[PDF] SN/T 2532-2010 - 英文版
| 标准号码 | 美元 | 购买PDF | 工期 | 标准名称(英文版) |
| SN/T 2532-2010 | 369 | SN/T 2532-2010 | <=3 | 贝类和水样中柯萨奇病毒检测方法 普通RT-PCR方法和实时荧光RT-PCR方法 |
| 基本信息 | |
|---|---|
| 标准编号 | SN/T 2532-2010 (SN/T2532-2010) |
| 中文名称 | 贝类和水样中柯萨奇病毒检测方法 普通RT-PCR方法和实时荧光RT-PCR方法 |
| 英文名称 | Determination of Coxsackieviruses in shellfish and water. Conventional RT-PCR and real-time RT-PCR |
| 行业 | 商检行业标准 (推荐) |
| 中标分类 | C53 |
| 国际标准分类 | 07.100.30 |
| 字数估计 | 14,110 |
| 发布日期 | 2010-03-02 |
| 实施日期 | 2010-09-16 |
| 引用标准 | SN/T 1193 |
| 标准依据 | National Quality Inspection (2010) 98; industry standard filing Notice 2010 No. 5 (No. 125 overall) |
| 发布机构 | 海关总署 |
| 范围 | 本标准规定了贝类和水样中B2、B3、B5、A9和A16型科萨奇病毒普通RT-PCR方法和实时荧光RT-RCR方法。本标准适用于贝类和水样中B2、B3、B5、A9和A16型科萨奇病毒的定性检测。 |
SN/T 2532-2010
Determination of Coxsackieviruses in shellfish and water.Conventional RT-PCR and real-time RT-PCR
书中华人民共和国出入境检验检疫行业标准
SN/T2532-2010
贝类和水样中柯萨奇病毒检测方法
普通RT-PCR方法
和实时荧光RT-PCR方法
2010-03-02发布
2010-09-16实施
中 华 人 民 共 和 国
国家质量监督检验检疫总局 发 布
前言
本标准附录A为规范性附录、附录B为资料性附录。
本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。
本标准起草单位:中华人民共和国上海出入境检验检疫局。
本标准主要起草人:李想、杨捷琳、潘良文、黄一、卢钟山、张舒亚、吕蓉、刘月明、高琴、刘代新。
本标准系首次发布的出入境检验检疫行业标准。
SN/T2532-2010
贝类和水样中柯萨奇病毒检测方法
普通RT-PCR方法
和实时荧光RT-PCR方法
1 范围
本标准规定了贝类和水样中B2、B3、B5、A9和 A16型柯萨奇病毒普通RT-PCR方法和实时荧光
RT-PCR方法。
本标准适用于贝类和水样中B2、B3、B5、A9和A16型柯萨奇病毒的定性检测。
2 规范性引用文件
下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件,其随后所有
的修改单(不包括勘误的内容)或修订版均不适用于本标准,然而,鼓励根据本标准达成协议的各方研究
是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件,其最新版本适用于本标准。
SN/T 1193 基因检验实验室技术要求
3 术语和定义
下列术语和定义适用于本标准。
3.1
每个反应管内的荧光信号达到设定的域值时所经历的循环数。
3.2
一种包含病毒特异性cDNA片段的重组质粒分子,可作为病毒PCR检测中的阳性对照。
4 方法提要
用合适的裂解液(如Tri-reagent)提取贝类样品中病毒RNA,并根据柯萨奇病毒RNA3’末端含有
Poly(A)的结构,用连接Oligo(dT)25的磁珠特异性吸附柯萨奇病毒RNA进行纯化。对水样中的病毒
进行富集后,采用合适的方法提取和纯化病毒RNA。利用普通RT-PCR或实时荧光RT-PCR方法进
行检测。本研究通过构建质粒标准分子(每个质粒分子包含1拷贝扩增片段),确定分别适于五种血清
型柯萨奇病毒检测的普通RT-PCR体系检测下限均为50拷贝,实时荧光RT-PCR体系检测下限均为2
拷贝。
5 试剂
所有实验用试剂均为分析纯;除特别说明外,实验用水为蒸馏水或去离子水。
5.1 阳性标本:柯萨奇病毒,-80℃冰箱保存;或含柯萨奇病毒检测目的片段的质粒标准分子,
-20℃冰箱保存。
5.2 甘氨酸缓冲液:见附录A.1.1。
5.3 PEG8000溶液:见附录A.1.2。
5.4 裂解液:......