路径: 主页 > GB > 第138页 > GB 26400-2011 | 标准编号 | GB 26400-2011 (GB26400-2011) | | 中文名称 | 食品安全国家标准 食品添加剂 二十二碳六烯酸油脂(发酵法) | | 英文名称 | National food safety standards of food additives docosahexaenoic acid grease (fermentation) | | 行业 | 国家标准 | | 中标分类 | C54 | | 国际标准分类 | 67.220.20 | | 字数估计 | 10,120 | | 发布日期 | 2011-03-15 | | 实施日期 | 2011-05-15 | | 标准依据 | 卫生部公告2011年第7号 | | 发布机构 | 中华人民共和国卫生部 | | 范围 | 本标准适用于利用裂壶藻(Schizochytrium sp.)或者吾肯氏壶藻(Ulkenia amoeboida)或者寇氏隐甲藻(Crypthecodinium cohnii）菌种, 经生物发酵制得的二十二碳六烯酸(DHA)油脂。 | GB 26400-2011
National food safety standards of food additives docosahexaenoic acid grease (fermentation)
中华人民共和国国家标准
食品安全国家标准
食品添加剂
二十二碳六烯酸油脂(发酵法)
2011-03-15发布
2011-05-15实施
中华人民共和国卫生部 发 布
食品安全国家标准
食品添加剂
二十二碳六烯酸油脂(发酵法)
1 范围
2 结构式和相对分子质量
2.1 结构式
2.2 相对分子质量
328.5(按2007年国际相对原子质量)
3 技术要求
3.1 感官要求:应符合表1的规定。
表1 感官要求
项 目 要 求 检验方法
色泽 浅黄色至橙黄色
气味 具有本产品特有的气味
组织状态 油状液体
取试样10mL,置于试管中,于自然光线下采用目
测的方法观察其色泽及外观形态,采用鼻嗅的方法检
查气味
3.2 理化指标:应符合表2的规定。
表2 理化指标
项 目 指标 检验方法
含量(以C22H32O2甘油三酯计),w/% ≥ 35.0 附录A中A.3
不皂化物,w/% ≤ 4.0 GB/T 5535.1乙醚提取法
水分,w/% ≤ 0.1 GB 5009.3减压干燥法
不溶性杂质,w/% ≤ 0.2 GB/T 15688
溶剂残留/(mg/kg) ≤ 1.0 GB/T 5009.37
酸价(以KOH 计)/(mg/g) ≤ 1.0 GB/T 5009.37
过氧化值/(meq/kg) ≤ 5.0 GB/T 5009.37滴定法
反式脂肪酸,w/% ≤ 1.0 GB 5413.36
黄曲霉毒素B1/(μg/kg) ≤ 5.0 GB/T 5009.22
总砷(以As计)/(mg/kg) ≤ 0.1 GB/T 5009.11氢化物原子荧光光度法
铅(Pb)/(mg/kg) ≤ 0.1 GB 5009.12石墨炉原子吸收光谱法
4 其他要求
产品应装于适宜的避光容器中充氮或真空保存,产品的最佳保存温度为-5℃以下。
附 录 A
检 验 方 法
A.1 安全要求
本检验方法中使用的部分试剂具有毒性和腐蚀性,操作时须小心谨慎。如溅到皮肤上应立即用水
冲洗,严重者应立即治疗。使用易燃品时,严禁使用明火加热。
A.2 一般规定
除另有说明外,所用试剂均为分析纯,检验用水符合GB/T 6682-2008中规定的三级水。检验中
所用标准滴定溶液、杂质测定用标准溶液、制剂及制品,在没有注明其他要求时,均按 GB/T 601、
GB/T 602和GB/T 603的规定制备。
A.3 二十二碳六烯酸(DHA)甘油三酯的测定
A.3.1 试剂和材料
A.3.1.1 二十二碳六烯酸(DHA)甘油三酯标准品:纯度≥99%。
A.3.1.2 十三碳烷酸甘油三酯标准品:纯度≥99%。
A.3.1.3 氢氧化钾。
A.3.1.4 无水甲醇。
A.3.1.5 正庚烷,色谱纯。
A.3.1.6 石油醚,沸程,30℃~60℃。
A.3.1.7 氢氧化钾甲醇溶液(4mol/L):称取22.4g氢氧化钾(A.3.1.3)于烧杯中,加入适量无水甲
醇(A.3.1.4)使溶解,并转移至100mL的容量瓶中,当氢氧化钾甲醇溶液冷却至室温后,用无水甲醇稀
释至刻度,摇匀。
A.3.1.8 二十二碳六烯酸(DHA)甘油三酯储备液(10mg/mL):称取250mg(精确至0.0001g)二十
二碳六烯酸(DHA)甘油三酯(A.3.1.1)于25mL容量瓶中,加入适量正庚烷(A.3.1.5)使溶解,并稀
释至刻度,摇匀。
A.3.1.9 十三碳烷酸甘油三酯内标储备液(10mg/mL):称取0.25g(精确至0.0001g)十三碳烷酸
甘油三酯(A.3.1.2)于25mL容量瓶中,加入适量正庚烷(A.3.1.5)使溶解,并稀释至刻度,摇匀。
A.3.1.10 标准工作溶液的配制:按表 A.1分别移取适量二十二碳六烯酸(DHA)甘油三酯储备液
(A.3.1.8)于6个10mL容量瓶中,分别移入2.0mL十三碳烷酸甘油三酯内标储备液(A.3.1.9),加
入正庚烷(A.3.1.5)稀释至刻度,摇匀。
