路径: 主页 > GB > 第142页 > GB 29709-2013 | 标准编号 | GB 29709-2013 (GB29709-2013) | | 中文名称 | 食品安全国家标准 动物性食品中氮哌酮及代谢物多残留的测定 高效液相色谱法 | | 英文名称 | Determination of Azaperone and metabolite in animal derived food by High Performance Liquid Chromatographic method | | 行业 | 国家标准 | | 中标分类 | C53 | | 国际标准分类 | 67.020 | | 字数估计 | 9,976 | | 引用标准 | GB/T 6682; GB/T 1.1-2000 | | 采用标准 | GB/T 6682; GB/T 1.1-2000 | | 标准依据 | 农业部公告第1927号 | | 发布机构 | 中华人民共和国农业部、中华人民共和国国家卫生和计划生育委员会 | | 范围 | 本标准规定了动物性食品中氮哌酮及代谢物氮哌醇残留量检测的制样和高效液相色谱测定方法。本标准适用于猪的肌肉、皮+脂、肝脏和肾脏组织中氮哌酮及代谢物氮哌醇残留量的检测。 | GB 29709-2013: 食品安全国家标准 动物性食品中氮哌酮及代谢物多残留的测定 高效液相色谱法
GB 29709-2013 英文名称: Determination of Azaperone and metabolite in animal derived food by High Performance Liquid Chromatographic method
中华人民共和国国家标准
食品安全国家标准
动物性食品中氮哌酮及代谢物
多残留的测定 高效液相色谱法
2013-09-16发布
2014-01-01实施
中 华 人 民 共 和 国 农 业 部
中华人民共和国国家卫生和计划生育委员会发布
食品安全国家标准
动物性食品中氮哌酮及代谢物
多残留的测定 高效液相色谱法
1 范围
本标准规定了动物性食品中氮哌酮及代谢物氮哌醇残留量检测的制样和高效液相色谱测定方法。
本标准适用于猪的肌肉、皮+脂、肝脏和肾脏组织中氮哌酮及代谢物氮哌醇残留量的检测。
2 规范性引用文件
下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件,仅注日期的版本适用于本文
件。凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。
GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法。
3 原理
试料中残留的氮哌酮及代谢物,用乙腈萃取,正己烷除脂,MCX柱净化,高效液相色谱测定,外标
法定量。
4 试剂和材料
以下所用试剂,除特别注明者外均为分析纯;水为符合GB/T 6682规定的一级水。
4.1 氮哌酮、氮哌醇标准品:含量≥98%。
4.2 乙腈:色谱纯。
4.3 正己烷。
4.4 浓氨水。
4.5 甲醇。
4.6 乙酸铵。
4.7 甲酸。
4.8 MCX固相萃取柱:60mg/3mL,或相当者。
4.9 2%的甲酸水溶液:取甲酸2mL,用水溶解并稀释至100mL。
4.10 5%的氨化甲醇:取氨水5mL,用甲醇溶解并稀释至100mL。
4.11 5mmol/L乙酸铵溶液:取乙酸铵0.385g,用水溶解并稀释至1000mL,滤膜过滤。
4.12 1mg/mL标准贮备液:精密称取氮哌酮和氮哌醇标准品各10mg,分别于10mL量瓶中,用甲醇
溶解并稀释至刻度,配成浓度为1mg/mL的标准贮备液。-20℃以下避光保存,有效期3个月。
4.13 1μg/mL混合标准工作液:分别精密量取1mg/mL氮哌酮标准贮备液和氮哌醇标准贮备液各
