路径: 主页 > MISC > 第353页 > WS/T 566-2017 | 标准编号 | WS/T 566-2017 (WS/T566-2017) | | 中文名称 | 片形吸虫病诊断 | | 英文名称 | Diagnosis of fascioliasis | | 行业 | 卫生行业标准 (推荐) | | 中标分类 | C61 | | 字数估计 | 13,124 | | 发布日期 | 2017-08-01 | | 实施日期 | 2018-02-01 | | 标准依据 | 国卫通(2017)11号;行业标准备案公告2018年第3号(总第219号) | | 发布机构 | 中华人民共和国国家卫生和计划生育委员会 | WS/T 566-2017: 片形吸虫病诊断
WS/T 566-2017 英文名称: Diagnosis of fascioliasis
ICS 11.020
C 61
WS
中 华 人 民 共 和 国 卫 生 行 业 标 准
片形吸虫病诊断
1 范围
本标准规定了片形吸虫病的诊断依据、诊断原则、诊断和鉴别诊断。
本标准适用于全国各级医疗机构和疾病预防控制机构对片形吸虫病的诊断。
2 术语和定义
下列术语和定义适用于本文件。
2.1
片形吸虫 Fasciola spp.
复殖目片形科片形属吸虫，寄生人体的片形吸虫主要包括肝片形吸虫（Fasciola hepatica）和巨
片形吸虫（Fasciola gigantica）（参见附录A）。
2.2
片形吸虫病 fascioliasis
由片形吸虫寄生于人体所引起的疾病，包括片形吸虫童虫在腹腔和肝脏实质中移行所造成的急性期
损害，以及成虫寄生于胆管内所致的以胆管上皮增生、胆管及胆囊炎症等为主的慢性期损害。
2.3
无症状感染者 asymptomatic case
体内有片形吸虫寄生而无明显临床症状和体征者。
2.4
片形吸虫病流行区 fascioliasis endemic area
存在片形吸虫的中间宿主（小土蜗等椎实螺科淡水螺），且当地有人和/或牛、羊等反刍动物感染
片形吸虫的地区。
3 诊断依据
3.1 流行病学史
有在流行区生活、工作、旅游史，且有生食水生植物或饮用生水史（参见附录B的B.1）。
3.2 临床表现
3.2.1 急性期
发热、腹痛、乏力，或伴有厌食、呕吐、腹胀、腹泻等症状；肝脏肿大、肝区叩痛等体征(参见附录B的B.2.1)。
3.2.2 慢性期
临床表现与急性期相比相对较轻，主要包括腹痛、乏力、贫血、纳差、厌油腻、黄疸和肝脏肿大等表现（参见附录B的B.2.2）。
3.3 实验室检查
3.3.1 粪便或十二指肠引流液检查见片形吸虫虫卵（见附录 C的 C.1和 C.2）。
3.3.2 手术或病理切片检查见片形吸虫虫体(见附录 C的 C.3)。
3.3.3 酶联免疫吸附试验（ELISA）阳性(见附录 C的 C.4)。
3.3.4 外周血嗜酸性粒细胞的百分比和/或绝对值增高。
4 诊断原则
根据流行病学史、临床表现及实验室检查结果等予以诊断。
5 诊断
5.1 无症状感染者
无明显临床症状和体征，符合3.1，且同时符合3.3.1、3.3.2中任一条。
5.2 急性片形吸虫病
5.2.1 疑似病例
同时符合3.1、3.2.1和3.3.4。
5.2.2 临床诊断病例
疑似病例并同时符合3.3.3。
5.2.3 确诊病例
疑似病例并同时符合3.3.1或3.3.2中任一条。
5.3 慢性片形吸虫病
5.3.1 疑似病例
同时符合3.1、3.2.2和3.3.4。
5.3.2 临床诊断病例
疑似病例并同时符合3.3.3。
5.3.3 确诊病例
疑似病例并同时符合3.3.1或3.3.2中任一条。
6 鉴别诊断
应与华支睾吸虫病、肝型并殖吸虫病、肝毛细线虫病、病毒性肝炎、阿米巴性肝脓肿、细菌性肝脓
肿和肝脏恶性肿瘤等相鉴别（参见附录D）。
附 录 A
（资料性附录）
病原学
A.1 虫种
片形吸虫属于复殖目片形科的片形属。其成虫主要寄生于牛、羊等反刍动物的胆管内，也可寄生于
