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| 标准编号 | SN/T 1171.2-2003 (SN/T1171.2-2003) | | 中文名称 | 山羊关节炎-脑炎抗体检测方法 琼脂免疫扩散试验 | | 英文名称 | Detection of antibodies against caprine arthritis-encephalitis virus (CAEV). Agar gel immunodiffusion (AGID) | | 行业 | 商检行业标准 (推荐) | | 中标分类 | B41 | | 字数估计 | 5,526 | | 发布日期 | 2003-03-17 | | 实施日期 | 2003-09-01 | | 采用标准 | OIE/chapter2.4.4, NEQ | | 标准依据 | 国质检认[2011]90号 | | 发布机构 | 中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局 |
SN/T 1171.2-2003
Detection of antibodies against caprine arthritis-encephalitis virus (CAEV).Agar gel immunodiffusion (AGID)
书中华人民共和国出入境检验检疫行业标准
SN/T1171.2-2003
山羊关节炎-脑炎抗体检测方法
琼脂免疫扩散试验
2003-03-17发布
2003-09-01实施
中 华 人 民 共 和 国
国家质量监督检验检疫总局 发 布
前言
本标准根据OIE/chapter2.4.4《诊断试验和疫苗标准手册》起草。
本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。
本标准起草单位:中华人民共和国深圳出入境检验检疫局。
本标准主要起草人:杨宝华、崔路、耿捷、曾晓平。
本标准是首次发布的出入境检验检疫行业标准。
SN/T1171.2-2003
山羊关节炎-脑炎抗体检测方法
琼脂免疫扩散试验
1 范围
本标准规定了应用琼脂免疫扩散试验检测山羊血清中抗山羊关节炎-脑炎病毒抗体的方法。
本标准适用于山羊关节炎-脑炎的流行病学调查、诊断、检疫和疫情监测。
2 试验原理
琼脂是一种含有硫酸基的多糖体,高温时能溶于水,冷却后凝固,形成凝胶,琼脂凝胶呈多孔结构,
其孔径大小取决于琼脂的浓度。1%琼脂凝胶的孔径约85nm,这一孔径范围能允许可溶性抗原抗体分
子在琼脂凝胶中自由扩散,并由近及远形成浓度梯度,当二者在比例适当处相遇,即发生沉淀反应,并形
成沉淀带。根据有无沉淀带的形成判断是否存在相应的抗原抗体免疫反应,从而判断样品中是否存在
相应的抗体或抗原。
3 仪器与试验准备
3.1 CAE琼脂扩散抗原和阳性对照血清
由指定单位提供。
3.2 琼脂糖凝胶板的制备
用Tris-HCl缓冲液配置0.9%~1%琼脂糖并制板:Tris0.605g和氯化钠(NaCl)8.0g溶于
100mL蒸馏水中,继用1mol/L盐酸(HCl)溶液调pH至7.2,然后加入0.9g~1g琼脂糖,隔水煮沸
溶解或高压溶解,冷却至55℃左右取约15mL倒入直径为9cm平皿制作琼脂糖凝胶板,冷却后4℃保
存备用。
3.3 采样与样品处理
无菌条件下静脉采血5mL左右,将血样进行血清分离后,经56℃水浴灭活30min后待检。
3.4 仪器
天平(0.001g)、水浴锅、琼脂凝胶打孔器。
4 操作步骤
4.1 打孔
取冷却琼脂糖凝胶板用打孔模具按下列图示进行打孔,孔径5m......
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