| 标准编号 | SN/T 1129.2-2002 (SN/T1129.2-2002) | | 中文名称 | 牛病毒性腹泻/粘膜病病毒分离操作规程 | | 英文名称 | Protocol of virus isolation for bovine viral diarrhea/mucosal disease | | 行业 | 商检行业标准 (推荐) | | 中标分类 | B41 | | 字数估计 | 8,818 | | 发布日期 | 8/2/2002 | | 实施日期 | 1/1/2003 | | 发布机构 | 中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局 | SN/T 1129.2-2002
Protocol of virus isolation for bovine viral diarrhea/mucosal disease
中华人民共和国出入境检验检疫行业标准
操 作 规 程
中 华 人 民 共 和 国
国家质量监督检验检疫总局 发 布
前言
本标准中有关病毒分离和鉴定方法是参考美国、澳大利亚实验室的检测规程和总结我国在这一领
域多年研究和实践经验的基础上制定。
本标准的附录 Ａ为资料性附录。
本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。
本标准负责起草单位：中华人民共和国云南出入境检验检疫局。
本标准主要起草人：周晓黎、花群义、徐自忠、徐维加。
本标准系首次发布的出入境检验检疫行业标准。
范围
规范性引用文件
下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的
修改单（不包括勘误的内容）或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究是
否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。
原理
动物感染 ＢＶＤ病毒并产生抗体后，在较长一段时间里病牛的许多组织中有病毒的存在，急性病例
具有持续的病毒血症，所以血液是最好的病毒分离材料，采取凝固的血块，经冻融几次后作为接种物。尸
体剖检时则采取肠系膜淋巴结或脾脏，也可应用骨髓经常规处理后作为接种物。发病较久或怀疑有抗体
存在时，用上述病料分离病毒，可能会受到干扰，此时可采抗凝血，分离白细胞作为接种物更为理想，检
查局部感染时，可用棉拭子采取局部的分泌物或排泄物。
各种牛源细胞均可用于病毒分离，包括牛肾和胎牛肺原代细胞或继代细胞以及犊牛睾丸细胞。犊牛
原代睾丸细胞常可显示较好的细胞病变。
分离株若引起细胞病变，则应进一步用抗ＢＶＤＶ的免疫血清进行中和试验鉴定。若无细胞病变，则
用免疫荧光抗体试验（ＦＡ），免疫过氧化物酶试验、中和试验等方法进行鉴定。
病料接种于敏感细胞后至少应传两代以上，方可进行鉴定。
试剂和材料
. 病毒：ＢＶＤ病毒 ＯｒｅｇｏｎＣ２４Ｖ。
. 血清：ＢＶＤ标准阳性血清、阴性血清。
. 被检样品：凝固的血块、肠系膜淋巴结或脾脏、骨髓、白细胞、分泌物或排泄物，经研磨冻融几次后
作为接种物。若需要长途运输，应将病料置入含有高浓度抗生素的运输......
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