人体的胆管内。感染人体的片形吸虫主要为肝片形吸虫和巨片形吸虫(兽医将巨片形吸虫称为大片形吸虫)。
A.2 形态
A.2.1 成虫
肝片形吸虫和巨片形吸虫的形态极为相似。成虫背腹扁平，呈叶片状，红褐色，雌雄同体，被覆皮
棘。虫体前端有一突出的圆锥状头锥，头锥后方变宽，或形成肩部。口吸盘位于头锥前端的亚腹面，腹
吸盘位于头锥基部稍后方。在口、腹吸盘之间有生殖孔。消化系统由咽、食道和两肠支组成，两侧的肠
支一直延伸至虫体后端，并向内外两侧发出分支。生殖系统中，睾丸两个，呈高度分支，前后排列于虫
体的中部。卵巢一个，较小，呈鹿角状，位于腹吸盘右后方，前睾丸的前方。子宫较短，盘曲在卵巢与
腹吸盘之间，其内充满虫卵，开口于生殖孔。卵黄腺分布在虫体两侧，自头锥基部直达虫体后端。肝片
形吸虫与巨片形吸虫的成虫形态主要鉴别要点见表A.1。
A.2.2 虫卵
虫卵呈长椭圆形，淡黄褐色，卵的一端有一小盖。卵壳薄，分两层。卵内充满多个卵黄细胞，和一
个不易被查见的卵细胞。肝片形吸虫的虫卵大小为(130～150)µm×(63～90)µm，平均为143µm×86µm；
巨片形吸虫为(144～208)µm×(70～109)µm，平均为164µm×92µm。
A.3 生活史
片形吸虫的终宿主主要为牛、羊等反刍动物，人因生食水生植物、饮用生水等吞入囊蚴而感染。其
成虫寄生于终宿主的胆管内，产出的虫卵随胆汁进入肠道，混入粪便排出体外，在适宜温度的水中发育
并孵化出毛蚴，毛蚴侵入中间宿主（小土蜗等椎实螺科淡水螺）体内，经胞蚴、母雷蚴和子雷蚴等阶段
的发育和无性增殖后，进一步发育至尾蚴。成熟尾蚴逸出螺体，在水生植物或水面上形成囊蚴。终宿主
因误食活的囊蚴而导致感染。童虫在小肠内自囊蚴逸出，穿过肠壁，在腹腔内移行，最终穿越肝脏实质
进入胆管并发育成为成虫。自吞食囊蚴到粪便中找到虫卵的最短时间约10周～11周。成虫寿命一般为4
年～5年，有报道在人体内寄生可长达12年。
附 录 B
（资料性附录）
流行病学与临床表现
B.1 流行病学
片形吸虫呈世界性分布，在全球五大洲51个国家均有人体感染病例报道。估计全球至少有240万人
感染片形吸虫，受感染威胁者达9110万人。我国第一次人体寄生虫分布调查，推算全国感染人数为12
万人。目前，我国福建、江西、湖北、内蒙古、广西、云南等21个省（直辖市、自治区）有片形吸虫病例报道。
B.2 临床表现
B.2.1 急性片形吸虫病
发生在感染后2周～12周，由片形吸虫童虫在腹腔和肝脏实质中移行所致，病程进展相对较慢。表
现为：发热、腹痛、乏力，或伴有厌食、呕吐、腹胀、腹泻等症状；肝脏肿大、肝区叩痛等体征，部分
患者出现腹水、贫血等体征。外周血嗜酸性粒细胞的百分比和/或绝对值增高。
B.2.2 慢性片形吸虫病
发生在急性期后，由成虫对胆管的机械性损伤及其代谢产物的刺激作用所引起的胆管上皮增生、胆
管及胆囊炎症、胆管纤维化、扩张及阻塞等病变。表现为：腹痛、乏力、贫血、纳差、厌油腻、黄疸、
肝脏肿大等，临床表现轻重不一。外周血嗜酸性粒细胞的百分比和/或绝对值增高。
B.2.3 异位损害
童虫在腹腔移行过程中，虫体可穿入或被血流带至肝脏以外的脏器和组织而引起异位损害，如皮下
组织、腹壁肌肉、腹膜、肺、眼、脑及膀胱等部位的异位寄生，以皮下组织较多见。异位损害的临床表
现较为复杂多变，一般通过手术确诊。
附 录 C
（规范性附录）
实验室检查
C.1 粪便检查
C.1.1 水洗沉淀法（或称重力沉淀法）
取粪便20g～30g置于烧杯内，加入10～12倍体积的水，充分搅匀成粪浆。经250µm～425µm孔径（40
目～60目）的网筛过滤于500mL的锥形量杯内，加水淋洗网筛中的粪渣，直到量杯内粪液至500mL。静置
30min后，倾去上层液，再加水至500mL，静置15min～20min，如此重复3～5次，直到上层液变清为止。
最后弃尽上层液，取沉渣涂片镜检片形吸虫虫卵。
C.1.2 尼龙绢袋集卵法
取粪便20g～30g，置于250µm～425µm孔径（40目～60目）的网筛中，下接55µm孔径（260目）的尼
