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GB 5009.28-2016 English:
GB 5009.28-2016 GB 5009.28-2016: 食品安全国家标准 食品中苯甲酸、山梨酸和糖精钠的测定
GB 5009.28-2016 英文名称: National Food Safety Standard -- Determination of Benzoic Acid, Sorbic Acid and Saccharin Sodium in Foods
中华人民共和国国家标准
食品安全国家标准
1 范围
本标准规定了食品中苯甲酸、山梨酸和糖精钠测定的方法。
本标准第一法适用于食品中苯甲酸、山梨酸和糖精钠的测定;第二法适用于酱油、水果汁、果酱中苯甲酸、山梨酸的测定。
第一法 液相色谱法
5 分析步骤
5.1 试样制备
取多个预包装的饮料、液态奶等均匀样品直接混合;非均匀的液态、半固态样品用组织匀浆机匀浆;
固体样品用研磨机充分粉碎并搅拌均匀;奶酪、黄油、巧克力等采用50℃~60℃加热熔融,并趁热充分
搅拌均匀。取其中的200g装入玻璃容器中,密封,液体试样于4℃保存,其他试样于-18℃保存。
5.2 试样提取
5.2.1 一般性试样
准确称取约2g(精确到0.001g)试样于50mL具塞离心管中,加水约25mL,涡旋混匀,于50℃水
浴超声20min,冷却至室温后加亚铁氰化钾溶液2mL和乙酸锌溶液2mL,混匀,于8000r/min离心
5min,将水相转移至50mL容量瓶中,于残渣中加水20mL,涡旋混匀后超声5min,于8000r/min离
心5min,将水相转移到同一50mL容量瓶中,并用水定容至刻度,混匀。取适量上清液过0.22μm滤膜,待液相色谱测定。
注:碳酸饮料、果酒、果汁、蒸馏酒等测定时可以不加蛋白沉淀剂。
5.2.2 含胶基的果冻、糖果等试样
准确称取约2g(精确到0.001g)试样于50mL具塞离心管中,加水约25mL,涡旋混匀,于70℃水
浴加热溶解试样,于50℃水浴超声20min,之后的操作同5.2.1。
5.2.3 油脂、巧克力、奶油、油炸食品等高油脂试样
准确称取约2g(精确到0.001g)试样于50mL具塞离心管中,加正己烷10mL,于60℃水浴加热
约5min,并不时轻摇以溶解脂肪,然后加氨水溶液(1+99)25mL,乙醇1mL,涡旋混匀,于50℃水浴
超声20min,冷却至室温后,加亚铁氰化钾溶液2mL和乙酸锌溶液2mL,混匀,于8000r/min离心
5min,弃去有机相,水相转移至50mL容量瓶中,残渣同5.2.1再提取一次后测定。
5.3 仪器参考条件
5.3.1 色谱柱:C18柱,柱长250mm,内径4.6mm,粒径5μm,或等效色谱柱。
5.3.2 流动相:甲醇+乙酸铵溶液=5+95。
5.3.3 流速:1mL/min。
5.3.4 检测波长:230nm。
5.3.5 进样量:10μL。
注:当存在干扰峰或需要辅助定性时,可以采用加入甲酸的流动相来测定,如流动相:甲醇+甲酸-乙酸铵溶液=
8+92,参考色谱图见图A.2。
5.4 标准曲线的制作
将混合标准系列工作溶液分别注入液相色谱仪中,测定相应的峰面积,以混合标准系列工作溶液的
质量浓度为横坐标,以峰面积为纵坐标,绘制标准曲线。
5.5 试样溶液的测定
将试样溶液注入液相色谱仪中,得到峰面积,根据标准曲线得到待测液中苯甲酸、山梨酸和糖精钠
(以糖精计)的质量浓度。
7 精密度在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的10%。
8 其他按取样量2g,定容50mL时,苯甲酸、山梨酸和糖精钠(以糖精计)的检出限均为0.005g/kg,定量
限均为0.01g/kg。
第二法 气相色谱法
