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[PDF] GB/T 36820-2018 - 英文版

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GB/T 36820-2018 英文版 199 GB/T 36820-2018 [PDF]天数 >=3 甘蔗条纹花叶病毒实时荧光反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)检测方法 有效
基本信息
标准编号 GB/T 36820-2018 (GB/T36820-2018)
中文名称 甘蔗条纹花叶病毒实时荧光反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)检测方法
英文名称 Detection method of Sugarcane streak mosaic virus by real-time reverse transcription polymerase chain reaction (RT-PCR)
行业 国家标准 (推荐)
中标分类 B16
国际标准分类 65.020.01
字数估计 10,138
发布日期 2018-09-17
实施日期 2019-04-01
发布机构 国家市场监督管理总局、中国国家标准化管理委员会

GB/T 36820-2018 Detection method of Sugarcane streak mosaic virus by real-time reverse transcription polymerase chain reaction(RT-PCR) ICS 65.020.01 B16 中华人民共和国国家标准 甘蔗条纹花叶病毒实时荧光反转录聚合酶 链式反应(RT-PCR)检测方法 2018-09-17发布 2019-04-01实施 国 家 市 场 监 督 管 理 总 局 中国国家标准化管理委员会 发 布 前言 本标准按照GB/T 1.1-2009给出的规则起草。 本标准由全国植物检疫标准化技术委员会(SAC/TC271)提出并归口。 本标准起草单位:福建农林大学国家甘蔗工程技术研究中心、农业部甘蔗及制品质量监督检验测试 中心、农业部福建甘蔗生物学与遗传育种重点实验室。 本标准主要起草人:高三基、黄美婷、傅华英、孙生仁、张慧丽、王锦达、陈如凯。 甘蔗条纹花叶病毒实时荧光反转录聚合酶 链式反应(RT-PCR)检测方法 1 范围 应(RT-PCR)检测方法的仪器与设备、试剂与材料、样品的采集与前处理、检测以及结果判断与表述等。 本标准适用于可能带有甘蔗条纹花叶病毒的活体寄主植物的快速检测、诊断。 2 缩略语 下列缩略语适用于本文件。 CP:外壳蛋白(coatprotein) Ct值:实时荧光PCR反应中,每个反应管内的荧光信号达到设定的阈值时所经历的循环数(cycle threshold) FAM:6-羧基荧光素(6-carboxy-fluorescein) RNA:核糖核酸(ribonucleicacid) Tip:吸头 3 方法原理 根据甘蔗条纹花叶病毒CP基因序列设计一对仅在该病毒CP基因间保守的特异性引物和一条特 异性的荧光双标记水解型寡核苷酸探针(TaqMan探针)。首先利用反转录酶将病毒 RNA 反转成 cDNA,再以cDNA为模板在同一反应管内连续进行实时荧光PCR扩增反应,水解型寡核苷酸探针 (TaqMan探针)的荧光信号强度伴随着目标序列PCR扩增产物的增加呈正比关系,通过收集PCR扩 增过程的荧光信号值,即可判断试样是否带有目标序列。甘蔗条纹花叶病信息参见附录A。 4 仪器与设备 4.1 实时荧光PCR检测仪:激发/检测波长范围350nm~750nm;可用荧光染料(SYBRGreenI)和水 解型寡核苷酸探针(TaqMan探针)......

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