龙绢袋，用铁夹夹住袋的下口。淋水，搅碎粪便，使粪液滤入尼龙绢袋中。然后移去网筛，继续淋水冲
洗袋内粪浆，并用竹筷在袋外轻轻刮动助滤，直到滤出液变清。取下铁夹，取沉渣涂片镜检片形吸虫虫卵。
C.2 十二指肠引流液检查
用十二指肠引流管抽取十二指肠引流液及胆汁，以直接涂片法镜检片形吸虫虫卵。为提高镜检效果，
可将引流液加生理盐水稀释搅拌后，分装于离心管内，以1500g离心5min～10min，吸取沉渣涂片镜检。
C.3 病理切片检查
所取组织的病理切片通过显微镜检查发现片形吸虫虫体剖面的显微结构可作为诊断依据，但不推荐
用于对疑似病例的进一步检查确诊。
C.4 酶联免疫吸附试验（ELISA）
C.4.1 抗原制备
收集牛、羊肝胆管内寄生的鲜活的片形吸虫成虫，用0.01mol/L pH7.4磷酸盐缓冲生理盐水（PBS）
冲洗干净后，加入PBS常温培养3h～6h。培养液经3000g，4℃离心10 min，除去沉淀（虫卵等），所得
上清液即为片形吸虫的排泄分泌抗原，用考马斯亮蓝法测量蛋白浓度。
C.4.2 试剂
酶标记结合物：抗人IgG辣根过氧化物酶标记结合物；抗原包被稀释液：0.05mol/L pH9.6碳酸盐缓
冲液；封闭液：含1%牛血清白蛋白的抗原包被稀释液；洗涤液：含0.05% 吐温-20的0.01mol/L pH7.4
磷酸盐缓冲生理盐水；稀释液：含1%牛血清白蛋白的洗涤液；底物溶液：3,3’,5,5’-四甲基联苯胺（TMB）
底物溶液（配方见C.4.3）；终止液：2mol/L 硫酸溶液。
C.4.3 TMB底物溶液配方
底物显色A液：醋酸钠13.6g，柠檬酸1.6g，30%双氧水0.3mL，蒸馏水加至500mL。底物显色B液：乙
二胺四乙酸二钠0.2g，柠檬酸0.95g，甘油 50mL，TMB溶液20mL（称取TMB 0.2g，溶解至二甲基亚砜20mL
中），蒸馏水加至500ml。底物显色B液应避光保存。使用前根据需要量取等量A、B液混匀后使用。或可
购市售的TMB显色液直接使用。
C.4.4 操作步骤
抗原经包被稀释液稀释至5µg/mL～20µg/mL，在96孔聚苯乙烯板中，每孔中加入100µL，4℃过夜。
次日弃去孔内溶液，甩干。加入封闭液200µL/孔，37℃孵育1h。弃去封闭液，用洗涤液洗涤3次，每次
5min，甩干。受检者血清或参考血清（每批设阴性、阳性及空白对照各2个，每份受检样品设复孔检测）
用稀释液作1:200～1：400稀释，每孔加入100µL，37℃孵育1h。倾去血清样品，洗涤同前。加入酶标
记结合物100µL/孔（用稀释液按推荐浓度稀释），37℃孵育1h。倾去酶标记结合物，洗涤4次，每次5min，
甩干。加入TMB底物溶液100µL/孔，常温避光放置5min。加入终止液50µL/孔。以空白对照孔调零，用
酶标仪测定各孔450nm波长光密度吸收（OD）值。
C.4.5 结果判定
以受检样品平均OD值/阴性参考值（P/N）≥2.1判为阳性。
附 录 D
（资料性附录）
鉴别诊断
D.1 华支睾吸虫病
因生食含有华支睾吸虫囊蚴的淡水鱼、虾而导致感染，是一种较为常见的食源性寄生虫病，成虫寄
生于宿主的肝胆管内，临床表现与片形吸虫病相似，但大多数患者症状较轻。粪检可查出华支睾吸虫虫
卵，大小为(27～35)µm×(10～20)µm。
D.2 肝型并殖吸虫病
人因生食或半生食含有并殖吸虫囊蚴的淡水蟹、蝲蛄而导致感染，引起肝脏损伤的一种肺外型并殖
吸虫病，主要表现为肝脏肿大、肝区疼痛、肝功能异常。并殖吸虫特异性抗体的血清免疫学检测阳性。
D.3 肝毛细线虫病
肝毛细线虫是鼠类和多种哺乳动物的寄生虫，成虫寄生于肝脏，偶尔感染人，引起肝毛细线虫病。
人因食入感染期卵污染的食物或水而感染。临床表现有发热、肝脾肿大、嗜酸性粒细胞显著增多等。通
过肝组织活检病原体确诊。
D.4 病毒性肝炎
急性肝炎和慢性肝炎等患者的肝功能常有明显异常，病毒性肝......
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