9 原理试样经盐酸酸化后,用乙醚提取苯甲酸、山梨酸,采用气相色谱-氢火焰离子化检测器进行分离测
定,外标法定量。
10 试剂和材料除非另有说明,本方法所用试剂均为分析纯,水为GB/T 6682规定的一级水。
10.1 试剂
10.1.1 乙醚(C2H5OC2H5)。
10.1.2 乙醇(C2H5OH)。
10.1.3 正己烷(C6H14)。
10.1.4 乙酸乙酯(CH3CO2C2H5):色谱纯。
10.1.5 盐酸(HCl)。
10.1.6 氯化钠(NaCl)。
10.1.7 无水硫酸钠(Na2SO4):500℃烘8h,于干燥器中冷却至室温后备用。
10.2 试剂配制
10.2.1 盐酸溶液(1+1):取50mL盐酸,边搅拌边慢慢加入到50mL水中,混匀。
10.2.2 氯化钠溶液(40g/L):称取40g氯化钠,用适量水溶解,加盐酸溶液2mL,加水定容到1L。
10.2.3 正己烷-乙酸乙酯混合溶液(1+1):取100mL正己烷和100mL乙酸乙酯,混匀。
10.3 标准品
10.3.1 苯甲酸(C6H5COOH,CAS号:65-85-0),纯度≥99.0%,或经国家认证并授予标准物质证书的标准物质。
10.3.2 山梨酸(C6H8O2,CAS号:110-44-1),纯度≥99.0%,或经国家认证并授予标准物质证书的标准物质。
10.4 标准溶液配制
10.4.1 苯甲酸、山梨酸标准储备溶液(1000mg/L):分别准确称取苯甲酸、山梨酸各0.1g(精确到
0.0001g),用甲醇溶解并分别定容至100mL。转移至密闭容器中,于-18℃贮存,保存期为6个月。
10.4.2 苯甲酸、山梨酸混合标准中间溶液(200mg/L):分别准确吸取苯甲酸、山梨酸标准储备溶液各
10.0mL于50mL容量瓶中,用乙酸乙酯定容。转移至密闭容器中,于-18℃贮存,保存期为3个月。
10.4.3 苯甲酸、山梨酸混合标准系列工作溶液:分别准确吸取苯甲酸、山梨酸混合标准中间溶液0mL、
0.05mL、0.25mL、0.50mL、1.00mL、2.50mL、5.00mL和10.0mL,用正己烷-乙酸乙酯混合溶剂(1+
1)定容至10mL,配制成质量浓度分别为0mg/L、1.00mg/L、5.00mg/L、10.0mg/L、20.0mg/L、
50.0mg/L、100mg/L和200mg/L的混合标准系列工作溶液。临用现配。
10.5 材料
塑料离心管:50mL。
11 仪器和设备
11.1 气相色谱仪:带氢火焰离子化检测器(FID)。
11.2 分析天平:感量为0.001g和0.0001g。
11.3 涡旋振荡器。
11.4 离心机:转速 >8000r/min。
11.5 匀浆机。
11.6 氮吹仪。
12 分析步骤
12.1 试样制备
取多个预包装的样品,其中均匀样品直接混合,非均匀样品用组织匀浆机充分搅拌均匀,取其中的
200g装入洁净的玻璃容器中,密封,水溶液于4℃保存,其他试样于-18℃保存。
12.2 试样提取
准确称取约2.5g(精确至0.001g)试样于50mL离心管中,加0.5g氯化钠、0.5mL盐酸溶液(1+
1)和0.5mL乙醇,用15mL和10mL乙醚提取两次,每次振摇1min,于8000r/min离心3min。每
次均将上层乙醚提取液通过无水硫酸钠滤入25mL容量瓶中。加乙醚清洗无水硫酸钠层并收集至约
25mL刻度,最后用乙醚定容,混匀。准确吸取5mL乙醚提取液于5mL具塞刻度试管中,于35℃氮
吹至干,加入2mL正己烷-乙酸乙酯(1+1)混合溶液溶解残渣,待气相色谱测定。
12.3 仪器参考条件
12.3.1 色谱柱:聚乙二醇毛细管气相色谱柱,内径320μm,长30m,膜厚度0.25μm,或等效色谱柱。
12.3.2 载气:氮气,流速3mL/min。
12.3.3 空气:400L/min。
12.3.4 氢气:40L/min。
12.3.5 进样口温度:250℃。
12.3.6 检测......