路径: 主页 > SN/T > 第72页 > SN/T 3963-2014 | 标准编号 | SN/T 3963-2014 (SN/T3963-2014) | | 中文名称 | 桃丛簇花叶病毒检测方法 | | 英文名称 | Detection of Peach rosette mosaic virus | | 行业 | 商检行业标准 (推荐) | | 中标分类 | B16 | | 国际标准分类 | 07.080 | | 字数估计 | 16,195 | | 发布日期 | 4/9/2014 | | 实施日期 | 11/1/2014 | | 标准依据 | 国质检认(2014)210号;行业标准备案公告2015年第1号(总第181号) | | 发布机构 | 海关总署 | | 范围 | 本标准规定了桃丛簇花叶病毒的检疫鉴定方法。本标准适用于桃树、葡萄等植物材料中桃丛簇花叶病毒的检疫和鉴定。 | SN/T 3963-2014
(Peach rosette mosaic virus detection method)
中华人民共和国出入境检验检疫行业标准
桃丛簇花叶病毒检测方法
2014-04-09发布
2014-11-01实施
中 华 人 民 共 和 国
国家质量监督检验检疫总局 发 布
前言
本标准按照GB/T 1.1-2009给出的规则起草。
本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。
本标准起草单位:中国检验检疫科学研究院、中华人民共和国浙江出入境检验检疫局、中华人民共
和国天津出入境检验检疫局、中华人民共和国宁波出入境检验检疫局。
本标准主要起草人:马云霞、张明哲、郭京泽、闻伟刚、李明福、朱水芳。
桃丛簇花叶病毒检测方法
1 范围
本标准规定了桃丛簇花叶病毒的检疫鉴定方法。
本标准适用于桃树、葡萄等植物材料中桃丛簇花叶病毒的检疫和鉴定。
2 原理
因组核酸序列的特殊性是本标准制定的主要依据。相关资料参见附录A。
3 仪器设备、用具及试剂
3.1 仪器设备
酶标检测仪、实时荧光PCR仪、低温冰箱、恒温箱、高压灭菌锅、电子分析天平、台式高速冷冻离心
机、恒温水浴锅、制冰机等。
3.2 用具
微量可调移液器(量程分别为2.5μL、10μL、100μL、200μL和1mL)及灭菌的吸头、1.5mL离心
管、研钵、酶联板、0.2mLPCR管、96孔PCR反应板及盖子等。
3.3 试剂
主要试剂、缓冲液、引物和探针序列等见附录B和附录C。
4 检测与鉴定
4.1 血清学(双抗体夹心酶联免疫吸附测定)
4.1.1 包被抗体
将PRMV的抗体用包被缓冲液稀释至工作浓度,加入酶联板中,每孔加入100μL。将酶联板加盖
(或用保鲜膜密封后)放入保湿盒中,置于37℃恒温箱中温育2h(或4℃冰箱过夜)。之后每孔加入
300μLPBST洗板3次,每次3min。
4.1.2 样品制备
称取待检植物叶片0.2g,加入2mL样品抽提缓冲液,充分研磨后,转入1.5mL的离心管中,
5......
|