路径: 主页 > GB/T > 第627页 > GB/T 18644-2020 | 标准编号 | GB/T 18644-2020 (GB/T18644-2020) | | 中文名称 | 猪囊尾蚴病诊断技术 | | 英文名称 | Diagnostic techniques for porcine cysticercosis | | 行业 | 国家标准 (推荐) | | 中标分类 | B41 | | 国际标准分类 | 11.220 | | 字数估计 | 26,228 | | 发布日期 | 2020-12-14 | | 实施日期 | 2020-12-14 | | 旧标准 (被替代) | GB/T 18644-2002 | | 标准依据 | 国家标准公告2020年第28号 | | 发布机构 | 国家市场监督管理总局、中国国家标准化管理委员会 | GB/T 18644-2020
(Diagnosis technology of swine cysticercosis)
ICS 11.220
B41
中华人民共和国国家标准
代替GB/T 18644-2002
猪囊尾蚴病诊断技术
2020-12-14发布
2020-12-14实施
国 家 市 场 监 督 管 理 总 局
国 家 标 准 化 管 理 委 员 会 发 布
目次
前言 Ⅲ
引言 Ⅳ
1 范围 1
2 规范性引用文件 1
3 缩略语 1
4 显微镜检查 1
4.1 试剂 1
4.2 仪器设备 1
4.3 虫体采集 2
4.4 压片制备 2
4.5 显微镜检查 2
4.6 显微镜检查结果判定 2
5 PCR法 2
5.1 试剂 2
5.2 仪器设备 2
5.3 引物 3
5.4 样品 3
5.5 PCR操作程序 3
5.6 扩增产物电泳检测 4
5.7 试验成立条件 4
5.8 PCR结果判定 4
6 间接ELISA 4
6.1 试剂 4
6.2 仪器设备 4
6.3 样品 5
6.4 试验步骤 5
6.5 试验成立条件 6
6.6 ELISA结果判定 6
7 Dot-ABC-ELISA 6
7.1 试剂 6
7.2 仪器设备 7
7.3 样品 7
7.4 试验步骤 7
7.5 试验成立条件 8
7.6 Dot-ABC-ELISA结果判定 8
8 综合判定 8
附录A(规范性附录) 生理盐水及猪囊尾蚴头节形态特征 9
附录B(规范性附录) PCR引物位置、溶液配制及电泳结果 10
附录C(规范性附录) ELISA试剂及其配制 12
附录D(资料性附录) 猪囊尾蚴TS-CC18重组蛋白的制备 14
附录E(资料性附录) 间接酶联免疫吸附试验的加样 16
附录F(资料性附录) 猪囊尾蚴TS-CC18和烯醇化酶单克隆抗体的制备 17
附录G(资料性附录) Dot-ABC-ELISA相关试剂配制及结果判定 20
前言
本标准按照GB/T 1.1-2009给出的规则起草。
本标准代替GB/T 18644-2002《猪囊尾蚴病诊断技术》,与GB/T 18644-2002相比,除编辑性修
改外,主要技术变化如下:
---范围部分增加了PCR和Dot-ABC-ELISA技术(见第1章);
---增加了缩略语部分(见第3章);
---增加了病原的PCR检测方法(见第5章);
---修改了酶联免疫吸附试验的检测抗原和检测步骤,直接对血清样品进行抗体检测(见第6章,
2002年版的第3章);
---增加了检测循环抗原的Dot-ABC-ELISA方法(见第7章);
---增加了综合判定(见第8章);
---增加了生理盐水及猪囊尾蚴头节图片(见附录A),PCR引物位置、溶液配制及电泳图片(见附
录B),ELISA试剂及其配制(见附录C,2002年版的附录A),猪囊尾蚴TS-CC18重组蛋白的
制备(见附录D),间接酶联免疫吸附试验加样示例(见附录E),猪囊尾蚴TS-CC18和烯醇化
酶单克隆抗体的制备(见附录F),Dot-ABC-ELISA相关试剂配制及结果判定(见附录G)。
请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任。
本标准由中华人民共和国农业农村部提出。
本标准由全国动物卫生标准化技术委员会(SAC/TC181)归口。
本标准起草单位:中国农业科学院兰州兽医研究所。
本标准主要起草人:才学鹏、骆学农、张少华、郑亚东、郭爱疆、侯俊玲。
本标准所代替标准的历次版本发布情况为:
---GB/T 18644-2002。
引 言
人兽共患寄生虫病。世界动物卫生组织将该病列为需申报的疾病之一。目前,该病广泛存在于发展中
国家,而且发达国家的病例也有逐年增加的趋势,不仅影响养猪业的发展,造成巨大的经济损失,而且还
严重威胁人类健康。
猪囊尾蚴病的诊断包括病原学诊断与血清学诊断。病原学诊断的目的在于确定临床剖检样本中虫
体的形态特征,在显微镜下观察头节顶突上有内外两圈排列整齐的小钩,即可判为猪囊尾蚴。若囊尾蚴
主要寄生于肝脏,则要注意与亚洲带绦虫囊尾蚴相区别。目前,该病的生前诊断主要采用血清学方法,
所用的抗原有虫体抗原、囊液抗原或分泌代谢抗原等,虽然这些抗原的检测敏感性较高,但特异性差,而
且抗原来源非常有限。鉴于以上原因,本次对GB/T 18644-2002《猪囊尾蚴病诊断技术》的修订,除间
接ELISA所用抗原改为猪囊尾蚴期特异性18ku基因(TS-CC18)重组蛋白外,还增加了血清循环抗原
(CAg)检测方法和病原的PCR检测方法,以满足猪囊尾蚴病流行病学调查、药物治疗效果评价和动物
流通风险评估等不同需求。
本文件的发布机构提请注意,声明符合本文件时,可能涉及到第6章间接酶联免疫吸附试验
(ELISA)相关的专利使用。
本文件的发布机构对于该专利的真实性、有效性和范围无任何立场。
该专利持有人已向本文件的发布机构保证,他愿意同任何申请人在合理且无歧视的条款和条件下,
就专利授权许可进行谈判。该专利持有人的声明已在本文件的发布机构备案。相关信息可以通过以下
联系方式获得:
专利持有人姓名:才学鹏、张少华、景志忠、骆学农、郭爱疆、郑亚东、窦永喜。
地址:甘肃省兰州市盐场堡徐家坪1号。
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利的责任。
猪囊尾蚴病诊断技术
1 范围
本标准规定了猪囊尾蚴病的显微镜检查、聚合酶链式反应法(PCR法)、间接酶联免疫吸附试验(间
接ELISA)、斑点生物素-亲和素复合物酶联免疫吸附试验(Dot-ABC-ELISA)诊断技术及综合判定。
本标准适用于猪和野猪的囊尾蚴病诊断。
2 规范性引用文件
下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件,仅注日期的版本适用于本文
件。凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。
CNAS-GL029:2018 基因扩增领域检测实验室认可指南
3 缩略语
下列缩略语适用于本文件。
DAB:二氨基联苯胺(3,3'-Diaminobenzidine)
Dot-ABC-ELISA:斑点生物素-亲和素复合物酶联免疫吸附试验(Dot-Avidin-Biotin-Complex-
ELISA)
IPTG:......
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