| 标准编号 | GB/T 18281.3-2024 (GB/T18281.3-2024) | | 中文名称 | 医疗保健产品灭菌 生物指示物 第3部分：湿热灭菌用生物指示物 | | 英文名称 | Sterilization of health care products - Biological indicators - Part 3: Biological indicators for moist heat sterilization processes | | 行业 | 国家标准 (推荐) | | 中标分类 | C47 | | 国际标准分类 | 11.080.01 | | 字数估计 | 14,164 | | 发布日期 | 2024-11-28 | | 实施日期 | 2025-12-01 | | 旧标准 (被替代) | GB 18281.3-2015 | | 发布机构 | 国家市场监督管理总局、中国国家标准化管理委员会 | GB/T 18281.3-2024: 医疗保健产品灭菌 生物指示物 第3部分：湿热灭菌用生物指示物
ICS 11.080.01
CCSC47
中华人民共和国国家标准
代替GB 18281.3-2015
医疗保健产品灭菌 生物指示物
第3部分:湿热灭菌用生物指示物
(ISO 11138-3:2017,IDT)
2024-11-28发布
2025-12-01实施
国 家 市 场 监 督 管 理 总 局
国 家 标 准 化 管 理 委 员 会 发 布
目次
前言 Ⅲ
引言 Ⅳ
1 范围 1
2 规范性引用文件 1
3 术语和定义 1
4 通用要求 1
5 试验微生物 1
6 菌悬液 2
7 载体和初级包装 2
8 染菌载体和生物指示物 2
9 菌量和抗力 2
附录A(规范性) 湿热灭菌抗力的测定方法 4
附录B(规范性) z值和相关系数r2 值的计算 5
参考文献 7
前言
本文件按照GB/T 1.1-2020《标准化工作导则 第1部分:标准化文件的结构和起草规则》的规定
起草。
本文件是GB/T 18281《医疗保健产品灭菌 生物指示物》的第3部分。GB/T 18281已经发布了
以下部分:
---第1部分:通则;
---第2部分:环氧乙烷灭菌用生物指示物;
---第3部分:湿热灭菌用生物指示物;
---第4部分:干热灭菌用生物指示物;
---第5部分:低温蒸汽甲醛灭菌用生物指示物;
---第7部分:选择、使用和结果判断指南;
---第8部分:缩短生物指示物培养时间的确认方法。
本文件代替GB 18281.3-2015《医疗保健产品灭菌 生物指示物 第3部分:湿热灭菌用生物指
示物》,与GB 18281.3-2015相比,除结构调整和编辑性改动外,主要技术变化如下:
---更改了z值测定的温度范围(见9.5,2015年版的9.5);
---删除了FBIO值的表示方式(见2015年版的9.6)。
本文件等同采用ISO 11138-3:2017《医疗保健产品灭菌 生物指示物 第3部分:湿热灭菌用生物
指示物》。
请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。
本文件由国家药品监督管理局提出。
本文件由全国消毒技术与设备标准化技术委员会(SAC/TC200)归口。
本文件起草单位:山东新华医疗器械股份有限公司、广东省医疗器械质量监督检验所、山东博科消
毒设备有限公司、宁波甬安医疗器械制造有限公司、中国医学科学院北京协和医院。
本文件主要起草人:田友昊、崔娉婷、钟静、王加强、梁泽鑫、苗晓琳、赵帅帅、张青、袁文虎、张明兆。
本文件及其所代替文件的历次版本发布情况为:
---2000年首次发布为GB 18281.3-2000,2015年第一次修订;
---本次为第二次修订。
引 言
GB/T 18281《医疗保健产品灭菌 生物指示物》是有关生物指示物的通用性和专用性标准。
GB/T 18281旨在提供生物指示物的要求,选择、使用和结果判断指南,以及缩短培养时间的方法,拟由
八个部分构成。
---第1部分:通则。目的在于提供生物指示物的通用要求。
---第2部分:环氧乙烷灭菌用生物指示物。目的在于提供环氧乙烷灭菌用生物指示物的专用
要求。
---第3部分:湿热灭菌用生物指示物。目的在于提供湿热灭菌灭菌用生物指示物的专用要求。
---第4部分:干热灭菌用生物指示物。目的在于提供干热灭菌用生物指示物的专用要求。
---第5部分:低温蒸汽甲醛灭菌用生物指示物。目的在于提供低温蒸汽甲醛灭菌用生物指示物
的专用要求。
---第6部分:过氧化氢灭菌用生物指示物。目的在于提供过氧化氢灭菌用生物指示物的专用
要求。
---第7部分:选择、使用和结果判断指南。目的在于提供生物指示物的正确选择和使用的指南。
---第8部分:缩短生物指示物培养时间的确认方法。目的在于提供缩短生物指示物培养时间的
确认方法。
