路径: 主页 > MISC > 第347页 > WS/T 341-2011 | 标准编号 | WS/T 341-2011 (WS/T341-2011) | | 中文名称 | 血红蛋白测定参考方法 | | 英文名称 | Reference method for haemoglobinometry in human blood | | 行业 | 卫生行业标准 (推荐) | | 中标分类 | C50 | | 国际标准分类 | 11.020 | | 字数估计 | 7,773 | | 发布日期 | 2011-09-30 | | 实施日期 | 2012-04-01 | | 标准依据 | 卫通(2011)16号 | | 发布机构 | 中华人民共和国国家卫生和计划生育委员会 | | 范围 | 本标准规定了血红蛋白测定参考方法的技术要求。本标准适用于建立并运行血红蛋白测定参考方法的实验室。 | WS/T 341-2011: 血红蛋白测定参考方法
WS/T 341-2011 英文名称: Reference method for haemoglobinometry in human blood
ICs 11.020
C50
中 华 人 民 共 和 国 卫 生 行 业 标 准
Ws/T 341- 2ˉ011
血红蛋白测定参考方法
1 范围
本标准规定了血红蛋白测定参考方法的技术要求。
本标准适用于建立并运行血红蛋白测定参考方法的实验室。
2 术语和定义
下列术语和定义适用于本文件。
2.1血红蛋白
存在于血液中所有的血红蛋白衍生物 ,包括脱氧血红蛋白、氧合血红蛋白、硫化血红蛋白、碳氧血红
蛋白和高铁血红蛋白。
2.2仅化商铁血红蛋白
血红蛋白(除硫化血红蛋白外 )中 的亚铁离子被氧化成高铁离子 ,再与氰离子结合形成的血红蛋 白
衍生物 ,即 氰化高铁血红蛋白。
2.3参考方法
一种可清楚和准确描述的用于特定检测的技术 ,该技术要有依据 ,可提供足够准确和精密的实验数
据以评价其他实验方法检测结果的有效性。若有决定性方法 ,参考方法的准确性必须与决定性方法进
行比较 ,并且应标示不准确度和不精密度。
3 总则
为了保证参考方法检测结果的准确性 ,建立参考方法的实验室应与其他参考实验室进行结果 比对。
4 原理
血红蛋白分子中的亚铁离子 (Fe2+)在溶液中被高铁氰化钾氧化成高铁离子 (Fe3+)形成高铁血红
蛋白(Hi),其后又与氰离子(CNˉ )反应生成氰化高铁血红蛋白(HCN),HCN在 波长 540nm处有最
大吸收峰 ,HCN吸光度严格遵循朗伯-比尔定律 ,即 HCN在 波长 540nm的吸光度值与 HCN浓 度成
正比,血红蛋白浓度可由分光光度计所测定的吸光度值计算得出。
5 -般技术要求
5.1 设备
5.1.1 玻璃器具
试验所用的玻璃器具应为 A级 。
5.2.2 试剂 为清亮 的淡 黄色溶液 ,不 吸收波长 大 于 480nm的光。pH为7.0~7.4,渗透压 为
6mOsm/(kg·H20)~7mOsm/(kg·H2O)。 试剂应可使血红蛋 白在 5min内完全转化成氰化高铁血红蛋白。
5.2.3 试剂应保存于较大且密封的棕色硼硅酸盐玻璃瓶内 ,室 温避光保存 ,不 能冷冻。如有浑浊物生
成 ,应重新配制。至少每月重新配制一次。
5.3 血标本的采集
5.3.1 用真空采血系统采集新鲜静脉血。采血时要避免皮肤消毒物质的污染。标本中不得有 肉眼可见的小凝块或溶血。
5.3.2 采集标本时使用 EDTA为抗凝剂 ,要求加人血液后抗凝剂的终浓度为 3.7umol/mL~5.4umol/mL,可以使用以下几种抗凝剂 :
5.3.3 血液加人抗凝管后 ,管 内剩余空间至少占试管体积的 ⒛ %,以利于血标本的混匀。
5.3.4 标本采集后应在当天完成测定。
6 测定步骤
6.1 标本稀释
6.1.1 取文-齐氏液加至容量为 25mL的A级容量瓶中 ,将试剂液面调至刻度线。
6.1.2 用正向置换移液器吸取 100uL混匀全血 ,使用蘸有盐水的纱布小心快速地擦掉毛细管外壁残
留的血液 (该过程应避免因虹吸作用带走毛细管内的血液),将毛细管中的血液加至装有试剂的容量瓶
中 ,吹 吸至少 5次 ,以保证血液全部从毛细管中洗出。同一份标本分次稀释后 ,检测结果的变异系数应<0.5%。
6.1.3 盖上容量瓶盖子 ,充分颠倒混匀 ,直至红细胞完全溶解。
6.1.4 避光放置 5min以上 ,以保证血红蛋白完全转化成氰化高铁血红蛋白。
6.1.5 用滤器过滤稀释后的标本 。
6.1.5.1 使用注射器和特定的滤器 (5.1.2)过滤。
6.1.5.2 滤液至少放置 1min,以使气泡溢出。
6.2 血红蛋白浓度检测
6.2.1 使用分光光度计测定 HCN溶......
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