0.1mL,于100mL量瓶中,用甲醇稀释至刻度,配制成浓度为1μg/mL的混合标准工作液。-20℃以
下避光保存,有效期3个月。
5 仪器和设备
5.1 高效液相色谱仪:配紫外检测器。
5.2 分析天平:感量0.00001g。
5.3 天平:感量0.01g。
5.4 冷冻高速离心机。
5.5 氮气吹干装置。
5.6 旋涡混合器。
5.7 固相萃取装置。
5.8 超声波清洗机。
5.9 均质机。
5.10 离心管。
5.11 滤膜:0.22μm。
6 试料的制备与保存
6.1 试料的制备
取新鲜或冷冻空白组织、供试组织,去除筋膜,绞碎,并使均质。
---取均质后的供试样品,作为供试试料。
---取均质后的空白样品,作为空白试料。
---取均质后的空白样品,添加适宜浓度的标准工作液,作为空白添加试料。
6.2 样品的保存
-20℃以下保存。
7 测定步骤
7.1 提取
称取试料5g±0.05g,于离心管中,加乙腈10mL,旋涡混合1min,超声2min,5000r/min离心
5min,取上清液,残渣中加乙腈10mL重复提取一次,合并两次上清液。于40℃水浴旋转蒸干。用
2%甲酸水溶液5mL溶解残余物,加正己烷4mL,混匀,5000r/min离心5min,弃正己烷层液,备用。
7.2 净化
MCX柱依次用甲醇3mL、水3mL和2%甲酸水溶液3mL活化,取备用液过柱,控制流速小于
1mL/min,用2%甲酸水3mL和甲醇3mL淋洗,抽干,用5%氨化甲醇4mL洗脱。收集洗脱液,于
40℃氮气吹干,用流动相1.0mL溶解残余物,旋涡混匀,供高效液相色谱法测定。
7.3 标准曲线的制备
精密量取1μg/mL混合标准工作液适量,用甲醇稀释,配制成浓度为10、20、50、100、200、500和
1000μg/L的系列混合标准溶液。每个浓度重复3次,供高效液相色谱测定,以测得峰面积平均值为纵
坐标,对应的标准溶液浓度为横坐标,绘制标准曲线。求回归方程和相关系数。
7.4 测定
7.4.1 色谱条件
7.4.1.1 色谱柱:C18(250mm×4.6mm,粒径5μm),或相当者。
7.4.1.2 流动相:乙腈+5mmol/L乙酸铵溶液(50+50,体积比)。
7.4.1.3 流速:1mL/min。
7.4.1.4 紫外检测波长:250nm。
7.4.1.5 柱温:40℃。
7.4.1.6 进样量:50μL。
7.4.2 测定法
取试样溶液和相应的标准溶液,作单点或多点校准,按外标法,以峰面积计算。标准溶液及试样溶
液中氮哌酮和氮哌醇响应值应在仪器检测的线性范围之内。在上述色谱条件下,标准溶液和空白添加
试样溶液的高效液相色谱图见附录A。
7.5 空白试验
除不加试料外,采用完全相同的步骤进行平行操作。
8 结果计算与表述
试料中氮哌酮和氮哌醇残留量(μg/kg)按式(1)~式(3)计算:
单点校准:
c=
cSA
AS
(1)
或标准曲线校准:由AS=acS+b求得a和b,则
c=
A-b
(2)
X=
cV
(3)
式中:
c ---供试试料溶液中相应的氮哌酮及代谢物的浓度,单位为微克每升(μg/L);
cS ---标准工作液中相应的氮哌酮及代谢物的浓度,单位为微克每升(μg/L);
A ---试样中相应的氮哌酮及代谢物峰的面积;
AS---标准工作液中相应的氮哌酮及代谢物峰的面积;
X ---供试试料中相应的氮哌酮及代谢物残留量,单位为微克每千克(μg/kg);
V ---溶解残余物所用流动相体积,单位为毫升(mL);
m ---供试试料质量,单位为克(g)。
注:计算结果需扣除空白值,测定结果用平行测定的算术平均值表示,保留三位有效数字。
9 检测方法灵敏度、准确度和精密度
9.1 灵敏度
本方法的检测限为2μg/kg,定量限为5μg/kg。
9.2 准确度
本方法在肌肉、皮+脂组织5μg/kg......
|