GB/T 18281.1规定了生物指示物生产、标签、试验方法和性能要求,这些指示物包含预期用于灭菌
过程的确认和常规监视的染菌载体和菌悬液。本文件规定了用于湿热灭菌过程的生物指示物的具体
要求。
湿热作为灭菌因子在本文件中被定义为干的饱和蒸汽。虽然空气和蒸汽混合气体可被使用在湿热
灭菌过程中,但本文件规定的方法和性能要求可能不适用于此类过程的生物指示物。
本文件的制定目的不是提倡在不推荐使用的场合使用生物指示物,而是为目前已知被使用的生物
指示物的生产提供通用要求。
现有标准提供了湿热灭菌确认和控制的要求(见ISO 17665)。
注:一些国家或地区可能已经发布了涵盖用于灭菌或生物指示物要求的其他标准。
医疗保健产品灭菌 生物指示物
第3部分:湿热灭菌用生物指示物
1 范围
本文件规定了拟用于评价湿热作为灭菌因子的灭菌过程性能的试验微生物、菌悬液、染菌载体、生
物指示物和测试方法的要求。
注1:关于湿热灭菌确认和常规控制的要求见ISO 17665。
注2:一些国家或地区的法规可能给出了工作场所的安全要求。
2 规范性引用文件
下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中,注日期的引用文
件,仅该日期对应的版本适用于本文件;不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于
本文件。
GB/T 18281.1-2024 医疗保健产品灭菌 生物指示物 第1部分:通则(ISO 11138-1:2017,
IDT)
注:GB/T 24628-2009 医疗保健产品灭菌 生物与化学指示物 测试设备(ISO 18472:2006,IDT)
3 术语和定义
ISO 11138-1界定的术语和定义适用于本文件。
ISO 和IEC 维护的用于标准化的术语数据库网址如下:
---ISO 在线浏览平台:http://www.iso.org/obp。
4 通用要求
ISO 11138-1的要求适用。
5 试验微生物
5.1 试验微生物应为嗜热脂肪地芽孢杆菌芽孢或其他证明符合本文件要求的等效性能的微生物菌株。
注1:嗜热脂肪芽孢杆菌已重新归类为嗜热脂肪地芽孢杆菌。
注2:嗜热脂肪地芽孢杆菌ATCC7953(NCTC10007,DSM22和CIP52.81)和ATCC12980(同NRRLB-4419)已
被发现是合适的菌株1)[1,2]。
1) 嗜热脂肪地芽孢杆菌ATCC7953(NCTC10007,DSM22和CIP52.81)和ATCC12980(同NRRLB-4419)是适
合的市售产品的多个实例。给出这一信息是为了方便本文件使用者,并不表示对这些产品的认可。
5.2 如使用嗜热脂肪地芽孢杆菌或枯草芽孢杆菌ATCC35021(5230)以外的试验微生物,应确定此试
验微生物的抗力的适用性。
注:在低于121℃的情况下,特别是对热敏液体进行的灭菌过程,可能使用枯草芽孢杆菌 ATCC35021(5230)等
菌株。
6 菌悬液
ISO 11138-1的要求适用。
7 载体和初级包装
7.1 用于湿热灭菌过程生物指示物的载体与初级包装的材料的适用性应被证明符合GB/T 18281.1-
2024中5.2和附录B的要求。
7.2 确定符合性的暴露条件应为:
a) 最低暴露温度:制造商标称的最高暴露温度的5℃或以上。
b) 灭菌因子:干饱和蒸汽。若生物指示物用在湿热灭菌过程而未使用干饱和蒸汽,例如使用空
气/蒸汽的混合物时,宜选择适合的空气蒸汽混合物并加以注明,以区别于本文件。
c) 最高暴露温度:由制造商标称。如制造商未标称,应采用140℃。
d) 暴露时间:≥30min。
注:尽管在湿热灭菌过程的实际限制范围内,暴露条件还需代表对载体的现实挑战。
8 染菌载体和生物指示物
ISO 11138-1的要求适用。
9 菌量和抗力
9.1 制造商应声明生物指示物的抗力特性符合GB/T 18281.1-2024中6.4的要求。
9.2 生物指示物上每单位活菌量的增量应以≤0.1×10n 的整数倍标称(例如毫升菌悬液、每个染菌载
体或每个生物指示物)。
9.3 染菌载体和生物指示物上的活菌量应≥1.0×105。
9.4 抗力应用121℃时的D 值表示,单位为分(min)。制造商可选择其他温度。每一批次的生物指示
物或染菌载体的D 值应以121℃时的D 值[单位为分(min)]标称,并保留一位小数。
9.5 按附录A进行试验时,含有嗜热脂肪地芽孢杆菌芽孢的菌悬液、染菌载体或生物指示物的D 值在
121℃时应≥1.5min。其他微生物的D 值应支持其应用。菌悬液、染菌载体和生物指示物上的试验微
生物z值,应在110℃~138℃内不少于3个温度下确定。这些数据用于计算z值,z值应≥6℃(按附
录B)。
9.6 在本文件和ISO 11138的其他部分规定的抗力特性应使用其所用灭菌过程的特定关键变量来
