| 标准编号 | GB/T 21459.3-2025 (GB/T21459.3-2025) | | 中文名称 | 真菌农药可湿性粉剂产品标准编写规范 | | 英文名称 | Specification for drafting standards of fungal pesticide wettable powder (WP) | | 行业 | 国家标准 (推荐) | | 中标分类 | G23 | | 国际标准分类 | 65.100 | | 字数估计 | 14,115 | | 发布日期 | 2025-10-31 | | 实施日期 | 2026-05-01 | | 旧标准 (被替代) | GB/T 21459.3-2008 | | 发布机构 | 国家市场监督管理总局、国家标准化管理委员会 | GB/T 21459.3-2025: 真菌农药可湿性粉剂产品标准编写规范
ICS 65.100
CCSG23
中华人民共和国国家标准
代替GB/T 21459.3-2008
真菌农药可湿性粉剂产品标准编写规范
2025-10-31发布
2026-05-01实施
国 家 市 场 监 督 管 理 总 局
国 家 标 准 化 管 理 委 员 会 发 布
前言
本文件按照GB/T 1.1-2020《标准化工作导则 第1部分:标准化文件的结构和起草规则》的规定
起草。
本文件是GB/T 21459的第3部分。GB/T 21459已经发表了以下部分:
---GB/T 21459.1 真菌农药母药产品标准编写规范;
---GB/T 21459.2 真菌农药粉剂产品标准编写规范;
---GB/T 21459.3 真菌农药可湿性粉剂产品标准编写规范;
---GB/T 21459.4 真菌农药油悬浮剂产品标准编写规范;
---GB/T 21459.5 真菌农药饵剂产品标准编写规范。
本文件代替GB/T 21459.3-2008《真菌农药可湿性粉剂产品标准编写规范》,与GB/T 21459.3-
2008相比,除结构调整和编辑性改动外,主要技术变化如下:
a) 更改了术语和定义(见第3章,2008年版的第3章);
b) 更改了“含菌量”控制项目(见4.3,2008年版的4.3);
c) 删除了“活菌率”控制项目(见2008年版的4.3);
d) 删除了“化学杂质”控制项目及测定方法(见2008年版的4.3和5.6);
e) 删除了“毒力”控制项目及测定方法(见2008年版的4.3和5.7);
f) 删除了“干燥减量”控制项目及测定方法(见2008年版的4.3和5.8);
g) 增加了“其他限制性组分”质量分数控制项目及测定方法(见表1和5.6);
h) 增加了“水分”控制项目及测定方法(见4.3和5.7);
i) 增加了“酸度或碱度”控制项目及测定方法(见4.3和5.8);
j) 增加了“持久起泡性”控制项目及测定方法(见4.3和5.11);
k) 更改了“贮存稳定性”控制项目及测定方法(见4.3和5.13,2008年版的4.3和5.13);
l) 更改了菌种鉴别要求(见5.2,2008年版的5.2);
m) 更改了有效成分含量测定方法(见5.4,2008年版的5.3);
n) 更改了悬浮率测定方法(见5.10,2008年版的5.9);
o) 删除了“安全”(见2008年版的7.4);
p) 更改了质量保证期(见第7章,2008年版的7.5)。
请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。
本文件由中华人民共和国农业农村部提出。
本文件由全国农药标准化技术委员会(SAC/TC133)归口。
本文件起草单位:农业农村部农药检定所。
本文件主要起草人:吴进龙、寇雅岚、任立瑞、赵永辉、姜宜飞、王文卓、刘莹、李培泽、刘煜恒、
杨宇生。
本文件于2008年首次发布,本次为第一次修订。
引 言
微生物农药是生物农药中的一类,包括由细菌、真菌、病毒和原生动物等天然的或经人工诱变处理
及基因修饰的微生物,通过人工繁殖和加工而成的用于防治病、虫、草、鼠等有害生物的制剂。真菌农药
是微生物农药的一种,其有效成分是相关靶标生物的病原真菌活菌体。菌体形态主要有孢子(如分生孢
