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| 标准编号 | SN/T 1699.3-2006 (SN/T1699.3-2006) | | 中文名称 | 猪流行性腹泻间接斑点酶联免疫吸附试验操作规程 | | 英文名称 | Protocol of indirect dot enzyme-linked immunosorbent assay for the detection of porcine epidemic diarrhea | | 行业 | 商检行业标准 (推荐) | | 中标分类 | B41 | | 国际标准分类 | 11.220 | | 字数估计 | 9,977 | | 发布日期 | 2006-01-26 | | 实施日期 | 2006-08-16 | | 引用标准 | GB/T 6682 | | 标准依据 | Industry Standard Notice 2006 No. 4 (total of 76) | | 发布机构 | 海关总署 | | 范围 | SN/T 1699的本部分规定了猪流行性腹泻间接斑点酶联免疫吸附试验检测方法。本部分适用于猪流行性腹泻病毒抗体的检测。亦可用于本病的检疫、疫情监测和流行病学调查。 | SN/T 1699.3-2006
Protocol of indirect dot enzyme-linked immunosorbent assay for the detection of porcine epidemic diarrhea
书中华人民共和国出入境检验检疫行业标准
SN／T１６９９．３-２００６
猪流行性腹泻间接斑点酶联免疫
吸附试验操作规程
２００６-０１-２６发布
２００６-０８-１６实施
中 华 人 民 共 和 国
国家质量监督检验检疫总局 发 布
前言
ＳＮ/T １６９９分为三部分：
---猪流行性腹泻微量血清中和试验操作规程；
---猪流行性腹泻病毒直接免疫荧光试验操作规程；
---猪流行性腹泻间接斑点酶联免疫吸附试验操作规程。
本部分为ＳＮ/T １６９９的第３部分。
本部分的附录Ａ为规范性附录，附录Ｂ为资料性附录。
本部分由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。
本部分起草单位：中华人民共和国广东出入境检验检疫局。
本部分主要起草人：陈茹、罗琼、林志雄、刘琳琳。
本部分系首次发布的出入境检验检疫行业标准。
SN／T１６９９．３-２００６
引 言
猪流行性腹泻（ｐｏｒｃｉｎｅｅｐｉｄｅｍｉｃｄｉａｒｒｈｅａ，ＰＥＤ）是由猪流行性腹泻病毒（ＰＥＤＶ）引起的一种以腹
泻、呕吐和脱水为主要特征的猪肠道传染病，临床表现与猪传染性胃肠炎（ＴＧＥ）十分相似。１９７８年，比
利时首次证实该病病原为冠状病毒。由于缺乏稳定的疫苗生产，该病已成为欧、亚洲养猪业发达的国家
和地区猪病防治的重点研究对象，并被列入我国进境动物二类传染病名录。
ＰＥＤ在流行病学、临床表现和病毒形态等方面与ＴＧＥ无显著区别，确诊主要借助特异性血清学和
分子生物学方法。
运用间接法斑点酶联免疫吸附试验（Ｄｏｔ-ＥＬＩＳＡ）能快速检测到感染动物血清中存在的ＰＥＤＶ抗
体，尤其适用于大批量样品的初筛检测。
SN／T１６９９．３-２００６
猪流行性腹泻间接斑点酶联免疫吸附试验操作规程
１ 范围
ＳＮ/T １６９９的本部分规定了猪流行性腹泻间接斑点酶联免疫吸附试验检测方法。
本部分适用于猪流行性腹泻病毒抗体的检测。亦可用于本病的检疫、疫情监测和流行病学调查。
２ 规范性引用文件
下列文件中的条款通过ＳＮ/T １６９９的本部分的引用而成为本部分的条款。凡是注日期的引用文
件，其随后所有的修改单（不包括勘误的内容）或修订版均不适用于本部分，然而，鼓励根据本部分达成
协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本
部分。
GB/T ６６８２ 分析实验室用水规格及试验方法
３ 原理
斑点酶联免疫吸附试验是一种免疫酶标记技术，其原理与步骤与常规酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ）
基本相同，不同之处在于：将固相吸附载体用固相化基质膜代替，用于吸附抗原或抗体，并选用不溶性的
供氢体做为显色底物，结果以在基质膜上出现有色斑点来判定。
４ 缩略语
下列缩略语适用于ＳＮ/T １６９９的本部分。
４．１
斑点酶联免疫吸附试验。
４．２
HRP-SPA
辣根过氧化物酶标记的葡萄球菌Ａ蛋白。
５ 设备和器材
５．１ 摇床。
５．２ 恒温培养箱。
５．３ 可调单道、八道微量移液器和吸头（１０μＬ、２００μＬ）。
５．４ 硝酸纤维素微孔滤膜（０．２２μｍ）。
５．５ 微量细胞培......
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