定义。
9.7 D 值按GB/T 18281.1-2024中附录C和附录D的方法确定。
9.8 D 值和存活-杀灭反应特性的确定需要使用抗力仪,并在规定的过程参数下应用(见附录A)。
9.9 存活-杀灭区间可使用GB/T 18281.1-2024附录E中的公式计算。
注:此信息对使用者在比较同一制造商不同批次产品是有价值的。
示例:使用GB/T 18281.1-2024附录E中的公式,结合本文件规定的最少菌量和最小D 值要求,存活-杀灭反应特
性为:
---在121℃时:存活时间≥4.5min,杀灭时间≤13.5min。
附 录 A
(规范性)
湿热灭菌抗力的测定方法
A.1 原理
本文件所述方法需要特定的设备---抗力仪。ISO 18472给出了湿热灭菌用抗力仪的过程参数
规范。
相关测试方法的具体要求见A.2。
A.2 步骤
A.2.1 把样品置于合适的样本架上。
A.2.2 把抗力仪腔室预热到规定的运行温度,如121℃±0.5℃。
A.2.3 把装有样品的样本架放入腔室内,关闭腔室,并启动试验循环。
A.2.4 按下面的程序开始操作。
---步骤1:腔室抽真空,2min内达到4.5kPa±1kPa。
---步骤2:向腔室内通入蒸汽,使温度和压强在10s内达到规定值。暴露时间为0min时,应不
通入蒸汽。
---步骤3:在规定的暴露时间内维持该条件。
---步骤4:在暴露阶段结束后,通入过滤的空气直至到外界大气压。应在10s内将腔室内压力减
到100kPa以下。
---步骤5:测试周期结束后,迅速从腔室中取出装有样品的样本架,并迅速冷却,把样品转移到生
长培养基中并培养(见GB/T 18281.1-2024的第7章)。
A.2.5 转移时间应记录,所有的测试应使用相同的时间周期。
A.3 抗力的测定
应按照GB/T 18281.1-2024中附录C、附录D和附录E规定的方法进行测定。
附 录 B
(规范性)
z值和相关系数r2 值的计算
B.1 根据GB/T 18281.1-2024中附录C或附录D中提供的方法获得数据,通过log10D 值对暴露温
度作图可求得z值,单位为摄氏度(℃)。在使用线性回归分析法时,z值等于最佳拟合曲线斜率的负
倒数。
注:z值和相关系数r2 值的计算要求见9.5。
B.2 通过公式(B.1)计算最佳拟合曲线的斜率:
m=
nG-AB
nC-A2
(B.1)
式中:
m ---最佳拟合曲线的斜率;
n ---(D 值/温度)的组数;
G=∑[t(log10y)];
A=∑(t);
B=∑(log10y);
C=∑(t2);
t ---暴露时间;
y ---最小D 值。
计算所需要的数据见表B.1。
表B.1 线性回归分析法计算数据的示例
D 值y
min
暴露温度t
log10y t2 t(log10y) (log10y)2
y1 t1 log10y1 t12 t1(log10y1) (log10y1)2
y2 t2 log10y2 t22 t2(log10y2) (log10y2)2
y3 t3 log10y3 t32 t3(log10y3) (log10y3)2
yn tn log10yn tn2 tn(log10yn) (log10yn)2
A=∑
i=n
i=1
ti B=∑
i=n
i=1
log10yi C=∑
i=n
i=1
(ti)2 G=∑
i=n
i=1
[ti(log10yi)] E=∑
i=n
i=1
(log10yi)2
赋值变量 A B C G E
B.3 表B.2给出了最佳拟合曲线斜率的计算示例。
表B.2 斜率的计算示例
D 值y
min
暴露温度t
log10y t2 t(log10y) (log10y)2
y1=2.0 t1=121 log10y1=0.3010 t12=14641 t1(log10y1)=36.4210 (log10y1)2=0.0906
y2=1.1 t2=124 log10y2=0.0414 t22=15376 t2(log10y2)=5.1336 (log10y2)2=0.0017
y3=0.4 t3=129 log10y3=-0.3979 t32=16641 t3(log10y3)=-51.3291 (log10y3)2=0.1583
A=∑
i=3
i=1
ti B=∑
i=3
i=1
log10yi C=∑
i=3
i=1
(ti)2 G=∑
i=3
i=1
[ti(log10yi)] E=∑
i=5
i=1
(log10yi)2
赋值变量 A=374 B=-0.0555 C=46658 G=-97745 E=0.2506
m=
nG-AB
nC-A2
m=
3(-97745)-374(-0.0555)
3×46658-3742
......
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