子、芽生孢子、休眠孢子等)和菌丝体等。分生孢子是一种无性繁殖细胞,为真菌农药中最常见的形态,
并作为有效成分基本单元。真菌农药可湿性粉剂是指由真菌纯菌种经生物发酵获得的单一形态或组合
形态的高含量的真菌活菌体制剂,包含伴随发酵过程的相关生物组分和/或少量化学杂质。
GB/T 21459拟由5个部分构成。
---GB/T 21459.1 真菌农药母药产品标准编写规范。目的在于提供真菌农药母药产品标准的
编写规范。
---GB/T 21459.2 真菌农药粉剂产品标准编写规范。目的在于提供真菌农药粉剂产品标准的
编写规范。
---GB/T 21459.3 真菌农药可湿性粉剂产品标准编写规范。目的在于提供真菌农药可湿性粉
剂产品标准的编写规范。
---GB/T 21459.4 真菌农药油悬浮剂产品标准编写规范。目的在于提供真菌农药油悬浮剂产
品标准的编写规范。
---GB/T 21459.5 真菌农药饵剂产品标准编写规范。目的在于提供真菌农药饵剂产品标准的
编写规范。
真菌农药可湿性粉剂产品标准编写规范
1 范围
本文件规定了真菌农药可湿性粉剂产品标准的技术要求、试验方法、检验规则、验收和质量保证期、
标志、标签、包装和储运等的内容和编写要求。
本文件适用于真菌农药可湿性粉剂产品标准的编写。
2 规范性引用文件
下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中,注日期的引用文
件,仅该日期对应的版本适用于本文件;不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于
本文件。
GB/T 1600-2021 农药水分测定方法
GB/T 1601 农药pH值的测定方法
GB/T 1604 商品农药验收规则
GB/T 1605 商品农药采样方法
GB 3796 农药包装通则
GB/T 5451 农药可湿性粉剂润湿性测定方法
GB/T 14825-2023 农药悬浮率测定方法
GB/T 16150-1995 农药粉剂、可湿性粉剂细度测定方法
GB/T 19136-2021 农药热储稳定性测定方法
GB/T 28135 农药酸(碱)度测定方法 指示剂法
GB/T 28137 农药持久起泡性测定方法
3 术语和定义
下列术语和定义适用于本文件。
3.1
孢子 spore
真菌的繁殖体。
注:有分生孢子、芽生孢子和厚垣孢子等多种类型。
3.2
分生孢子 conidia
由分生孢子梗上产孢细胞(有顶生/侧生、串生/簇生、形状大小多种、单胞/多胞)产生的无色或有色
的无性繁殖细胞。
注:其为真菌农药中最常见的孢子类型。
3.3
含菌量 microbialdensity
真菌农药的单位质量或体积中所含有效成分形态为活菌落体的数量。
3.4
含孢量 sporecontent;sporeconcentration
形态为孢子的真菌农药的单位质量或体积中所含有效成分真菌孢子的数量。
注:真菌农药单位质量或体积中形态为活孢子的数量。
3.5
在一定培养条件下,可萌发(孢子萌芽长度大于孢子长度一半的视为)生长的孢子数占总孢子数的
百分率。
注:即孢子萌发率。
3.6
在真菌农药中,除有效成分外其他微生物(如细菌和真菌等)量占总菌量的百分率。
3.7
菌落形成单位colonyformingunit;CFU
单个真菌孢子在固体培养基表面形成的单一菌体群落。
4 技术要求
4.1 有效成分描述
应提供真菌农药可湿性粉剂有效成分的名称和基本生化参数等信息。
所提供的信息应包括菌种中文通用名及其别名,菌种拉丁文学名及其异名,菌种来源、株系分型或
代码,菌种生物学分类地位及其鉴定特征等。鉴定特征可以是形态学、生物化学或遗传学特征,应尽可
能提供从国际公认机构能得到的鉴定特征的参考文献。如果使用基因修饰过的菌株,还应陈述相关信
息,对有特定基因序列应指出登记号。还应标明菌种保藏机构及登记号或编号,母药中有效成分的主要
存在形态、生物活性及防治对象,以及菌种保存条件、适宜生长条件等参数(格式见附录A)。
4.2 外观
应说明可湿性粉剂的组成和颜色、物理状态、形状等。
4.3 真菌农药可湿性粉剂技术指标
