，于 0℃ ~ 4℃冰箱内储存，
有效期 4 周。
4.14 2, 4- 二甲基苯胺标准储备液：准确称取 10 mg（精确到 0.1 mg）2, 4- 二甲基苯胺标准品（4.8）于
100 mL 容量瓶中，用乙腈（4.1）溶解并定容至刻度，配制成浓度为 100 μg/mL 的标准储备液，于 0℃ ~
4℃冰箱内储存，有效期 4 周。
4.15 单甲脒标准储备液：准确称取 10 mg（精确到 0.1 mg）单甲脒标准品（4.9）于 100 mL 容量瓶中，
用乙腈（4.1）溶解并定容至刻度，配制成浓度为 100 μg/mL 的标准储备液，于 0℃ ~ 4℃冰箱内储存，
有效期 4 周。
4.16 2, 4- 二甲基苯基甲酰胺标准储备液：准确称取 10 mg（精确到 0.1 mg）2, 4- 二甲基苯基甲酰胺标
准品（4.10）于 100 mL 容量瓶中，用乙腈（4.1）溶解并定容至刻度，配制成浓度为 100 μg/mL 的标准
储备液，于 0℃ ~ 4℃冰箱内储存，有效期 1 周。
4.17 双甲脒 -D6 同位素内标标准储备液：准确称取 10 mg（精确到 0.1 mg）双甲脒 -D6 同位素内标标
准品（4.11）于 100 mL 容量瓶中，用乙腈（4.1）溶解并定容至刻度，配制成浓度为 100 μg/mL 的标准
储备液，于 0℃ ~ 4℃冰箱内储存。
4.18 2, 4-二甲基苯胺-D6 同位素内标标准储备液：准确称取10 mg（精确到0.1 mg）2, 4-二甲基苯胺-D6
同位素内标标准品（4.12）于 100 mL 容量瓶中，用乙腈（4.1）溶解并定容至刻度，配制成浓度为 100
μg/mL 的标准储备液，于 0℃ ~ 4℃冰箱内储存。
4.19 标准工作溶液：根据需要用乙腈（4.1） 将标准储备液稀释至合适浓度的标准工作溶液，现用
现配。
4.20 中性氧化铝固相萃取柱：1 g，3mL（3 mL 乙腈和 3 mL 5% 氨水乙腈溶液依次活化），或相当者。
4.21 0.22 μm 微孔滤膜，有机相。
5 仪器和设备
5.1 液相色谱 - 质谱/ 质谱仪：配有电喷雾离子源（ESI）。
5.2 旋涡混合器。
5.3 离心机：转速大于 10 000 r/min。
5.4 电子天平：感量为 0.01 g 和 0.1 mg。
5.5 氮吹仪。
5.6 具塞离心管：15 mL 和 50 mL。
6 试样制备与保存
取代表性样品约 500 g，将其用力搅拌均匀，将试样均分成两份装入洁净容器内，密封，并标明
标记。一份作为试验样，另一份在 -18 ℃以下保存。在制样过程中，应防止样品受到污染或发生所测
物残留量的变化。
7 测定步骤
7.1 提取
称取约 2 g 试样（精确至 0.01 g）于 50 mL 聚塞离心管中，加入同位素内标（200 μL，100 ng/mL），
加 8 mL 5% 氨水溶液（4.4），2 000 r/min，涡旋混合 1 min，静置 5 min，加 10 mL 5% 氨水乙腈溶液
（4.5），2 000 r/min，涡旋混匀 1 min，静置 5 min，加 5% 氨水乙腈溶液（4.5）定容至 20 mL，涡旋混匀，
8 500 r/min 离心 5 min，移取上清液 2.0 mL，加 2 mL 5% 氨水乙腈溶液（4.5），涡旋混匀，8 500 r/min
离心 5 min，取上清液待净化。
7.2 净化
将提取溶液转移至中性氧化铝固相萃取柱（4.20），接收流出液，加 2 mL 5% 氨水乙腈溶液（4.5）
洗涤中性氧化铝固相萃取柱，接收全部流出液，40 ℃下氮气吹至 0.5 mL 以下，加乙腈（4.1）至 2
mL，再加 2 mL 水，涡旋混匀，过 0.22 μm 微孔滤膜（4.21），待 LC-MS/MS 测定。
7.3 测定
7.3.1 液相色谱参考条件
7.3.1.1 液相色谱柱：C18 色谱柱，150 mm × 4.6 mm （内径），5 μm，或相当者。
7.3.1.2 进样量：10 μL。
7.3.1.3 柱温：25℃。
7.3.1.4 流动相：0.15% 甲酸溶液（4.6）和乙腈（4.1）梯度洗脱，见表 1。
7.3.2 质谱/质谱参考条件
7.3.2.1 电离方式：电喷雾电离，正离子。
7.3.2.2 扫描模式：多反应监测（MRM）。
7.3.2.3 鞘气、碰撞气等均为高纯氮气；使用前应调节各参数使质谱灵敏度达到检测要求，参考条件
及监测离子对（m/z）见附录 A。
7.4 标准曲线的绘制
取空白样品按照 7.1 和 7.2 处理。用所得的样品溶液将标准工作溶液稀释得到浓度为 0.00 ng/mL、
0.25 ng/mL、0.5 ng/mL、5 ng/mL、10 ng/mL、15 ng/mL 的标准工作曲线溶液，按浓度由低到高的顺序
进样检测，外标法以定量离子峰面积-浓度作图，内标法以定量离子峰面积与内标物峰面积比值-浓
度作图，得到标准曲线。
7.5 定性
按照上述条件测定试样和标准工作溶液，如果试样中的质量色谱峰保留时间与标准工作溶液一
致（变化范围在 ±2.5% 之内）；样品中目标化合物的定性离子的相对丰度与浓度相当的标准溶液一
致，相对丰度偏差不超过表 2 的规定，则可判断样品中存在待测化合物。
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