| 标准编号 | SN/T 1165.1-2002 (SN/T1165.1-2002) | | 中文名称 | 蓝舌病竞争酶联免疫吸附试验操作规程 | | 英文名称 | Protocol of competitive ELISA for bluetongue | | 行业 | 商检行业标准 (推荐) | | 中标分类 | B41 | | 字数估计 | 8,867 | | 发布日期 | 2002-11-25 | | 实施日期 | 2003-05-01 | | 引用标准 | GB/T 6682-1992 | | 发布机构 | 中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局 | | 范围 | 本标准规定了蓝舌病竞争酶联免疫吸附试验方法。本标准适用于反刍动物蓝舌病抗体检测。 | SN/T 1165.1-2002
Protocol of competitive ELISA for bluetongue
中华人民共和国出入境检验检疫行业标准
SN／T１１６５．１-２００２
蓝舌病竞争酶联免疫吸附试验操作规程
２００２-１１-２５发布
２００３-０５-０１实施
中 华 人 民 共 和 国
国家质量监督检验检疫总局 发 布
前言
蓝舌病（ＢＬｕｅｔｏｎｇｕｅ）竞争酶联免疫吸附试验（Ｃ-ＥＬＩＳＡ）是在参考国际兽疫局（ＯＩＥ）《哺乳动物、禽
和蜜蜂Ａ和Ｂ类疾病诊断试验和疫苗标准手册》和实践经验的基础上制定。
本标准的附录Ａ是资料性附录。
本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。
本标准起草单位：中华人民共和国云南出入境检验检疫局。
本标准主要起草人：花群义、周晓黎、徐自忠、董俊。
本标准系首次发布的检验检疫行业标准。
SN／T１１６５．１-２００２
蓝舌病竞争酶联免疫吸附试验操作规程
１ 范围
本标准规定了蓝舌病竞争酶联免疫吸附试验方法。
本标准适用于反刍动物蓝舌病抗体检测。
２ 规范性引用文件
下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有
的修改单（不包括勘误的内容）或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究
是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。
GB/T ６６８２-１９９２ 分析实验室用水规格和试验方法（eqv ISO ３６９６：１９８７）
３ 缩略语
下列缩略语适用于本标准。
３．１ ＢＴＶ：蓝舌病病毒。
３．２ Ｃ-ＥＬＩＳＡ：竞争酶联免疫吸附试验。
３．３ ＭｃＡｂ：单克隆抗体。
３．４ ＰＩ：抑制百分比。
３．５ 羊抗鼠ＩｇＧ-ＨＲＰ：辣根过氧化物酶（ＨＲＰ）标记的羊抗鼠ＩｇＧ。
３．６ ＯＤ值：光密度值。
４ 原理
被检血清和ＢＴＶ群特异性单克隆抗体（ＭｃＡｂ）加入已用ＢＴＶ-ＶＰ７抗原包被的酶标板孔，在３７℃
下反应，二者同时竞争与孔内相应的特异性包被抗原结合，加入酶标羊抗鼠ＩｇＧ-ＨＲＰ，洗去未结合的抗
体，然后加入底物显色。使用酶标仪测定反应物的ＯＤ值，计算抑制百分比（ＰＩ），就可以判定试验结果。
５ 试剂和材料
５．１ 包被抗原：蓝舌病病毒ＶＰ７抗原，由指定单位提供。
５．２ 血清：蓝舌病标准强阳性、弱阳性血清、阴性血清，由指定单位提供。
５．３ 被检血清：牛血清５６℃～５７℃灭活３０ｍｉｎ，羊血清５８℃～５９℃灭活３０ｍｉｎ。
５．４ 蓝舌病病毒群特异性单克隆抗体：由指定单位提供。
５．５ 羊抗鼠ＩｇＧ-ＨＲＰ：按说明书指定的工作浓度稀释使用。
５．６ 包被液、洗涤液、稀释液、底物液、终止液：参见资料......
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