| 标准编号 | SN/T 1632.3-2013 (SN/T1632.3-2013) | | 中文名称 | 出口奶粉中阪崎肠杆菌(克罗诺杆菌属)检验方法 第3部分:荧光PCR方法 | | 英文名称 | Determination of Enterobacter sakazakii (Cronobacter spp.)from dehydrated powdered milk for export. Part 3: Real-time PCR method | | 行业 | 商检行业标准 (推荐) | | 中标分类 | X16 | | 国际标准分类 | 67.100 | | 字数估计 | 6,689 | | 旧标准 (被替代) | SN/T 1632.3-2005 | | 引用标准 | SN/T 1632.1; SN/T 1632.2-2013 | | 标准依据 | 国质检认(2013)569号 | | 发布机构 | 海关总署 | | 范围 | SN/T 1632的本部分规定了奶粉中阪崎肠杆菌(克罗诺杆菌属)的荧光PCR检测方法。本部分适用于奶粉中阪崎肠杆菌(克罗诺杆菌属)的快速定性检测, 其他食品可参照执行。 | SN/T 1632.3-2013
Determination of Enterobacter sakazakii (Cronobacter spp.)from dehydrated powdered milk for export.Part 3: Real-time PCR method
中华人民共和国出入境检验检疫行业标准
代替SN/T 1632.3-2005
出口奶粉中阪崎肠杆菌(克罗诺杆菌属)
检验方法 第3部分:荧光PCR方法
2013-11-06发布
2014-06-01实施
中 华 人 民 共 和 国
国家质量监督检验检疫总局 发 布
前言
SN/T 1632《出口奶粉中阪崎肠杆菌(克罗诺杆菌属)检验方法》共分为3个部分:
---第1部分:分离与计数;
---第2部分:PCR方法;
---第3部分:荧光PCR方法。
本部分为SN/T 1632的第3部分。
本部分依照GB/T 1.1-2009给出的规则起草。
本部分代替SN/T 1632.3-2005《奶粉中阪崎肠杆菌检验方法 第3部分:荧光PCR方法》。
本部分与SN/T 1632.3-2005相比,除编辑性修改外,主要技术变化如下:
---修改了标准的中英文名称;
---修改了引物和探针;
---删除了定义、术语和缩略语;
---增加了克罗诺杆菌属内种的分型鉴别方法的资料性附录。
请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任。
本部分由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。
本部分起草单位:中国检验检疫科学研究院、中华人民共和国深圳出入境检验检疫局、中华人民共
和国天津出入境检验检疫局。
本部分主要起草人:赵贵明、王娉、吕敬章、陈颖、杨海荣、赵勇胜、高旗利、张霞、刘培。
本部分所代替标准的历次版本发布情况为:
---SN/T 1632.3-2005。
出口奶粉中阪崎肠杆菌(克罗诺杆菌属)
检验方法 第3部分:荧光PCR方法
1 范围
SN/T 1632的本部分规定了奶粉中阪崎肠杆菌(克罗诺杆菌属)的荧光PCR检测方法。
本部分适用于奶粉中阪崎肠杆菌(克罗诺杆菌属)的快速定性检测,其他食品可参照执行。
2 规范性引用文件
下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件,仅注日期的版本适用于本文
件。凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。
SN/T 1632.1出口奶粉中阪崎肠杆菌(克罗诺杆菌属)检验方法 第1部分:分离与计数
SN/T 1632.2-2013出口奶粉中阪崎肠杆菌(克罗诺杆菌属)检验方法 第2部分:PCR方法
3 测定方法
3.1 方法提要
奶粉经增菌后,取增菌液1mL加到1.5mL无菌离心管中,以8000r/min的转速离心5min,轻轻
倒去上清液,倒置于吸水纸上,吸干液体,不同样品应在吸水纸不同地方吸干;加入50μLDNA提取液
(使用前室温解冻并充分混匀,快速吸取),混匀后沸水浴5min,以12000r/min的转速离心5min,取
上清液作为模板进行荧光PCR扩增,观察荧光PCR仪的实时曲线,从而对奶粉中的阪崎肠杆菌(克罗
诺杆菌属)进行快速检测。
3.2 试剂和材料
见SN/T 1632.1。除另有规定外,试剂为分析纯或生化试剂,水为灭菌双蒸水。
3.2.1 引物:
5’-GGCGAGCGGCGAATATTAT-3’
3.2.2 探针:
3.2.3 ExTaqDNA聚合酶。
3.2.4 dNTPs:dATP、dTTP、dCTP、dGTP。
3.2.5 DNA提取试剂:0.1%Chelex100(螯合树脂)水溶液。
3.2.6 10×PCR缓冲液:200mmol/LTris-HCl(pH8.4),200mmo......
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