SN/T 5334.5-2020 相关标准英文版PDF
| 标准号码 | 价格美元 | 第2步(购买) | 交付天数 | 标准名称 |
| SN/T 5334.5-2020 | 159 | SN/T 5334.5-2020 | [PDF]天数 <=3 | 转基因植物产品的数字PCR检测方法 第5部分：转基因棉花 |
| 基本信息 | |
|---|---|
| 标准编号 | SN/T 5334.5-2020 (SN/T5334.5-2020) |
| 中文名称 | 转基因植物产品的数字PCR检测方法 第5部分：转基因棉花 |
| 英文名称 | (Digital PCR detection method for genetically modified plant products - Part 5: Genetically modified cotton) |
| 行业 | 商检行业标准 (推荐) |
| 中标分类 | B16 |
| 国际标准分类 | 65.020.01 |
| 字数估计 | 7,731 |
| 发布日期 | 2020-12-30 |
| 实施日期 | 2021-07-01 |
| 标准依据 | 海关总署公告2020年第136号 |
| 发布机构 | 海关总署 |
SN/T 5334.5-2020: 转基因植物产品的数字PCR检测方法 第5部分：转基因棉花
SN/T 5334.5-2020 英文名称: (Digital PCR detection method for genetically modified plant products -- Part 5: Genetically modified cotton)
中华人民共和国出入境检验检疫行业标准
转基因植物产品的数字 PCR 检测方法 第 5 部分：转基因棉花
中华人民共和国海关总署 发 布
前言
SN/T 5334-2020《转基因植物产品的数字 PCR 检测方法》分为 8 个部分：
--第 1 部分：通用要求及定义；
--第 2 部分：转基因大豆；
--第 3 部分：转基因玉米；
--第 4 部分：转基因油菜；
--第 5 部分：转基因棉花；
--第 6 部分：转基因马铃薯；
--第 7 部分：转基因苜蓿；
--第 8 部分：转基因甜菜。
本文件为 SN/T 5334-2020 的第 5 部分。
本文件按照 GB/T 1.1-2020 给出的规则起草。
本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任。
本文件由中华人民共和国海关总署提出并归口。
本文件起草单位：中国检验检疫科学研究院、中华人民共和国上海海关。
本文件主要起草人：李想、黄新新、刘静远、蔡一村、蒋静、左翠花、郭德华、朱雅君、付伟、
何宇平、刘月明、朱鹏宇、黄文胜、朱水芳。
转基因植物产品的数字 PCR 检测方法
第 5 部分：转基因棉花
1 范围
本文件规定了 GHB119、T304-40、GHB614、LLCotton25、MON1445、MON15985-7、MON88913 等
7 个转基因棉花品系的转化事件特异性数字 PCR 检测方法。
本文件适用于棉籽、棉籽粕、棉花叶子中上述 7 个转基因棉花品系的检测。本文件的定量检测下
限为 40 pg（约 20 拷贝）棉花基因组 DNA 或 0.1%（w/w）含量转基因棉花品系成分。
2 规范性引用文件
下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文
件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适
用于本文件。
SN/T 5334.1 转基因植物产品的数字 PCR 检测方法 第 1 部分：通用要求及定义
3 术语和定义
SN/T 5334.1 界定的术语与定义适用于本文件。
4 方法原理
见 SN/T 5334.1
5 主要设备及试剂
5.1 内源基因和外源基因：内源基因为 Adhc 基因；外源序列为品系 GHB614、MON1445、MON88913
外源基因插入位点 5’ 端跨边界序列，品系 GHB119、T304-40、LLCotton25、MON15985-7 外源基因插入
位点 3’ 端跨边界序列。引物及探针序列参见附录 A。
5.2 其他设备及试剂要求见 SN/T 5334.1 的规定。
6 方法操作步骤
6.1 一般性操作步骤
一般性操作步骤按照 SN/T 5334.1 的规定执行。
6.2 数字 PCR 反应体系配制
按表 1 将各组分加入洁净离心管中，充分混匀。PCR 体系配制及转移时尽量避免产生气泡。每
个测试样和质控样品的 Adhc 基因及转化体特异性序列的数字 PCR 应设置至少 3 个平行重复。
6.3 数字 PCR 反应程序
根据仪器要求，将配制好的数字 PCR 反应混合液，加入微反应体系生成装置的加样孔中，按仪
器操作说明生成微反应体系。将微反应体系放置于 PCR 扩增仪中，按以下参数进行 PCR 扩增：95 ℃，
5 min（1 ℃/s）,1 个 循 环；94 ℃，15 s，59 ℃，1 min（1 ℃/s），40 个 循 环；98 ℃ 10 min（1 ℃/s），
1 个循环；12 ℃ 保存反应产物。对微反应体系进行荧光检测，记录阳性和阴性微反应体系数量及其
比值。根据比值分别计算数字 PCR 反应体系中的 Adhc 基因拷贝数（copies/μL）和品系特异性序列拷
贝数（copies/μL）。
注：PCR 反应参数可根据基因扩增仪型号的不同进行适当的调整。
7 结果判定与表述
结果计算见 SN/T 5334.1。
--检测结果中内标准基因与外源基因均符合阴性以及空白的质量控制要求，说明该样品未检出
棉花内标准 Adhc 基因，表述为“该样品未检出棉花成分”；
--检测结果中，内标准基......