路径: 主页 > SN/T > 第83页 > SN/T 3398-2012 | 标准编号 | SN/T 3398-2012 (SN/T3398-2012) | | 中文名称 | 大豆检疫性病毒多重实时荧光RT-PCR检测方法 | | 英文名称 | Detection for quarantine viruses on soybean by multiple-real time RT-PCR | | 行业 | 商检行业标准 (推荐) | | 字数估计 | 10,184 | | 引用标准 | SN/T 2122 | | 标准依据 | 国质检认(2012)777号;行业标准备案公告2013年第4号(总第160号) | | 发布机构 | 海关总署 | | 范围 | 本标准规定了烟草环斑病毒、南芥菜花叶病毒、番茄环斑病毒、南方菜豆花叶病毒和菜豆荚斑驳病毒的多重实时荧光RT-PCR检测方法。本标准适用于大豆及其加工产品中上述五种病毒的检测。 | SN/T 3398-2012
Detection for quarantine viruses on soybean by multiple-real time RT-PCR
中华人民共和国出入境检验检疫行业标准
大豆检疫性病毒多重实时荧光RT-PCR
检测方法
2012-12-12发布
2013-07-01实施
中 华 人 民 共 和 国
国家质量监督检验检疫总局 发 布
前言
本标准按照GB/T 1.1-2009给出的规则起草。
本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。
本标准起草单位:中华人民共和国深圳出入境检验检疫局、深圳市检验检疫科学研究院。
本标准主要起草人:郑耘、章桂明、冯建军、卢小雨、汪莹、李一农。
大豆检疫性病毒多重实时荧光RT-PCR
检测方法
1 范围
本标准规定了烟草环斑病毒、南芥菜花叶病毒、番茄环斑病毒、南方菜豆花叶病毒和菜豆荚斑驳病
毒的多重实时荧光RT-PCR检测方法。
本标准适用于大豆及其加工产品中上述五种病毒的检测。
2 规范性引用文件
下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件,仅注日期的版本适用于本文
件。凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。
SN/T 2122 进出境植物及植物产品检疫抽样
3 术语和定义
下列术语和定义适用于本文件。
3.1
逆转录-聚合酶链式反应,简称RT-PCR,在适宜的反应条件下,以样品中抽提出的RNA为模板,逆
转录酶在适宜的反应条件下,RNA被逆转录成cDNA,再以cDNA为模板进行PCR扩增。
3.2
多重实时荧光RT-PCR multiple-realtimeRT-PCR
依据荧光信号随着RT-PCR产物数量增加而同步放大的原理,在RT-PCR扩增的过程中,同时连
续监测反应体系中不同标记的多种病毒扩增片段荧光信号的变化,根据荧光信号基线的平均值和平均
标准差,得出大于平均值的荧光值即阈值,收集荧光信号增强到预定阈值时的PCR循环次数,即Ct值。
根据多种病毒荧光信号的Ct值判断样品是否带有该多种检疫性病毒。
4 原理
采用多重实时荧光RT-PCR方法检测烟草环斑病毒、南芥菜花叶病毒、番茄环斑病毒、南方菜豆花
叶病毒和菜豆荚斑驳病毒(参见附录A)。
5 仪器设备和用具
烘箱、高压灭菌锅、水浴锅、低温冰箱、纯水仪、高速冷冻离心机、实时荧光PCR仪、微量移液器
(0.1μL~2.5μL,2μL~20μL,20μL~200μL,......
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