| 标准编号 | GB 23200.77-2016 (GB23200.77-2016) | | 中文名称 | 食品安全国家标准 食品中苄螨醚残留量的检测方法 | | 英文名称 | Food safety national standard -- Detection Method of Benzomidazole Residue in Food | | 行业 | 国家标准 | | 中标分类 | G25 | | 字数估计 | 12,193 | | 发布日期 | 2016-12-18 | | 实施日期 | 2017-06-18 | | 旧标准 (被替代) | SN/T 2431-2010 | | 标准依据 | State Health Commission, Ministry of Agriculture, Food and Drug Administration Notice No. 16 of 2016 | | 发布机构 | 中华人民共和国国家卫生和计划生育委员会、国家食品药品监督管理总局 | GB 23200.77-2016: 食品安全国家标准 食品中苄螨醚残留量的检测方法
GB 23200.77-2016 英文名称: Food safety national standard -- Detection Method of Benzomidazole Residue in Food
中华人民共和国国家标准
GB
代替SN/T 2431-2010
食品安全国家标准
食品中苄螨醚残留量的检测方法
1 范围
本标准规定了食品中苄螨醚残留量检测的气相色谱测定和气相色谱-质谱确证的方法。
本标准适用于芦笋、土豆、葱、梨、桃、玉米、荞麦、茶叶、食醋、蜂蜜、核桃仁、兔肉、鸡
肝、虾仁、鸡肉中苄螨醚残留量的检测，其它食品可参照执行。
2 规范性引用文件
下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本
文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。
GB 2763 食品安全国家标准 食品中农药最大残留限量
GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法
3 原理
醋和蜂蜜用水溶解和稀释后，过固相萃取柱净化；葱和茶叶用乙酸乙酯-环己烷混合溶剂提取，固
相萃取净化；动物源性食品和含油量高的食品用乙腈提取，其他食品用乙酸乙酯-环己烷混合溶剂提取，
提取液用凝胶色谱仪（GPC），供带有电子捕获检测器的气相色谱仪测定，外标法定量，
阳性样品用气相色谱-质谱法确证。
4 试剂和材料
除另有规定外，所有试剂均为分析纯，水为 符合GB/T 6682中规定的一级水。
4.1 试剂
4.1.1 乙酸乙酯（C4H8O2，CAS 号 141-78-6）：色谱纯。
4.1.2 环己烷（C6H12，CAS 号 110-82-7）：色谱纯。
4.1.3 乙腈（C2H3N，CAS 号 75-05-8）：色谱纯。
4.1.4 正己烷（C6H14，CAS 号 110-54-3）：色谱纯
4.1.5 丙酮（C3H6O，CAS 号 67-64-1）：色谱纯
4.1.6 无水硫酸钠（Na2SO4，CAS 号 15124-09-1）：650 ℃灼烧 4 h，贮于密封容器中备用。
4.1.7 氯化钠（NaCl，CAS 号 7647-14-5）。
4.2 溶液配制
4.2.1 乙酸乙酯-环己烷混合溶剂（1+1，V/V）：量取 500 mL乙酸乙酯和 500 mL环己烷，混匀。
4.2.2 正己烷-丙酮混合溶剂（9+1，V/V）：量取 90 mL正己烷和 10 mL丙酮，混匀。
4.2.3 环己烷-乙酸乙酯混合溶剂（6+1，V/V）：量取 10 mL乙酸乙酯和 60 mL环己烷，混匀。