真菌农药可湿性粉剂的规范项目及技术指标应符合表1要求。
表1 真菌农药可湿性粉剂技术指标
项 目a 指 标
有效成分含量b ≥
杂菌率/% ≤
其他限制性组分质量分数/% 标明含量+允许波动范围
水分/% ≤
酸度(以 H2SO4 计)/%
或碱度(以NaOH计)/%
或pH值
规定范围
表1 真菌农药可湿性粉剂技术指标 (续)
项 目a 指 标
湿筛试验(通过μm试验筛)/% ≥
悬浮率/% ≥
持久起泡性(1min后泡沫量)/mL ≤
润湿时间/s ≤
热储稳定性
热储后,其他限制性组分质量分数、酸度(以 H2SO4 计)或碱度
(以NaOH计)或pH值、湿筛试验、悬浮率、润湿时间仍应符合
本文件要求。热储前后试样质量变化率应不大于1.0%
a 所列项目不是详尽无疑的,也不是任何真菌农药可湿性粉剂产品标准都需全部包括的,可根据不同产品的具
体情况增减。
b 有效成分含量指单位质量或体积产品中的含孢量或含菌量,分别以个每克(或毫升)、CFU每克(或毫升)表示。
5 试验方法
5.1 取样
真菌农药可湿性粉剂产品的取样按GB/T 1605进行,用随机数表法确定取样的包装件;最终取样
量应不少于300g。
5.2 菌株鉴别试验
采用形态学特征观察和分子生物学鉴定相结合的方式进行。
根据形态学特征鉴别的表述一般应包括:菌落的颜色和形状、产孢器结构、产孢细胞以及孢子的着
生方式、几何形状、排列方式、细胞分隔、细胞核数、表面凹凸和(或)纹饰、大小等。如果具有明显区别于
其他相似真菌的形态,应特别指出。
根据DNA分子特征的鉴别应指出特异识别该菌株的检测方法,包括引物碱基序列、克隆载体名
称、操作步骤和注意事项等,并给出由鉴别试验得到的DNA片段序列图。
5.3 外观
采用目测法进行。
5.4 有效成分含量
5.4.1 方法提要
根据可湿性粉剂中真菌的生物形态提出检测方法,简述方法基本原理如下。
a) 含孢量:对分生孢子形态的产品建议采用显微计数法,将试样润湿并稀释至适当倍数,配制成
孢子悬浮液后,在光学显微镜下用血球计数板计孢子数,然后计算总孢子量,再通过测定活孢
率(见附录B的B.1.2),最终确定试样中的含孢量,含孢量=总孢子量×活孢率。
b) 含菌量:分生孢子或其他形态的产品均可采用菌落形成单位法(见B.2),将待测试样品稀释
后,均匀涂布在固体培养基平板上,统计菌落总数,计算含菌量。
5.4.2 试剂和溶液
见B.2.2。
5.4.3 仪器及设备
列出试验用主要仪器、设备,并说明其主要特性(技术要求)和特殊要求。当特殊要求在方法中影响
安全以及方法的准确度和精确度时,应作详细说明。
特殊类型的仪器设备及其部件,应按制图标准绘图说明。
采用显微计数法计含孢量时,一般包括天平(精确至0.1mg),显微镜(物镜×目镜倍数不低于
400倍),旋涡混合器(转速≥2000r/min),血球计数板(精度1/400mm2×0.1mm,建议用25×16规
格),玻璃器皿等。
采用菌落形成单位法时,除上述仪器外,一般还包括高压蒸汽灭菌器(标明规格)、恒温培养箱
(5℃~60℃)、移液器等。
5.4.4 测定步骤
应准确叙述试验的每一操作步骤,一般包括取样、配制均匀悬浮液、稀释、计数、接种、观察等,如有
预操作或需要定量的都应明确指出。测定步骤中,可能涉及的仪器校正、空白测定、工作曲线、安全措施
等都应叙述清楚。
5.4.5 计算
应列出计算公式、简化公式,写明公式中符号、代号和系数的含义、单位。
5.4.6 允许差
应规定每次平行测定结果的允许差不应超过10%,取其算术平均值作为测定结果。
5.5 杂菌率
一般采用菌落形成单位法,即接种培养,根据不同菌的生长速度和菌落形态特征,从平板上直接分
辨菌落并计菌落数,计算杂菌率(见B.3)。
培养基可选用真菌与细菌通用的培养基,也可分别用细菌的、真菌的专用培养基,必要时可用选择
性培养基,但应作详细说明。
根据需要可修订或提出其他方法,但应作说明,包括样品制备步骤、测定步骤和计算方法等。
测定结果误差的限制范围参照5.4.6。
5.6 其他限制性组分质量分数
按照所采用的具体方法编写。
5.7 水分
按照GB/T 1600-2021中4.2或4.3编写。
