[PDF] GB 4789.15-2010 - 中国标准 英文版

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GB 4789.15-2010 70 GB 4789.15-2010 9秒内 食品安全国家标准　食品微生物学检验　霉菌和酵母计数
   
基本信息
标准编号 GB 4789.15-2010 (GB4789.15-2010)
中文名称 食品安全国家标准　食品微生物学检验　霉菌和酵母计数
英文名称 National food safety standard -- Food microbiological examination: Enumeration of moulds and yeasts
行业 国家标准
中标分类 C53
国际标准分类 07.100.30
字数估计 8,867
发布日期 2010-03-26
实施日期 2010-06-01
旧标准 (被替代) GB/T 4789.15-2003
标准依据 卫生部通告卫通(2010)7号;国家卫生和计划生育委员会公告2016年第15号
发布机构 中华人民共和国卫生部
范围 本标准规定了食品中霉菌和酵母菌(moulds and yeasts)的计数方法。本标准适用于各类食品中霉菌和酵母菌的计数。

GB 4789.15-2010: 食品安全国家标准　食品微生物学检验　霉菌和酵母计数 GB 4789.15-2010 英文名称: National food safety standard -- Food microbiological examination: Enumeration of moulds and yeasts 中华人民共和国国家标准 食品安全国家标准 食品微生物学检验 霉菌和酵母计数 1 范围 本标准规定了食品中霉菌和酵母菌（moulds and yeasts）的计数方法。 本标准适用于各类食品中霉菌和酵母菌的计数。 5 操作步骤 5.1 样品的稀释 5.1.1 固体和半固体样品：称取 25 g 样品至盛有 225 mL 灭菌蒸馏水的锥形瓶中，充分振摇，即为 1:10 稀释液。或放入盛有 225 mL 无菌蒸馏水的均质袋中，用拍击式均质器拍打 2min，制成 1:10 的样品匀液。 5.1.2 液体样品：以无菌吸管吸取 25 mL 样品至盛有 225 mL 无菌蒸馏水的锥形瓶（可在瓶内预置适 当数量的无菌玻璃珠）中，充分混匀，制成 1:10 的样品匀液。 5.1.3 取 1 mL 1:10 稀释液注入含有 9 mL 无菌水的试管中, 另换一支 1 mL 无菌吸管反复吹吸,此液为1:100 稀释液。 5.1.4 按 5.1.3 操作程序，制备 10 倍系列稀释样品匀液。每递增稀释一次，换用 1 次 1 mL 无菌吸管。 5.1.5 根据对样品污染状况的估计，选择 2 个～3 个适宜稀释度的样品匀液（液体样品可包括原液）， 在进行 10 倍递增稀释的同时，每个稀释度分别吸取 1 mL 样品匀液于 2 个无菌平皿内。同时分别取 1 mL 样品稀释液加入 2 个无菌平皿作空白对照。 5.1.6 及时将 15 mL～20 mL 冷却至 46 ℃的马铃薯-葡萄糖-琼脂或孟加拉红培养基(可放置于 46℃±1℃恒温水浴箱中保温)倾注平皿，并转动平皿使其混合均匀。 5.2 培养检 样25g（mL）样品+ 225mL 无菌蒸馏水，均质 10 倍系列稀释 选择 2 个～3 个适宜稀释度的样品匀液，各取 1mL 分别加入无菌培养皿内 每皿中加入 15mL～20mL 马铃薯-葡萄糖-琼脂或孟加拉红培养基 5.3 菌落计数 肉眼观察，必要时可用放大镜，记录各稀释倍数和相应的霉菌和酵母数。以菌落形成单位（colony forming units，CFU）表示。 选取菌落数在 10 CFU～150 CFU 的平板，根据菌落形态分别计数霉菌和酵母数。霉菌蔓延生长覆 盖整个平板的可记录为多不可计。菌落数应采用两个平板的平均数。 6 结果与报告 6.1 计算两个平板菌落数的平均值，再将平均值乘以相应稀释倍数计算。 6.1.2 若所有平板上菌落数均大于 150 CFU，则对稀释度最高的平板进行计数，其他平板可记录为多 不可计，结果按平均菌落数乘以最高稀释倍数计算。 6.1.3 若所有平板上菌落数均小于 10 CFU，则应按稀释度最低的平均菌落数乘以稀释倍数计算。 6.1.4 若所有稀释度平板均无菌落生长，则以小于 1 乘以最低稀释倍数计算；如为原液，则以小于 1计数。 6.2 报告 6.2.1 菌落数在 100 以内时，按“四舍五入”原则修约，采用两位有效数字报告。 6.2.2 菌落数大于或等于 100 时，前 3 位数字采用“四舍五入”原则修约后，取前 2 位数字，后面用 0 代替位数来表示结果；也可用 10 的指数形式来表示，此时也按“四舍五入”原则修约，采用两位有效数字。 6.2.3 称重取样以 CFU/g 为单位报告，体积取样以 CFU/mL 为单位报告，报告或分别报告霉菌和/或酵母数。 附录 A (规范性附录) 培养基和试剂 A.1 马铃薯-葡萄糖-琼脂 A.1.1 成分 A.1.2 制法 将马铃薯去皮切块，加 1000mL 蒸馏水，煮沸 10 min～20 min。用纱布过滤，补加蒸馏水至 1000 mL。 加入葡萄糖和琼脂，加热溶化，分装后，121 ℃灭菌 20 min。倾注平板前，用少量乙醇溶解氯霉素加入 培养基中 A.2 孟加拉红培养基 A.2.1 成分 A.2.2 制法 上述各成分加入蒸馏水中，加热溶化，补足蒸馏水至 1000 mL，分装后，121℃灭菌 20 min。倾注 平板前，用少量乙醇溶解氯霉素加入培养基中。 附录 B (资料性附录) 霉菌直接镜检计数法 常用的为郝氏霉菌计测法，本方法适用于番茄酱罐头。 B.1 设备和材料 B.1.1 折光仪。 B.1.2 显微镜。 B.1.3 郝氏计测玻片：具有标准计测室的特制玻片。 B.1.4 盖玻片。 B.1.5 测微器：具标准刻度的玻片。 B.2 操作步骤 B.2.1 检样的制备：取定量检样,加蒸馏水稀释至折光指数为 1.3447～1.3460（即浓度为 7.9%～8.8%），备用。 B.2.2 显微镜标准视野的校正：将显微镜按放大率 90～125 倍调节标准视野，使其直径为 1.382 mm。 B.2.3 涂片：洗净郝氏计测玻片，将制好的标准液，用玻璃棒均匀的摊布于计测室，以备观察。 B.2.4 观测：将制......