4.3 标准品
4.3.1 苄螨醚标准物质：（Halfenprox；CAS：111872-58-3；C24H23BrF2O3；分子量：477.34）纯度≥99 %。
4.4 标准溶液配制
4.4.1 标准储备液（100 mg/L）：准确称取适量标准物质，用乙酸乙酯溶解，配制成浓度为 100 mg/L
的标准储备液，该溶液在 0-4 ℃冰箱中保存。
4.4.2 标准工作液：根据需要再用乙酸乙酯稀释成适用浓度的标准工作溶液。标准工作液应现用现配。
4.5 材料
4.5.1 石墨化碳黑和 PSA混合柱：1 mL，50 mg石墨化碳黑+50 mgPSA，用 3 mL环己烷-乙酸乙酯混合溶剂活化。
4.5.2 HLB固相萃取柱：3 mL，60 mg，或相当者，用 2 mL正己烷-丙酮混合溶液，2 mL丙酮，5 mL蒸馏水预淋洗。
4.5.3 有机相滤膜：0.45 m。
5 仪器和设备
5.1 气相色谱仪，配有电子捕获检测器。
5.2 气相色谱-质谱仪，配有电子轰击源（EI）。
5.3 分析天平：感量为 0.01 g。
5.4 分析天平：感量为 0.0001 g。
5.5 凝胶色谱仪，配有单元泵，馏分收集器。
5.6 离心机：4000 r/min。
5.7 旋转蒸发器。
5.8 无水硫酸钠柱：7.5 cm×1.5(i.d.)cm玻璃柱，内装 5 cm 高无水硫酸钠。
5.9 涡旋混合器。
5.10 均质器。
5.11 氮吹仪。
5.12 具塞离心管：50 mL，聚四氟乙烯。
6 试样制备与保存
6.1 试样制备
6.1.1 粮谷及茶叶类
将样品按四分法缩分至500 g，用磨碎机全部磨碎。混匀，均分成两份作为试样，分装入洁净的盛
样瓶内，密闭，标明标记。
6.1.2 水果及蔬菜类
抽取水果或蔬菜样品500 g，（不可用水洗涤），切碎后，依次用食品捣碎机将样品加工成浆状。
混匀，均分成两份作为试样，分装入洁净的盛样袋内，密闭，标明标记。
6.1.3 肉及肉制品类、坚果类
从所取全部样品中取出有代表性样品约1 kg，经捣碎机充分捣碎均匀，均分成两份，分别装入洁
净容器内作为试样。密封并标明标记。
注：以上样品取样部位按GB 2763附录A执行。
6.2 试样保存
粮谷类、茶叶类、坚果类、蜂蜜及蜂蜜制品类试样于0-4 ℃保存；其它类试样于-18 ℃以下冷冻保存。
在制样的操作过程中，应防止样品受到污染或发生残留物含量的变化。
7 分析步骤
7.1 提取
7.1.1 蔬菜、水果、粮谷
蔬菜、水果，粮谷称取10 g(精确到0.01 g)均匀试样，置于50 mL具塞离心管中，加入20 mL乙酸乙
酯-环己烷混合溶剂，10000 r/min匀浆60 s，4000 r/min离心3 min，收集上层有机相，残留物再用20 mL
乙酸乙酯-环己烷混合溶剂重复提取一次，合并上层有机相，过无水硫酸钠柱脱水，收集于150 mL浓缩
瓶中，于40 ℃水浴中旋转浓缩至近干，准确加入10.0 mL乙酸乙酯-环己烷溶解残渣，
并过0.45 m滤膜，待凝胶色谱净化。
7.1.2 核桃仁、兔肉、鸡肝、虾、鸡肉
称取10 g(精确到0.01 g)均匀试样，置于50 mL具塞塑料离心管中，加入20 mL乙腈，10 mL蒸馏
水，3 g氯化钠，10000 r/min匀浆60 s，4000 r/min离心3 min，收集上层有机相，残留物再用20 mL乙腈
重复提取一次，合并上层有机相，过无水硫酸钠柱脱水，收集于150 mL浓缩瓶中，于40 ℃水浴中旋转
浓缩至近干，准确加入10.0 mL乙酸乙酯-环己烷溶解残渣，并过0.45 m滤膜，待凝胶色谱净化。
7.1.3 茶叶、葱
称取2.5 g(精确到0.01 g)均匀试样，置于50 mL具塞塑料离心管中,加入15 mL蒸馏水，静置1 h，加