5.8 酸度、碱度或pH值
酸度、碱度的测定按照GB/T 28135编写;pH值的测定按照GB/T 1601编写。
5.9 湿筛试验
按照GB/T 16150-1995中2.2编写。
5.10 悬浮率
按照GB/T 14825-2023中4.2或4.3编写,涉及不一致处按具体方法进行编写。
5.11 持久起泡性
按照GB/T 28137编写。
5.12 润湿时间
按照GB/T 5451编写。
5.13 热储稳定性
按照GB/T 19136-2021中4.4.1编写。热储时,样品应密封储存,热储前后试样质量变化率应不
大于1.0%。
6 检验规则
规定检验的类型、检验项目、组批规则以及判定规则。
7 验收和质量保证期
应规定真菌农药可湿性粉剂产品的验收和质量保证期。质量保证期内有效成分含量应不低于出厂
检验值的70%,且各项指标均应符合本文件要求。
真菌农药可湿性粉剂产品的验收按照GB/T 1604编写。
8 标志、标签、包装和储运
8.1 真菌农药可湿性粉剂的标志、标签和包装应符合GB 3796的规定,也可根据用户要求或订货协议
采用其他形式的包装。
8.2 应规定真菌农药可湿性粉剂包装、储存和运输的技术要求,防止因包装、储存和运输不当引起危
险、毒害或环境污染。
附 录 A
(资料性)
真菌农药有效成分描述格式
产品中有效成分的理化性质如下:
a) 菌种中文通用名称:
b) 拉丁文学名:
c) 生物学分类地位:门、纲、目、科、属、种。
d) 鉴别特征:形态学特征:;DNA分子片段序列图:
e) 有效成分主要存在形态:分生孢子、芽生孢子、菌丝体等。
f) 生物活性:
g) 培养保存条件:
附 录 B
(资料性)
检测方法示例
B.1 含孢量的测定
B.1.1 总孢子数的测定---显微计数法
B.1.1.1 方法提要
将试样润湿并稀释至适当倍数,配制成孢子悬浮液后,在光学显微镜下用血球计数板计孢子数,然
后计算试样中的总孢子量。
B.1.1.2 试剂和溶液
0.05%吐温80。
B.1.1.3 仪器和设备
B.1.1.3.1 分析天平:精确至0.1mg。
B.1.1.3.2 可调移液器。
B.1.1.3.3 涡旋混匀仪:转速≥2000r/min。
B.1.1.3.4 超净工作台。
B.1.1.3.5 高压蒸汽灭菌器。
B.1.1.3.6 光学显微镜:物镜×目镜倍数不低于400倍。
B.1.1.3.7 血球计数板:25×16。
B.1.1.4 测定步骤
B.1.1.4.1 将试样混合均匀,准确称取g(mL)试样。
B.1.1.4.2 将每份样品置于mL容量瓶中,加入mL0.05%吐温80,润湿浸泡30min后,用涡
旋混匀仪将菌悬液分散均匀,用0.05%吐温80定容,制得倍样品稀释液。用移液器吸取mL
置于mL容量瓶中,用0.05%吐温80定容混合均匀,制得倍样品稀释液备用。
B.1.1.4.3 用玻璃棒蘸1小滴水涂抹在血球计数板计数区两侧的凸条上,盖上盖玻片使之贴紧固定;用
可调移液器吸取孢子悬浮液,在盖玻片边缘滴入,使液体沿边缘渗入盖玻片下,刚好充满盖玻片与计数
板计数区域之间,应无气泡且计数区域四周凹槽无液体,如有多余液体用吸水纸吸去。
B.1.1.4.4 待孢子静止后用显微镜观察计数,在血球计数板的中心大方格区内,采取对角线5点(四周
及中央的5个中格)计数的方法,计上下区域各5个中方格(16个小方格/中方格),即双线范围内160
小方格内孢子数。计数时,对于中方格四周如有压线的孢子,计上双线不计下双线,计左双线不计右双
线的孢子数。每份试样点样计数p次(p=2)。
B.1.1.5 计算
试样中的总孢子量按公式(B.1)计算:
W1=
K1×400×N1
160×p×m1×0.1×10-3
(B.1)
式中:
W1 ---试样的总孢子量,单位为个每克(个/g)或个每毫升(个/mL);
K1 ---稀释倍数;
400---血球计数板计数室小方格的总数(25×16=400);
N1 ---p次计数的总孢子数(上下区域各5个中方格中计数的总孢子数);
160---血球计数板上下区域各5个中方格的小方格的总数(5×16×2=160);
p ---计数次数(p=2);
