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| 标准编号 | GB/T 30988-2014 (GB/T30988-2014) | | 中文名称 | 多酚类植物基因组DNA提取纯化及测试方法 | | 英文名称 | Methods of genomic DNA extraction from plants with high levels of polyphenols | | 行业 | 国家标准 (推荐) | | 中标分类 | B30 | | 国际标准分类 | 07.080 | | 字数估计 | 8,846 | | 发布日期 | 7/24/2014 | | 实施日期 | 3/1/2015 | | 引用标准 | GB/T 6682-2008; GB/T 19495.3-2004 | | 标准依据 | 国家标准公告2014年第19号 | | 发布机构 | 中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局、中国国家标准化管理委员会 | | 范围 | 本标准规定了以茶树为代表的多酚类植物基因组DNA提取纯化方法以及DNA纯度、浓度测试方法。本标准适用于茶树、马铃薯、樱挑、葡萄以及其他富含多酚类的植物的植物基因组DNA提取及纯化。 |
GB/T 30988-2014
Methods of genomic DNA extraction from plants with high levels of polyphenols
ICS 07.080
B30
中华人民共和国国家标准
多酚类植物基因组DNA提取纯化
及测试方法
2014-07-24发布
2015-03-01实施
中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局
中国国家标准化管理委员会发布
目次
前言 Ⅲ
1 范围 1
2 规范性引用文件 1
3 缩略语 1
4 原理 1
5 实验室通用要求 2
6 试剂与溶液 2
7 仪器和设备 2
8 提取步骤 3
9 DNA纯度、浓度测试 4
前言
本标准按照GB/T 1.1-2009给出的规则起草。
本标准由中国测试技术研究院提出。
本标准由全国生化检测标准化技术委员会 (SAC/TC387)归口。
本标准起草单位:中国测试技术研究院、中测测试科技有限公司。
本标准主要起草人:谭和平、沈兴中、唐祥凯、周李华、孙登峰。
多酚类植物基因组DNA提取纯化
及测试方法
1 范围
本标准规定了以茶树为代表的多酚类植物基因组DNA提取纯化方法以及DNA纯度、浓度测试
方法。
本标准适用于茶树、马铃薯、樱桃、葡萄以及其他富含多酚类的植物的植物基因组DNA提取及
纯化。
2 规范性引用文件
下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件,仅注日期的版本适用于本文
件。凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。
GB/T 6682-2008 分析实验室用水规格和实验方法
GB/T 19495.3-2004 转基因产品检测 核酸提取纯化方法
3 缩略语
下列缩略语适用于本文件。
Tris:三(羟甲基)氨基甲烷
SDS:十二烷基磺酸钠
PVP:聚乙烯吡咯烷酮
RNaseA:核糖核酸酶A
FF:二甲苯青
EDTA:乙二胺四乙酸
TE:三(羟甲基)氨基甲烷–乙二胺四乙酸
4 原理
4.1 提取纯化
在液氮条件中,通过物理研磨方法破碎多酚类植物叶片的细胞,利用抗氧化剂防止多酚类化合物氧
化褐变,同时利用聚乙烯吡咯烷酮(PVP)的粘接性去除多酚类化合物及其他次生代谢物等杂质,然后利
用化学方法使DNA从植物细胞中释放出来,再弃除DNA中的蛋白质等杂质,以及DNA提取过程中
加入的异戊醇、异丙醇、乙醇等有机溶剂,最后得到纯的DNA。
4.2 纯度测试
在pH7~8.5下,根据DN......
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