路径: 主页 > GB > 第29页 > GB 31658.3-2021 | 标准编号 | GB 31658.3-2021 (GB31658.3-2021) | | 中文名称 | | | 英文名称 | National food safety standard - Determination of baclofen residue in swine urine by liquid chromatography-tandem mass spectrometry method | | 行业 | 国家标准 | | 中标分类 | X04 | | 字数估计 | 7,786 | | 发布机构 | 中华人民共和国国家卫生健康委员会、国家市场监督管理总局 | GB 31658.3-2021: 食品安全国家标准 猪尿中巴氯酚残留量的测定 液相色谱-串联质谱法
食品安全国家标准
猪尿中巴氯芬残留量的测定
液相色谱-串联质谱法
中华人民共和国国家标准
中华人民共和国国家卫生健康委员会发布
国 家 市 场 监 督 管 理 总 局
中华人民共和国农业农村部
前言
本文件按照GB/T １１-２０２０«标准化工作导则 第１部分:标准化文件的结构和起草规则»的规定
起草.
本文件系首次发布.
食品安全国家标准
猪尿中巴氯芬残留量的测定 液相色谱Ｇ串联质谱法
１ 范围
本文件规定了猪尿中巴氯芬残留量测定的制样和液相色谱Ｇ串联质谱测定方法.
本文件适用于猪尿中巴氯芬残留量的检测.
２ 规范性引用文件
下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款.其中,注日期的引用文件,
仅该日期对应的版本适用于本文件;不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本
文件.
GB/T ６６８２ 分析实验室用水规格和试验方法
３ 术语和定义
本文件没有需要界定的术语和定义.
４ 原理
试料中残留的巴氯芬,经酸化、提取,固相萃取柱净化,液相色谱Ｇ串联质谱法测定,内标法定量.
５ 试剂和材料
除另有规定外,所有试剂均为分析纯,水为符合GB/T ６６８２规定的一级水.
５１ 试剂
５１１ 乙腈(CH３CN):色谱纯.
５１２ 甲醇(CH３OH):色谱纯.
５１３ 甲酸(HCOOH):色谱纯.
５１４ 盐酸(HCl).
５１５ 氨水(NH３H２O).
５１６ 氢氧化钠(NaOH).
５２ 溶液配制
５２１ １０％盐酸溶液:取盐酸１０mL,用水稀释至１００mL.
５２２ ０１％甲酸溶液:取甲酸０５mL,用水稀释至５００mL.
５２３ ０２％甲酸溶液:取甲酸０２mL,用水稀释至１００mL.
５２４ ０２％甲酸Ｇ乙腈溶液:取０２％甲酸溶液８０mL,加乙腈稀释成１００mL.
５２５ ５％氨水甲醇溶液:取氨水５mL,用甲醇稀释至１００mL.
５２６ １mol/L氢氧化钠溶液:取氢氧化钠４g,用水溶解并稀释至１００mL.
５３ 标准品
５３１ 巴氯芬(Baclofen,C１０H１２ClNO２,CAS号:１１３４Ｇ４７Ｇ０)含量≥９９０％.
５３２ 巴氯芬ＧD４:含量≥９９０％.
５４ 标准溶液制备
５４１ 巴氯芬标准储备液:取巴氯芬标准品约１０mg,精密称定,加１mol/L氢氧化钠溶液１mL使溶
GB ３１６５８３-２０２１
解,用甲醇稀释定容至１０mL容量瓶,配成浓度为１mg/mL的巴氯芬标准储备液.４℃以下保存,有效
期４个月.
５４２ 巴氯芬标准中间液(１０μg/mL):精密量取巴氯芬标准储备液１００μL,于１０mL容量瓶,用甲醇稀
释至刻度,配制成浓度为１０μg/mL的巴氯芬标准中间液.４℃以下保存,有效期１个月.
５４３ 巴氯芬标准工作液(１μg/mL):精密量取巴氯芬标准中间液１mL,用甲醇稀释定容至１０mL容量
瓶,配制成浓度为１μg/mL的巴氯芬标准工作液.现配现用.
５４４ 巴氯芬ＧD４储备液(１mg/mL):取巴氯芬ＧD４对照品约１０mg,精密称定,加１mol/L氢氧化钠溶液
１mL使溶解,用甲醇稀释定容至１０mL容量瓶刻度,配成浓度为１mg/mL的巴氯芬ＧD４储备液.４℃以
下保存,有效期４个月.
