路径: 主页 > GB/T > 第627页 > GB/T 18646-2018 | 标准编号 | GB/T 18646-2018 (GB/T18646-2018) | | 中文名称 | 动物布鲁氏菌病诊断技术 | | 英文名称 | Diagnostic techniques for animal brucellosis | | 行业 | 国家标准 (推荐) | | 中标分类 | B41 | | 国际标准分类 | 11.220 | | 字数估计 | 42,454 | | 发布日期 | 2018-02-06 | | 实施日期 | 2018-09-01 | | 发布机构 | 国家市场监督管理总局、中国国家标准化管理委员会 | GB/T 18646-2018
动物布鲁氏菌病诊断技术
Diagnostic techniques for animal brucellosis
1 范围
本标准规定了动物布鲁氏菌病的临床诊断、血清学和病原学诊断的技术方法、操作程序和判定
标准。
本标准规定的流行特点、临床症状、病理变化适用于动物布鲁氏菌病的临床诊断。
虎红平板凝集试验和间接酶联免疫吸附试验,适用于动物布鲁氏菌病的初筛试验;
乳牛全乳环状试验,适用于泌乳母牛布鲁氏菌病的初筛试验;
试管凝集试验、补体结合试验和竞争酶联免疫吸附试验适用于牛种、羊种和猪种布鲁氏菌病的血清
学确诊;病原的显微镜检查、分离培养适用于布鲁氏菌病的病原学初步诊断;病原的鉴定和PCR试验适用于动物布鲁氏菌病的病原学确诊。
本标准规定的乳牛全乳环状试验,不适用于检测患乳房炎及其他乳房疾病母牛的乳、初乳、脱脂乳
和煮沸过的乳,也不适用于腐败、变酸和冻结过的乳。
本标准规定的虎红平板凝集试验、试管凝集试验和补体结合试验,不适用于犬种和绵羊附睾种布鲁
氏菌的检测。
2 规范性引用文件
下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件,仅注日期的版本适用于本文
件。凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。
GB/T 18088 出入境动物检疫采样
GB 19489-2008 实验室生物安全通用要求
3 缩略语
下列缩略语适用于本文件。
OIE 世界动物卫生组织
RBT 虎红平板凝集试验
MRT 乳牛全乳环状试验
SAT 试管凝集试验
4 诊断方法
4.1 流行特点
多种动物对布鲁氏菌易感,羊、牛、猪的易感性最强。母畜比公畜易感,成年畜比幼年畜易感。动物
的易感性随着性成熟年龄接近而增高,在母畜中,第一次妊娠母畜发病较多。
患病和带菌动物是主要传染源,尤其是感染的妊娠母畜,在流产或分娩时将大量的布鲁氏菌随着胎
儿、胎水和胎衣排出,流产后的阴道分泌物和乳汁中都含有布鲁氏菌。
布鲁氏菌病的传播途径主要是消化道,也可通过皮肤、黏膜、交配等感染,蜱的叮咬可传播本病。
布鲁氏菌病呈现明显的接触传播特征,通过直接接触或间接接触均可造成传播,在牧区或农牧区多
发,疾病的发生不具有明显的季节性,在有感染的群体内呈扩散传播特点。一般为散发,羊种布鲁氏菌
病可呈地方流行性发生。
4.2 临床症状
潜伏期一般为14d~180d。
显著症状是妊娠母畜发生流产,流产后可能发生胎衣滞留和子宫内膜炎,从阴道流出污秽不洁、恶
臭的分泌物。新发病的畜群流产较多;老疫区畜群发生流产的较少,但发生子宫内膜炎、乳房炎、关节
炎、局部脓肿、胎衣滞留、久配不孕的较多。公畜往往发生睾丸炎、附睾炎或关节炎。
4.3 病理变化
警示---对本病剖检采样过程当中应当防止病原微生物扩散和感染。
主要病变为妊娠或流产母畜子宫内膜和胎衣的炎性浸润、渗出、出血及坏死,有的可见关节炎。胎
儿主要呈败血症病变,浆膜和黏膜有出血点和出血斑,皮下结缔组织发生浆液性、出血性炎症。
组织学检查可见脾、淋巴结、肝、肾等器官形成特征性肉芽肿。
4.4 虎红平板凝集试验(RBT)
4.4.1 器材
微量移液器,灭菌移液器吸头、牙签或混匀棒,计时器,洁净的玻璃板(其上划分成4cm2 的方格)。
4.4.2 试剂
商品化的布鲁氏菌虎红平板凝集试验抗原、布鲁氏菌标准阳性血清和布鲁氏菌标准阴性血清。
4.4.3 操作方法
4.4.3.1 按常规方法采集和分离受检血清。
4.4.3.2 将受检血清、布鲁氏菌标准阴、阳性血清和抗原从冰箱取出平衡至室温。
4.4.3.3 涡旋混匀血清和抗原,分别吸取25μL的血清和抗原加于玻璃板4cm2 方格内的两侧。
4.4.3.4 用灭菌牙签或混匀棒快速混匀血清和抗原,涂成2cm直径的圆形,混匀后4min,在自然光下
观察。
4.4.3.5 试验应设标准阴、阳性血清对照。
4.4.4 结果判定
4.4.4.1 在标准阴性血清不出现凝集、标准阳性血清出现凝集时,试验成立,方可对受检血清进行判定。
4.4.4.2 出现肉眼可见凝集现象者判定为阳性(+),无凝集现象且反应混合液呈均匀粉红色者判定为
阴性(-)。
4.5 乳牛全乳环状试验(MRT)
4.5.1 器材
微量移液器,灭菌移液器吸头,内径为1cm的灭菌试管。
4.5.2 试剂
商品化布鲁氏菌全乳环状试验抗原。
4.5.3 乳样
受检乳样应为新鲜的全乳,或混合奶;采乳样时应将乳牛的乳房用温水洗净、擦干,然后将乳汁(前
......
|