入20 mL乙酸乙酯-环己烷混合溶剂，10000 r/min匀浆60 s，4000 r/min离心3 min，收集上层有机相，残
留物再用20 mL乙酸乙酯-环己烷混合溶剂重复提取一次，合并上层有机相，过无水硫酸钠脱水，收集
于150 mL浓缩瓶中，于40 ℃水浴中旋转浓缩至近干，用乙酸乙酯-环己烷混合溶剂准确定容到1.0
mL，过0.45 m滤膜，待固相萃取净化。
7.2 净化
7.2.1 蔬菜、水果、粮谷、核桃仁、兔肉、鸡肝、虾、鸡肉凝胶色谱净化
7.2.1.1 凝胶色谱净化条件
a) 凝胶净化柱：300 mm×10 mm（i.d.），Bio Beads S-X3，60-100目，或相当者；
b) 流动相：环己烷-乙酸乙酯（1+1）；
c) 流速：4.7 mL/min；
d) 样品定量环：5 mL；
g) 收集时间：7.5 min～12.5 min。
7.2.1.2 凝胶色谱净化步骤
将10mL待净化液按7.2.1条件净化，收集全部收集液于氮吹管中，于35 ℃水浴中氮吹至近干，用
乙酸乙酯定容至1.0 mL，供气相色谱仪测定，气相色谱-质谱法确证。
7.2.2 醋、蜂蜜
称取2.5 g(精确到0.01 g)均匀试样，加入5 mL水旋涡振荡混匀30 s，将溶液全部过HLB固相萃取
柱，流速控制在1 mL/min，再用 2mL蒸馏水淋洗柱子，弃去淋洗液，真空抽干2 min，再用4 mL正乙
烷-丙酮混合溶液洗脱，收集洗脱液于离心管中，40 ℃下氮气吹干，0.5 mL乙酸乙酯定容，待测。
7.2.3 茶叶、葱
取0.5 mL待净化液上石墨化碳黑和PSA混合柱，用1.5 mL乙酸乙酯：环己烷混合溶剂洗脱，流速
控制在1 mL/min，收集所有流出液于离心管中，40 ℃下氮气吹干，0.5 mL乙酸乙酯定容，待测。
7.2 测定
7.3.1 气相色谱参考条件
a) 色谱柱：DB-1301 石英毛细管柱，30m×0.25 mm（i.d.）×0.25 m，或性能相当者；
b) 色谱柱温度：50℃ 20℃/min 200℃ 5℃/min 260℃（10min）；
c) 进样口温度：260 ℃；
d) 检测器温度：300 ℃；
e) 载气：氮气，纯度大于等于 99.999 %，柱流量 2 mL/min；
f) 进样方式：无分流，0.75 min 后打开分流阀；
g) 进样量：1L。
7.3.2 气相色谱-质谱参考条件
a) 色谱柱：HP-5MS 石英毛细管柱，30m×0.25 mm（i.d.）×0.25 m，或性能相当者；
b) 色谱柱温度：50℃（1 min） 10℃/min 280℃（10 min）；
c) 进样口温度：250 ℃；
d) 色谱-质谱接口温度：280 ℃；
e) 电离方式：EI；
f) 电离能量：70 eV；
g) 载气：氦气，纯度大于等于 99.999 %，流速 1 mL/min；
h) 进样方式：无分流，0.75 min 后打开分流阀；
i) 进样量：1 L；
j) 测定方式：选择离子监测；
k) 选择监测离子（m/z）：183、264、265；
l) 溶剂延迟：5.0 min。
7.3.3 色谱测定与确证
根据样液中苄螨醚含量情况，选定峰面积相近的标准工作溶液，标准工作溶液和样液中苄螨醚相
应值均应在仪器检测线性范围内。标准工作溶液和样液等体积交替进样测定。在上述色谱条件下，苄
螨醚的保留时间约为22.4 min。标准品的色谱图见附录A中图A.1。
标准溶液及样液均按7.3.1的条件进行测定，如果样液中与标准溶液相同的保留时间有峰出现，则
对其进行气相色谱-质谱确证。
经确证分析被测物质量色谱峰保留时间与标准品样品相一致，并且在扣除背景后的样品谱图中，
所选择的离子均出现；同时所选择离子的丰度比与标准样品相关离子......
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