m1 ---试样质量的数值,单位为克(g)或试样体积的数值,单位为毫升(mL);
0.1 ---血球计数板计数室体积,单位为立方毫米(mm3)。
B.1.2 活孢率的测定
B.1.2.1 方法提要
将孢子悬浮液均匀涂在放有玻璃纸片的培养基平板上,培养后制片镜检,以孢子萌芽长度大于孢子
长度的一半视为萌发,计数萌发与未萌发的孢子总数,计算活孢率。
B.1.2.2 试剂和溶液
B.1.2.2.1 0.05%吐温80。
B.1.2.2.2 培养基。
B.1.2.2.3 玻璃纸片。
B.1.2.2.4 乳酸酚棉蓝染色液或锥蓝染色液。
B.1.2.3 仪器和设备
B.1.2.3.1 分析天平:精确至0.1mg。
B.1.2.3.2 可调移液器:1000μL。
B.1.2.3.3 涡旋混匀仪:转速≥2000r/min。
B.1.2.3.4 恒温培养箱。
B.1.2.3.5 超净工作台。
B.1.2.3.6 高压蒸汽灭菌器。
B.1.2.3.7 光学显微镜:物镜×目镜倍数不低于400倍。
B.1.2.4 测定步骤
按组分和比例配制培养基,经高压蒸汽灭菌后在无菌条件下倒入直径为9cm培养皿中(每皿约
15mL),待其凝固后,放入1cm×1cm的无菌玻璃纸片(经180℃高温灭菌2h)。用无菌接种环蘸取
已配制好的含孢子106个/mL~107个/mL的孢子悬浮液,均匀涂于3片玻璃纸片上,然后放入(25±1)℃
恒温箱内恒温培养24h。
用尖镊子分别取下3片玻璃纸片放于载玻片上,吸取一滴锥蓝染色液滴于玻璃纸上,约3min后盖
上盖玻片(尽量避免气泡存在),光学显微镜下观察并计数萌发的孢子数与未萌发的孢子数,计算活孢
率。每次计数至少300个孢子。
B.1.2.5 计算
试样的活孢率按公式(B.2)计算:
W2=
N2
N2+N3×
100% (B.2)
式中:
W2---试样的活孢率;
N2---萌发孢子个数总和;
N3---未萌发孢子个数总数。
B.1.3 含孢量的计算
试样的含孢量按公式(B.3)计算:
W3=W1×W2 (B.3)
式中:
W3---试样的含孢量,单位为个每克(个/g)或个每毫升(个/mL);
W1---试样的总孢子量,单位为个每克(个/g)或个每毫升(个/mL);
W2---试样的活孢率。
B.2 含菌量的测定---菌落形成单位(CFU)法
B.2.1 方法提要
将待测试样品稀释后,均匀涂布在固体培养基平板上,统计菌落总数,计算含菌量。
B.2.2 试剂和溶液
B.2.2.1 0.05%吐温80。
B.2.2.2 培养基。
B.2.3 仪器和设备
B.2.3.1 分析天平:精确至0.1mg。
B.2.3.2 可调移液器:1000μL。
B.2.3.3 涡旋混匀仪:转速≥2000r/min。
B.2.3.4 恒温培养箱。
B.2.3.5 恒温振荡培养箱。
B.2.3.6 超净工作台。
B.2.3.7 高压蒸汽灭菌器。
B.2.3.8 光学显微镜:物镜×目镜倍数不低于400倍。
B.2.4 测定步骤
B.2.4.1 样品的制备
将试样混合均匀,准确称取3g(mL)试样。溶入27mL0.05%吐温80中浸泡30min后,置于恒温
振荡培养箱中180r/min,振荡30min,得到稀释10倍的样品溶液,标记为1号。依具体情况设置稀释
梯度,每次稀释后置于涡旋混匀仪上将样品混合均匀。梯度稀释示例见表B.1。
表B.1 梯度稀释示例
编号 1 2 3 4 5 6 7 8
灭菌水稀释液体积/mL 27 9.0 9.0 9.0 9.0 9.0 9.0 9.0
加入上一稀释浓度
溶液的体积/mL
- 1.0 1.0 1.0 1.0 1.0 1.0 1.0
累计稀释倍数 101 102 103 104 105 106 107 108
B.2.4.2 涂板计数
按组分和比例配制培养基,经高压蒸汽灭菌后在无菌条件下倒入直径为9cm培养皿中(每皿约
15mL)备用。
选取适宜3个梯度稀释液,用移液器各吸取100μL于培养基平板,用曲玻棒均匀涂布在整个平板
表面,......
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