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| 标准编号 | WS/T 341-2011 (WS/T341-2011) | | 中文名称 | 血红蛋白测定参考方法 | | 英文名称 | Reference method for haemoglobinometry in human blood | | 行业 | 卫生行业标准 (推荐) | | 中标分类 | C50 | | 国际标准分类 | 11.020 | | 字数估计 | 7,773 | | 发布日期 | 2011-09-30 | | 实施日期 | 2012-04-01 | | 标准依据 | 卫通(2011)16号 | | 发布机构 | 中华人民共和国国家卫生和计划生育委员会 | | 范围 | 本标准规定了血红蛋白测定参考方法的技术要求。本标准适用于建立并运行血红蛋白测定参考方法的实验室。 | WS/T 341-2011
Reference method for haemoglobinometry in human blood
ICs 11.020
C50
中 华 人 民 共 和 国 卫 生 行 业 标 准
2011-09-3o发布
中华人民共和国卫生部 发 布
本标准按照 GB/T 1.1-⒛ 09给出的规则起草。
本标准由卫生部临床检验标准专业委员会提出。
本标准主要起草单位:卫生部临床检验中心。
本标准主要起草人:彭 明婷、谷小林、李臣宾、施丽飞、陆红、申子瑜。
1 范围
本标准规定了血红蛋白测定参考方法的技术要求。
本标准适用于建立并运行血红蛋白测定参考方法的实验室。
2 术语和定义
下列术语和定义适用于本文件。
2.1
血红蛋白 hemog1oun,HGB/Hb
存在于血液中所有的血红蛋白衍生物,包括脱氧血红蛋白、氧合血红蛋白、硫化血红蛋白、碳氧血红
蛋白和高铁血红蛋白。
2.2
仅化商铁血红蛋白 haemigⅡobincyanide,HiCN
血红蛋白(除硫化血红蛋白外)中 的亚铁离子被氧化成高铁离子,再与氰离子结合形成的血红蛋 白
衍生物,即 氰化高铁血红蛋白。
2.3
参考方法 reference method
一种可清楚和准确描述的用于特定检测的技术,该技术要有依据,可提供足够准确和精密的实验数
据以评价其他实验方法检测结果的有效性。若有决定性方法,参考方法的准确性必须与决定性方法进
行比较,并且应标示不准确度和不精密度。
3 总则
为了保证参考方法检测结果的准确性,建立参考方法的实验室应与其他参考实验室进行结果 比对。
4 原理
血红蛋白分子中的亚铁离子 (Fe2+)在溶液中被高铁氰化钾氧化成高铁离子 (Fe3+)形成高铁血红
蛋白(Hi),其后又与氰离子(CNˉ)反应生成氰化高铁血红蛋白(HCN),HCN在 波长 540nm处有最
大吸收峰,HCN吸光度严格遵循朗伯-比尔定律,即 HCN在 波长 540nm的吸光度值与 HCN浓 度成
正比,血红蛋白浓度可由分光光度计所测定的吸光度值计算得出。
5 -般技术要求
5.1 设备
5.1.1 玻璃器具
试验所用的玻璃器具应为 A级 。
5.1.2 薄膜过滤器:由 低蛋白结合和低释放材料制成 。
5.1.3 分光光度计:所用的分光光度计应经计量部门检定合格,仪 器的狭缝宽度≤2nm,配对 比色杯
的内径为 1.000cm±0。 002cm。
5.2 试剂
5.2.2 试剂 为清亮 的淡 黄色溶液,不 吸收波长 大 于 480nm的光。pH为7.0~7.4,渗透压 为
6mOsm/(kg·H20)~7mOsm/(kg·H2O)。 试剂应可使血红蛋 白在 5min内完全转化成氰化高铁
血红蛋白。
5.2.3 试剂应保存于较大且密封的棕色硼硅酸盐玻璃瓶内,室 温避光保存,不 能冷冻。如有浑浊物生
成,应重新配制。至少每月重新配制一次。
5.3 血标本的采集
5.3.1 用真空采血系统采集新鲜静脉血。采血时要避免皮肤消毒物质的污染。标本中不得有 肉眼可
见的小凝块或溶血。
5.3.2 采集标本时使用 EDTA为抗凝剂,要求加人血液后抗凝剂的终浓度为 3.7umol/mL~5.4umol/
mL,可以使用以下几种抗凝剂:
5.3.3 血液加人抗凝管后,管 内剩余空间至少占试管体积的 ⒛ %,以利于血标本的混匀。
5.3.4 标本采集后应在当天完成测定。
6 测定步骤
6.1 标本稀释
6.1.1 取文-齐氏液加至容量为 25mL的A级容量瓶中,将试剂液面调至刻度线。
6.1.2 用正向置换移液器吸取 100uL混匀全血,使用蘸有盐水的纱布小心快速地擦掉毛细管外壁残
留的血液 (该过程应避免因虹吸作用带走毛细管内的血液),将毛细管中的血液加至装有试剂的容量瓶
中,吹 吸至少 5次,以保证血液全部从毛细管中洗出。同一份标本分次稀释后,检测结果的变异系数应
< 0.5%。
6.1.3 盖上容量瓶盖子,充分颠倒混匀,直至红细胞完全溶解。
6.1.4 避光放置 5min以上,以保证血红蛋白完全转化成氰化高铁血红蛋白。
6.1.5 用滤器过滤稀释后的标本 。
6.1.5......
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