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| 标准编号 | GB/T 14926.47-2008 (GB/T14926.47-2008) | | 中文名称 | 实验动物 志贺菌检测方法 | | 英文名称 | Laboratory animal -- Method for examination of shigella spp | | 行业 | 国家标准 (推荐) | | 中标分类 | B44 | | 国际标准分类 | 65.020.30 | | 字数估计 | 6,650 | | 发布日期 | 2008-12-03 | | 实施日期 | 2009-03-01 | | 旧标准 (被替代) | GB/T 14926.47-2001 | | 引用标准 | GB/T 14926.42; GB/T 14926.43, | | 标准依据 | 国家标准批准发布公告2008年第19号(总第132号) | | 发布机构 | 中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局、中国国家标准化管理委员会 | | 范围 | GB/T 14926的本部分规定了实验动物志贺菌的检测方法。本部分适用于猴志贺菌的检测。 |
ICS 65.020.30
B44
中华人民共和国国家标准
GB/T 14926.47-2008
代替GB/T 14926.47-2001
实验动物 志贺菌检测方法
2008-12-03发布
2009-03-01实施
中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局
中国国家标准化管理委员会发布
前言
GB/T 14926《实验动物》共54个部分, 为不同微生物和病毒检测技术方法.
本部分自实施之日起代替GB/T 14926.47-2001《实验动物 志贺菌检测方法》.
本部分与GB/T 14926.47-2001相比主要技术差异如下:
a) 对GB/T 14926.47-2001《实验动物 志贺菌检测方法》部分内容进行了修订和增加;
b) 在原标准“5培养基及试剂”中增加了“5.2GN增菌液”, 将原标准中“5.3S.S琼脂”修改为
“5.4XLD琼脂”;
c) 在原标准“6检测程序”中增加了“GN增菌液(36±1)℃培养6h~8h”这一程序;
d) 在原标准“6检测程序”中将“S.S琼脂”修改为“XLD琼脂”;
e) 原标准“7.2分离培养将已接种的麦康凯琼脂和S.S琼脂平皿置(36±1)℃培养18~24h.”修
改为“7.2增菌分离培养将已接种的GN增菌液置(36±1)℃培养6h~8h, 转种麦康凯琼脂
和XLD琼脂平皿, 置(36±1)℃培养18h~24h”;
f) 原标准“7.3.1菌落特征志贺菌在麦康凯和S.S琼脂平皿上形成无色透明, 圆形, 扁平或微凸
起, 光滑湿润, 边缘整齐, 直径约2mm的菌落.宋内氏志贺菌菌落一般较大, 半透明, 有时可
出现扁平, 边缘不整齐的粗糙型菌落.”修改为“7.3.1菌落特征 志贺菌在麦康凯琼脂平皿上
形成无色, 凸起, 直径2mm~3mm的菌落.在XLD琼脂平皿形成红色, 光滑, 直径1mm~
2mm的菌落.痢疾志贺氏菌1型在上述两种培养基上形成的菌落较其他志贺菌属菌落
要小”;
g) 原标准“7.3.5表1志贺菌生化反应”中“七叶苷脱羧酶”修改成“七叶苷”.
本部分由全国实验动物标准化技术委员会提出并归口.
本部分由全国实验动物标准化技术委员会负责起草.
本部分主要起草人: 黄韧.
本部分所代替标准的历次版本发布情况为:
---GB/T 14926.47-2001.
GB/T 14926.47-2008
实验动物 志贺菌检测方法
1 范围
GB/T 14926的本部分规定了实验动物志贺菌的检测方法.
本部分适用于猴志贺菌的检测.
2 规范性引用文件
下列文件中的条款通过GB/T 14926的本部分的引用而成为本部分的条款.凡是注日期的引用文
件, 其随后所有的修改单(不包括勘误的内容)或修订版均不适用于本部分, 然而, 鼓励根据本部分达成
协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本.凡是不注日期的引用文件, 其最新版本适用于本
部分.
GB/T 14926.42 实验动物 细菌学检测 标本采集
GB/T 14926.43 实验动物 细菌学检测 染色法, 培养基和试剂
3 原理
志贺菌是革兰氏阴性短杆菌, 在三糖铁或双糖铁等培养基上具有特定的生长和生化特征.因此, 可
通过选择性培养基培养, 生化和血清试验鉴定志贺菌.
4 主要设备和材料
普通恒温培养箱.
5 培养基及试剂
5.1 Cary-Blair运送培养基: 成分及配制方法见GB/T 14926.43.
5.2 GN增菌液: 成分及配制方法见GB/T 14926.43.
5.3 麦康凯琼脂: 成分及配制方法见GB/T 14926.43.
5.4 XLD琼脂: 成分及配制方法见GB/T 14926.43.
5.5 克氏双糖铁琼脂: 成分及配制方法见GB/T 14926.43.
5.6 三糖铁琼脂: 成分及配制方法见GB/T 14926.43.
5.7 西蒙氏柠檬酸盐培养基: 成分及配制方法见GB/T 14926.43.
5.8 氨基酸脱羧酶试验培养基: 成分及配制方法见GB/T 14926.43.
5.9 尿素琼脂: 成分及配制方法见GB/T 14926.43.
5.10 半固体琼脂: 成分及配制方法见GB/T 14926.43.
5.11 糖发酵培养基: 成分及配制方法见GB/T 14926.43.
5.12 氰化钾生长培养基: 成分及配制方法见GB/T 14926.43.
5.13 葡萄糖铵培养基: 成分及配制方法见GB/T 14926.43.
5.14 志贺菌多价诊断血清.
GB/T 14926.47-2008
6 检测程序
图1 检测程序
7 操作步骤
7.1 采样
采取粪便或肛拭子标本, 采样方法见GB/T 14926.42.
7.2 增菌分离培养
将已接种的GN增菌液置(36±1)℃培养6h~8h, 转种麦康凯琼脂和XLD琼脂平皿, 置(36±
1)℃培养18h~24h.
7.3 鉴定
7.3.1 菌落特征
志贺菌在麦康凯琼脂平皿上形成无色, 凸起, 直径2mm~3mm的菌落.在XLD琼脂平皿形成红
色, 光滑, 直径1mm~2mm的菌落.痢疾志贺氏菌1型在上述两种培养基上形成的菌落较其他志贺
菌属菌落要小.
7.3.2 菌体特征
革兰氏阴性小杆菌, 无鞭毛, 无芽孢.
7.3.3 培养特性
本菌接种克氏双糖铁或三糖铁琼脂, (36±1)℃培养18h~24h后, 斜面不产酸, 底层产酸不产气,
硫化氢阴性.
GB/T 14926.47-2008
7.3.4 动力半固体试验
阴性.
7.3.5 本菌生化特征
见表1.
表1 志贺菌生化反应
生化检测项目 判 定 结 果
葡萄糖铵 -
七叶苷 -
鸟氨酸脱羧酶a -
KCN生长 -
生化检测项目 判 定 结 果
赖氨酸脱羧酶......
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