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| 标准编号 | SN/T 4275-2015 (SN/T4275-2015) | | 中文名称 | 国境口岸类鼻疽伯克霍尔德菌的实时荧光PCR检测方法 | | 英文名称 | Detection of Burkholderia pseudomallei by real-time PCR at frontier ports | | 行业 | 商检行业标准 (推荐) | | 中标分类 | C62 | | 字数估计 | 8,820 | | 发布日期 | 2015-05-26 | | 实施日期 | 2016-01-01 | | 引用标准 | GB/T 6682; GB 19489 | | 标准依据 | 国质检认[2015]224号;行业标准备案公告2016年第1号(总第193号) | | 发布机构 | 海关总署 |
SN/T 4275-2015
Detection of Burkholderia pseudomallei by real-time PCR at frontier ports
中华人民共和国出入境检验检疫行业标准
国境口岸类鼻疽伯克霍尔德菌的实时
荧光PCR检测方法
2015-05-26发布
2016-01-01实施
中 华 人 民 共 和 国
国家质量监督检验检疫总局 发 布
前言
本标准按照GB/T 1.1-2009给出的规则起草。
本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。
本标准起草单位:中华人民共和国四川出入境检验检疫局、中华人民共和国黑龙江出入境检验检疫
局、上海之江生物科技股份有限公司。
本标准主要起草人:田绿波、樊学军、鞠文东、陈肖潇、石莹、杨雨、倪卫琴、朱旭平、王宁。
国境口岸类鼻疽伯克霍尔德菌的实时
荧光PCR检测方法
1 范围
本标准规定了国境口岸类鼻疽伯克霍尔德菌荧光PCR检测的对象,标本的采集、运输和保存,检测
程序及结果报告。
本标准适用于国境口岸类鼻疽伯克霍尔德菌的筛选检测。
2 规范性引用文件
下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件,仅注日期的版本适用于本文
件。凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。
GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法
GB 19489 实验室 生物安全通用要求
3 术语和定义
下列术语和定义适用于本文件。
3.1
属革兰氏阴性菌,是引起人及动物严重感染性疾病类鼻疽的病原体。该菌广泛分布于东南亚和澳
大利亚北部的水及土壤中。我国疫源地主要分布于海南、广东、广西、湖南、贵州、福建、香港、台湾等省
区。人群对该菌普遍易感,临床症状表现复杂多样,分为急性败血症型、亚急性型、慢性型和亚临床型,
最严重的症状是合并肺炎和急性败血症。该病病死率高。
3.2
又名实时荧光PCR(real-timePCR),实时荧光PCR方法有多种,本标准采用的是TaqMan水解探
针法,其原理是在常规PCR的基础上,加入一条特异性的荧光探针,该探针为一条寡核苷酸,两边分别
标记一个荧光报告基团和一个荧光淬灭基团。探针完整时,报告基团发射的荧光信号被淬灭基团吸收,
PCR扩增时,利用Taq酶的5’-3’外切酶活性将探针酶切水解,使荧光报告基团和荧光淬灭基团分离,
从而荧光监测系统可以接收到荧光信号。每经过一个PCR循环,荧光信号也和目的片段一样,有一个
同步指数增长的过程,信号的强度与检测对象的核酸含量成正比,可根据数学模型计算出检测对象的
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