| 标准编号 | SN/T 1166.3-2006 (SN/T1166.3-2006) | | 中文名称 | 水泡性口炎逆转录聚合酶链反应操作规程 | | 英文名称 | Protocol of reverse transcription polymerase chain reaction (RT-PCR) for vesicular stomatitis virus | | 行业 | 商检行业标准 (推荐) | | 中标分类 | B41 | | 国际标准分类 | 11.220 | | 字数估计 | 10,129 | | 发布日期 | 2006-01-26 | | 实施日期 | 2006-08-16 | | 引用标准 | GB/T 6682 | | 标准依据 | 行标公告2006年第4期(总第76期);国质检认(2010)582号 | | 发布机构 | 海关总署 | | 范围 | 本部分规定了水泡性口炎病毒新泽西型(NJ)和印第安那型(IND)的RT-PCR定性和定型检测方法; | SN/T 1166.3-2006
Protocol of reverse transcription polymerase chain reaction (RT-PCR) for vesicular stomatitis virus
书中华人民共和国出入境检验检疫行业标准
SN／T１１６６．３-２００６
水泡性口炎逆转录聚合酶链反应操作规程
２００６-０１-２６发布
２００６-０８-１６实施
中 华 人 民 共 和 国
国家质量监督检验检疫总局 发 布
前言
ＳＮ/T １１６６分为三部分：
---水泡性口炎补体结合试验操作规程；
---水泡性口炎微量血清中和试验操作规程；
---水泡性口炎逆转录聚合酶链反应操作规程。
本部分为ＳＮ/T １１６６的第３部分。
本部分的附录Ａ为规范性附录，附录Ｂ为资料性附录。
本部分由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。
本部分起草单位：中华人民共和国云南出入境检验检疫局。
本部分主要起草人：花群义、周晓黎、徐自忠、董俊、杨云庆、龙忠保。
本部分系首次发布的出入境检验检疫行业标准。
SN／T１１６６．３-２００６
水泡性口炎逆转录聚合酶链反应操作规程
１ 范围
ＳＮ/T １１６６的本部分规定了水泡性口炎病毒新泽西型（ＮＪ）和印第安那型（ＩＮＤ）的ＲＴ-ＰＣＲ定性
和定型检测方法。
本部分适用于水泡性口炎病毒的鉴定及本病的流行病学调查、诊断、检疫和监测。
２ 规范性引用文件
下列文件中的条款通过ＳＮ/T １１６６的本部分的引用而成为本部分的条款。凡是注日期的引用文
件，其随后所有的修改单（不包括勘误的内容）或修订版均不适用于本部分，然而，鼓励根据本部分达成
协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本
部分。
GB/T ６６８２ 分析实验室用水规格和试验方法
３ 试剂和材料
３．１ 水
应符合GB/T ６６８２中一级水的规格。
３．２ 试剂纯度
所有的化学试剂均为分析纯。
３．３ 水泡性口炎病毒标准株
新泽西型（ＮＪ）和印第安那型（ＩＮＤ）标准病毒株，由指定单位提供。
３．４ T犪狇酶
-２０℃保存，避免反复冻融或温度剧烈变化。
３．５ 逆转录酶AM犞
-２０℃保存，避免反复冻融或温度剧烈变化。
-２０℃保存，避免反复冻融或温度剧烈变化。
含ｄＣＴＰ、ｄＧＴＰ、ｄＡＴＰ、ｄＴＴＰ各１０ｍｍｏｌ／Ｌ。
３．８ 引物
３．８．１ 该试验选用水泡性口炎病毒Ｌ蛋白基因较保守的序列为ＰＣＲ扩增区。采用半套式ＲＴ-ＰＣＲ
方法，半套式引物分别根据ＮＪ株和ＩＮＤ株扩增区的碱基差别设计。
外侧引物Ⅰ（Ｐ１）：５’ＡＡＧＧＣＴＣＴＣＴＧＴＴＴＣＣＧＧＡＴＣＴＧＧ３’
外侧引物Ⅱ（Ｐ２）：５’ＴＧＡＴＴＣＡＡＴＡＴＡＡＴＴＡＴＴＴＴＧＧＧＡＣ３’
ＮＪ半套式引物（Ｐ３）：５’ＴＧＴＴＣＴＧＧＴＧＴＧＣＡＡＡＣＣＡＧＧＴＡＴＣ３’
ＩＮＤ半套式引物（Ｐ４）：５’ＡＧＴＡＧＡＡＣ......
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