路径: 主页 > GB/T > 第627页 > GB/T 18636-2017 | 标准编号 | GB/T 18636-2017 (GB/T18636-2017) | | 中文名称 | 蓝舌病诊断技术 | | 英文名称 | Diagnostic techniques for bluetongue | | 行业 | 国家标准 (推荐) | | 中标分类 | B41 | | 国际标准分类 | 11.220 | | 字数估计 | 29,251 | | 发布日期 | 2017-11-01 | | 实施日期 | 2018-05-01 | | 旧标准 (被替代) | GB/T 18636-2002 | | 标准依据 | 国家标准公告2017年第29号 | | 发布机构 | 中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局、中国国家标准化管理委员会 | GB/T 18636-2017
Diagnostic techniques for bluetongue
ICS 11.220
B41
中华人民共和国国家标准
代替GB/T 18636-2002
蓝 舌 病 诊 断 技 术
2017-11-01发布
2018-05-01实施
中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局
中国国家标准化管理委员会发布
目次
前言 Ⅲ
1 范围 1
2 规范性引用文件 1
3 临床诊断 1
3.1 流行病学 1
3.2 临床症状 1
3.3 病理变化 2
3.4 结果判定 2
4 病毒分离 2
4.1 器材 2
4.2 试剂 2
4.3 试验程序 2
4.4 病毒鉴定 4
4.5 结果判定 4
5 免疫酶染色 4
5.1 器材 4
5.2 试剂 4
5.3 试验程序 4
5.4 试验成立条件 5
5.5 结果判定 5
6 抗原捕获酶联免疫吸附试验(AC-ELISA) 5
6.1 器材 5
6.2 试剂 5
6.3 样品 5
6.4 试验设计 5
6.5 试验程序 5
6.6 试验成立的条件 6
6.7 结果判定 6
7 定型微量中和试验 6
7.1 器材 6
7.2 试剂 6
7.3 试验准备 7
7.4 筛检试验程序 7
7.5 试验成立的条件 8
7.6 结果判定 8
8 蚀斑及蚀斑抑制定型试验 8
8.1 器材 8
8.2 试剂 9
8.3 蚀斑试验程序 9
8.4 蚀斑抑制试验程序 9
8.5 结果判定 9
9 反转录聚合酶链式反应(RT-PCR) 9
9.1 器材 9
9.2 试剂 10
9.3 试验程序 10
9.4 试验成立的条件 11
9.5 结果判定 11
10 荧光RT-PCR检测 11
10.1 器材 11
10.2 试剂 11
10.3 试验程序 12
10.4 阈值设定 13
10.5 试验成立的条件 13
10.6 结果判定 13
11 琼脂免疫扩散试验(AGID) 13
11.1 器材 13
11.2 试剂 13
11.3 试验程序 14
11.4 结果判定 14
12 竞争酶联免疫吸附试验(C-ELISA) 15
12.1 器材 15
12.2 试剂 15
12.3 试验程序 15
12.4 读数和抑制率计算 16
12.5 试验成立的条件 16
12.6 结果判定 16
13 诊断结果判定 16
13.1 疑似病例 16
13.2 确诊病例 16
13.3 隐性感染 16
附录A(规范性附录) 细胞培养液的制备 17
附录B(规范性附录) 免疫酶染色试验用溶液的配制 18
附录C(规范性附录) 酶联免疫试验和定型微量中和试验用溶液的配制 19
附录D(资料性附录) Karber方法 21
附录E(规范性附录) 蚀斑及蚀斑抑制定型试验 22
附录F(规范性附录) RT-PCR试验用溶液和引物的配制 23
附录G(规范性附录) 荧光RT-PCR引物和探针的合成与配制 24
附录H (规范性附录) 琼脂平板的制备 25
前言
本标准按照GB/T 1.1-2009给出的规则起草。
本标准代替GB/T 18636-2002《蓝舌病诊断技术》,与GB/T 18636-2002相比,除编辑性修改外,
主要技术变化如下.
---增加了临床诊断;
---增加了反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)检测方法;
---增加了荧光RT-PCR检测方法。
本标准由中华人民共和国农业部提出。
本标准由全国动物卫生标准化技术委员会(SAC/TC181)归口。
本标准起草单位.云南省畜牧兽医科学院、中华人民共和国深圳出入境检验检验局。
本标准主要起草人.李华春、朱建波、花群义、肖雷、宋建领、李乐、高林、苗海生。
本标准历次版本发布情况为.
---GB/T 18636-2002。
蓝 舌 病 诊 断 技 术
1 范围
本标准规定了蓝舌病(Bluetongue,BT)诊断的技术方法和试验程序。
本标准适用于反刍动物蓝舌病的诊断、流行病学调查及检疫。所述方法包括临床诊断、病原分离和
鉴定、病原核酸检测以及血清学检测,其中.
---病毒分离适用于从动物的血液、脏器和精液中分离蓝舌病病毒(BluetongueVirus,BTV);
Assay,AC-ELISA)适用于对分离到的病毒进行血清群的鉴定;
---定型微量中和试验和蚀斑及蚀斑抑制定型试验适用于对分离到的BTV进行血清型的鉴定;
RT-PCR检测适用于动物的血液、脏器和精液中BTV核酸的检测,也适用于对分离到的病毒
进行血清群鉴定;
体的检测。
2 规范性引用文件
下列文件中对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件,仅注日期的版本适用于本
文件。凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。
GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法
GB 19489 实验室 生物安全通用要求
SN/T 1193 基因检验实验室技术要求
3 临床诊断
3.1 流行病学
3.1.1 蓝舌病是由呼肠孤病毒科环状病毒属的蓝舌病病毒引起,由库蠓通过叮咬传播,感染反刍动物
致其发病的非接触性传播的虫媒病毒病。
3.1.2 BTV主要引起绵羊发病和死亡,牛和山羊常为隐性感染,偶有发病和死亡。
3.1.3 蓝舌病的发生和分布与库蠓有密切关系,主要爆发于库蠓大量活动的夏秋......
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