表A.1 标准工作溶液中二十二碳六烯酸(DHA)甘油三酯含量
编号
加入二十二碳六烯酸(DHA)甘油三酯储备液的体积
mL
标准工作溶液中二十二碳六烯酸(DHA)甘油三酯的浓度
mg/mL
1 0 0
2 0.1 0.1
3 0.5 0.5
4 1.0 1.0
5 2.0 2.0
6 3.0 3.0
A.3.1.11 氮气,纯度≥99.999%。
A.3.1.12 氦气,纯度≥99.9999%。
A.3.2 仪器和设备
A.3.2.1 气相色谱-质谱仪。
A.3.2.2 气相色谱仪,配氢火焰离子化检测器。
A.3.2.3 分析天平:感量为0.01g、0.1mg。
A.3.2.4 离心机。
A.3.2.5 振摇器。
A.3.3 定性分析
A.3.3.1 二十二碳六烯酸(DHA)油脂
称取0.25g(精确至0.01g)试样于50mL容量瓶中,加入适量正庚烷(A.3.1.5)使溶解,并稀释至
刻度,摇匀。准确吸取2mL正庚烷溶解液于10mL带盖离心管中,加入0.2mL氢氧化钾甲醇溶液
(A.3.1.7),剧烈振荡1min以上,放置10min(甲基化反应)。如有机层浑浊,可离心使之澄清。取上
层有机相溶液备用。
A.3.3.2 测定
A.3.3.2.1 气相色谱条件
a) 色谱柱:DB-5ms(30.0m×0.25mm×0.25μm)石英毛细管柱,或相当者;
b) 柱温程序:100℃保持3min,以10℃/min升至260℃,保持8min;
c) 载气:氦气(A.3.1.12);
d) 流速:1.0mL/min;
e) 进样口温度:250℃;
f) 进样模式:分流进样(分流比为1∶10);
g) 进样量:1μL。
A.3.3.2.2 质谱条件
a) 离子源:EI源,70eV;
b) 接口温度:280℃;
c) 离子源温度:230℃;
d) 四极杆温度:150℃;
e) 数据采集模式:全扫描;
f) 质量扫描范围:20m/z~330m/z;
g) 溶剂延迟3.5min。
A.3.3.3 结果判定
试样的质谱图应与二十二碳六烯酸(DHA)甲酯标准品的质谱图(附录B中图B.1)一致。
A.3.4 定量分析
A.3.4.1 原理
试样中二十二碳六烯酸(DHA)在氢氧化钾甲醇作用下,生成二十二碳六烯酸(DHA)甲酯,用配有
氢火焰离子化检测器的气相色谱仪进行测定,以内标法定量,结果以二十二碳六烯酸(DHA)甘油三
酯计。
A.3.4.2 试液的制备
A.3.4.2.1 二十二碳六烯酸(DHA)油脂试样溶液的制备
称取0.04g试样(精确至0.0001g)于10mL容量瓶中,加入2.0mL十三碳烷酸甘油三酯内标储
备液(A.3.1.9),以下按A.3.3.1“加入适量正庚烷(A.3.1.5)取上层有机相溶液备用”操作。每份
试液至少做两个平行样。
A.3.4.2.2 空白溶液的制备
除不加试样外按A.3.4.2.1所述方法进行处理。
A.3.4.3 标准工作溶液甲酯化处理
分别准确吸取A.3.1.10中系列标准工作溶液2mL于10mL带盖离心管中,以下按A.3.3.1自
“加入0.2mL氢氧化钾甲醇溶液(A.3.1.7)取上层有机相溶液备用”操作。
A.3.4.4 测定
A.3.4.4.1 气相色谱条件
a) 色谱柱:DB-23(30.0m×0.25mm×0.25μm)石英毛细管柱,或相当者;
b) 柱温程序:90℃保持5min,9℃/min升至240℃,保持5min,3℃/min升至250℃;
c) 载气:氮气(A.3.1.11);
d) 流速:1.33mL/min;
e) 进样口温度:250℃;
f) 进样模式:分流进样(分流比为1∶100);
g) 检测器温度:300℃;
h) 进样量:1μL。
A.3.4.4.2 标准曲线的绘制
按A.3.4.4.1所列测定条件,将甲酯化后的标准工作溶液依次进样,测量二十二碳六烯酸(DHA)
甲酯和十三碳烷酸甲酯的峰面积。二十二碳六烯酸(DHA)甲酯的峰面积与标准工作溶液中二十二碳
六烯酸(DHA)甘油三酯的浓度成正比。以标准工作溶液中二十二碳六烯酸(DHA)甘油三酯的浓度
(mg/mL)为横坐标,以二十二碳六烯酸(DHA)甲酯与十三碳烷酸甲酯的峰面积比为纵坐标,绘制标准
曲线。二十二碳六烯酸(DHA)甲酯和十三碳烷酸甲酯的色谱图参见附录C中图C.1。
按公式(A.1)计算回归参数:
y=(a×x)+b (A.1)
式中:
y---二十二碳六烯酸(DHA)甲酯与十三碳烷酸甲酯的峰面积比;
a---回归曲线的斜率;
x---标准工作溶液中二十二碳六烯酸(DHA)甘油三酯的浓度,单位为毫克每毫升(mg/mL);
b---回归曲线的截距。
A.3.4.4.3 试液的测定
将空白溶液(A.3.4.2.2)和试样溶液(A.3.4.2.1)依次进样,扣除空白值,获得二十二碳六烯酸
(DHA)甲酯与十三碳烷酸甲酯的峰面积比。
A.3.4.5 结果计算
试样中二十二碳六烯酸(DHA)甘油三酯的含量X1 按公式(A.2)计算:
X1=y-ba ×V×
m×100%
(A.2)
式中:
X1---试样中二十二碳六烯酸(DHA)甘油三酯含量,%;
y ---试液甲酯化后二十二碳六烯酸(DHA......
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