路径: 主页 > GB/T > 第640页 > GB/T 31798-2015 | 标准编号 | GB/T 31798-2015 (GB/T31798-2015) | | 中文名称 | 油菜黑胫病菌检疫鉴定方法 | | 英文名称 | Detection and identification of Plenodomus biglobosus (Shoemaker and H. Brun) Gruyter, Aveskamp and Verkley | | 行业 | 国家标准 (推荐) | | 中标分类 | B16 | | 国际标准分类 | 65.020.01 | | 字数估计 | 15,191 | | 发布日期 | 2015-07-03 | | 实施日期 | 2015-11-27 | | 标准依据 | 国家标准公告2015年第22号 | | 发布机构 | 中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局、中国国家标准化管理委员会 | GB/T 31798-2015
ICS 65.020.01
B16
中华人民共和国国家标准
油菜黑胫病菌检疫鉴定方法
2015-07-03发布
2015-11-27实施
中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局
中国国家标准化管理委员会发布
前言
本标准按照GB/T 1.1-2009给出的规则起草。
请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布
机构不承担识别这些专利的责任。
本标准由全国植物检疫标准化技术委员会(SAC/TC271)提出并归口。
本标准起草单位:中华人民共和国湖北出入境检验检疫局、中国检验检疫科学研究院、中华人民共
和国上海出入境检验检疫局、中华人民共和国江苏出入境检验检疫局、华中农业大学。
本标准主要起草人:赵晖、王振华、曾宪东、易建平、李彬、李国庆、吴品珊、蔡翔。
油菜黑胫病菌检疫鉴定方法
1 范围
本标准适用于油菜种子、植株及其产品中油菜黑胫病菌的检疫和鉴定。
2 规范性引用文件
下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件,仅注日期的版本适用于本文
件。凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。
GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法
3 仪器设备和主要试剂
3.1 仪器设备
生物显微镜、体视显微镜、高速冷冻离心机、纯水仪、超净工作台、灭菌锅、制冰机、PCR仪、凝胶成
像系统、电泳仪、培养箱、超低温冰箱、常规冰箱、涡旋振荡器。
3.2 主要试剂
除另有规定外,所有试剂均为分析纯或生化试剂,试验用水符合GB/T 6682。
3.2.1 1%次氯酸钠
3.2.2 DNA提取试剂:DNA提取试剂盒,异丙醇,无水乙醇。尿素提取液(7mol/LUrea、50mmol/L
Tris-HClpH8.0、62.5mmol/LNaCl、1% SDS),蛋白酶 K(20mg/mL),苯酚∶三氯甲烷∶异戊醇
(25∶24∶1)溶液,3mol/LNaAc(pH5.2)。
3.2.3 PCR试剂:10×PCR缓冲液(含25mmol/LMgSO4),Taq酶,dNTPs。
3.2.4 凝胶电泳试剂:琼脂糖,TAE,Loading缓冲液,EB。
3.2.5 20%V8培养基:V8蔬菜汁(CampbelSoup公司)200mL,CaCO30.75g,琼脂粉13.0g,蒸馏
水定容至1000mL,调整pH至5.8,121℃高压灭菌20min。
3.2.6 马铃薯葡萄糖琼脂培养基(PDA):马铃薯浸粉5.0g,葡萄糖20.0g,氯霉素0.1g,琼脂13.0g,蒸
馏水定容至1000mL,调整pH至5.6,121℃高压灭菌20min。
4 病菌的鉴定
4.1 症状检查
4.1.1 种子症状检查
取样品......
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