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| 标准编号 | SN/T 1135.5-2007 (SN/T1135.5-2007) | | 中文名称 | 马铃薯环腐病菌检疫鉴定方法 | | 英文名称 | Identification of Clavibacter michiganensis subsp.sepedonicus | | 行业 | 商检行业标准 (推荐) | | 中标分类 | B16 | | 国际标准分类 | 65.020 | | 字数估计 | 9,952 | | 发布日期 | 2007-12-24 | | 实施日期 | 2008-07-01 | | 标准依据 | 行业标准备案公告2008年第2号(总第98号);国认科[2011]63号;认办科函[2015]247号 | | 发布机构 | 海关总署 | | 范围 | SN/T 1135的本部分规定了马铃薯环腐病菌的检疫鉴定方法。本部分适用于所有进出境马铃薯种薯及商品用薯的检疫和鉴定。 | SN/T 1135.5-2007
Identification of Clavibacter michiganensis subsp.sepedonicus
书中华人民共和国出入境检验检疫行业标准
SN／T１１３５．５-２００７
马铃薯环腐病菌检疫鉴定方法
２００７-１２-２４发布
２００８-０７-０１实施
中 华 人 民 共 和 国
国家质量监督检验检疫总局 发 布
前言
ＳＮ/T １１３５共分为五个部分：
---马铃薯癌肿病检疫鉴定方法；
---马铃薯黄化矮缩病毒检疫鉴定方法；
---马铃薯帚顶病毒检疫鉴定方法；
---马铃薯黑粉病菌检疫鉴定方法；
---马铃薯环腐病菌检疫鉴定方法。
本部分是ＳＮ/T １１３５的第５部分。
本部分的附录Ｂ、附录Ｃ均为规范性附录，附录Ａ为资料性附录。
本部分由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。
本部分起草单位：中国检验检疫科学研究院、中华人民共和国北京出入境检验检疫局。
本部分主要起草人：赵文军、陈红运、梁新苗、张乐、朱水芳、魏梅生。
本部分系首次发布的出入境检验检疫行业标准。
SN／T１１３５．５-２００７
马铃薯环腐病菌检疫鉴定方法
１ 范围
ＳＮ/T １１３５的本部分规定了马铃薯环腐病菌的检疫鉴定方法。
本部分适用于所有进出境马铃薯种薯及商品用薯的检疫和鉴定。
２ 术语和定义
下列术语和定义适用于ＳＮ/T １１３５的本部分。
２．１
双抗体夹心酶联免疫吸附测定
在固相支持物上（酶联板）包被细菌特异性抗体，加入待测样品后，再用酶标记的细菌抗体进行免疫
识别，最后通过酶促化学反应检测细菌是否存在的一种血清学检测方法。
２．２
PCR
以耐热ＤＮＡ聚合酶和一对引物（与待测目标核酸分子序列同源的ＤＮＡ片段）通过高温（ＤＮＡ分
子变性）和低温（引物和目标核酸分子复性并被耐热ＤＮＡ聚合酶延伸）交替循环扩增待测目标核酸分
子的方法。
３ 原理
４ 仪器和用具
４．１ 仪器设备
ＰＣＲ仪、超净工作台、灭菌锅、制冰机、核酸蛋白分析仪、高速冷冻离心机、台式小型离心机、超低温
冰箱、常规冰箱、旋涡振荡器、微量进样器、电泳仪、凝胶成像系统、酶标仪。
４．２ 主要试剂
除另有规定外，所有试剂均为分析纯。ＰＣＲ 缓冲液、氯化镁（ＭｇＣｌ２）、ｄＮＴＰｓ（ｄＡＴＰ、ｄＴＴＰ、
ｄＣＴＰ、ｄＧＴＰ）、T犪狇ＤＮＡ聚合酶、引物和探针、牛肉汁、酵母膏、磷酸氢二钾（Ｋ２ＨＰＯ４）、磷酸二氢钾
（ＫＨ２ＰＯ４）、硫酸镁（ＭｇＳＯ４）、葡萄糖、琼脂，酶联检测试剂见附录Ｂ。
５ 病菌的鉴定
５．１ 症状检查
取样品量１％～５％（若样品少可适量增大比例）的块茎进行检查。将块茎横切，检查环腐病菌侵染
症状，挤压块茎，检查维管组织是否浸解。发病轻者维管束变黄，呈不连续的点状变色；重者整个维管束
环变色。病菌也可侵害块茎维管束周围的薄壁组织，呈环状腐烂，严重时可引起皮层与髓部组织分离，
轻轻挤压块茎从维管束中涌出奶酪样的柱状物。块茎表面的症状在轻度危害时不明显，随病害发展，皮
色变暗或变褐，严重......
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