５４５ 巴氯芬ＧD４中间液(１０μg/mL):精密量取巴氯芬ＧD４储备液１００μL,于１０mL容量瓶中,用甲醇稀
释制成浓度为１０μg/mL的巴氯芬ＧD４中间液.４℃以下保存,有效期１个月.
５４６ 巴氯芬ＧD４工作液(１μg/mL):精密量取巴氯芬ＧD４中间液１mL,置于１０mL容量瓶中,用甲醇稀
释制成浓度为１μg/mL的巴氯芬ＧD４工作液.现配现用.
５４７ 混合标准工作液:分别精密量取巴氯芬标准工作液和巴氯芬ＧD４工作液适量,用０２％甲酸Ｇ乙腈溶
液配制成含巴氯芬ＧD４１０ng/mL,含巴氯芬分别为１０ng/mL、２０ng/mL、５０ng/mL、１００ng/mL、
２５０ng/mL和５００ng/mL的系列混合标准工作液.现配现用.
５５ 材料
混合型强阳离子固相萃取柱,６０mg/３mL,或相当者.
６ 仪器和设备
６１ 液相色谱Ｇ串联质谱仪:配有电喷雾电离源.
６２ 分析天平:感量０００００１g和００１g.
６３ 离心机:８０００r/min.
６４ 涡旋振荡器.
６５ 固相萃取装置.
６６ 氮吹仪.
６７ pH计.
６８ 离心管:５０mL.
６９ 滤膜:０２２μm,水相.
７ 试料的制备与保存
７１ 试料的制备
取适量新鲜或解冻的空白或供试样品,使用前恢复室温,混匀,如有混浊,离心后取上清液备用.
a) 取备用的供试样品,作为供试材料;
b) 取备用的空白样品,作为空白材料;
c) 取备用的空白样品,添加适宜浓度的标准工作液,作为空白添加试料.
７２ 试料的保存
供试样品或空白样品应尽快置于-１８℃以下冷冻保存.
８ 测定步骤
８１ 提取
取试料２０mL,于５０mL离心管中,加巴氯芬ＧD４工作液１０μL,用１０％盐酸溶液调节pH至２０,涡
旋混匀,８０００r/min离心５min,备用.
８２ 净化
取固相萃取柱,依次用甲醇３mL、水３mL活化.备用液全部过柱,用水３mL、甲醇３mL依次淋洗,
抽干２min,用５％氨水甲醇溶液６mL洗脱,收集洗脱液,于５０℃水浴氮气吹干,用０２％甲酸Ｇ乙腈溶液
１０mL溶解,滤膜过滤,液相色谱Ｇ串联质谱测定.
８３ 标准曲线的制备
取１０ng/mL、２０ng/mL、５０ng/mL、１００ng/mL、２５０ng/mL和５００ng/mL的系列混合标准
工作液,供液相色谱法Ｇ串联质谱法测定.以测得特征离子质量色谱峰峰面积比为纵坐标,对应的标准溶
液浓度为横坐标,绘制标准曲线,求回归方程和相关系数.
８４ 测定
８４１ 色谱条件
a) 色谱柱:C１８(１００mm×３０mm,１８μm),或相当者;
b) 柱温:３５℃;
c) 进样量:１０μL;
d) 流动相:A为甲醇,B为０１％甲酸溶液,梯度洗脱条件见表１;
e) 流速:０２５mL/min.
８４２ 质谱条件
a) 电离模式:电喷雾正离子源;
b) 检测方式:多反应监测(MRM);
c) 离子源温度:１５０℃;
d) 毛细管电压:３０kV;
e) 脱溶剂温度:５００℃;
f) 定性离子对、定量离子对及对应的锥孔电压和碰撞能量见表２.
８４３ 测定法
取试料溶液和标准溶液,作单点或多点校准,按内标法以色谱峰面积定量.标准溶液及试样溶液中巴
氯芬及巴氯芬ＧD４ 的响应值均应在仪器检测的线性范围内.试样液中巴氯芬的保留时间与标准工作液中
巴氯芬的保留时间偏差在±２５％以内,且检测到的相对离子丰度,应当与浓度相当的标准溶液相对丰度
一致,其允许偏差应符合表３要求.在上述色谱Ｇ质谱条件下,巴氯芬及巴氯芬ＧD４ 标准溶液特征离子质量
色谱图见附录A.
８５ 空白试验
取空白试料,除不加标准溶液外......
|