| 标准编号 | GB 31656.5-2021 (GB31656.5-2021) | | 中文名称 | | | 英文名称 | National food safety standard - Determination of methaqualone residue in fishery products by liquid chromatography-tandem mass spectrometric method | | 行业 | 国家标准 | | 中标分类 | X20 | | 字数估计 | 7,761 | | 发布机构 | 中华人民共和国国家卫生健康委员会、国家市场监督管理总局 | GB 31656.5-2021: 食品安全国家标准 水产品中安眠酮残留量的测定 液相色谱-串联质谱法
食品安全国家标准
水产品中安眠酮残留量的测定
液相色谱-串联质谱法
中华人民共和国国家标准
中华人民共和国国家卫生健康委员会发布
国 家 市 场 监 督 管 理 总 局
中华人民共和国农业农村
前言
本文件按照GB/T １.１-２０２０«标准化工作导则 第１部分:标准化文件的结构和起草规则»的规定
起草.
本文件系首次发布.
食品安全国家标准
水产品中安眠酮残留量的测定 液相色谱Ｇ串联质谱法
１ 范围
本文件规定了水产品中安眠酮残留量检测的制样和液相色谱Ｇ串联质谱测定方法.
本文件适用于鱼、虾可食组织中安眠酮残留量的检测.
２ 规范性引用文件
下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款.其中,注日期的引用文件,
仅该日期对应的版本适用于本文件;不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本
文件.
GB/T ６６８２ 分析实验室用水规格和试验方法
GB/T ３０８９１-２０１４ 水产品抽样规范
３ 术语和定义
本文件没有需要界定的术语和定义.
４ 原理
试样中残留的安眠酮,用正己烷提取,硅胶柱净化,液相色谱Ｇ串联质谱测定,内标法定量.
５ 试剂和材料
以下所用试剂,除另有注明外均为分析纯,水为符合GB/T ６６８２规定的一级水.
５.１ 试剂
5.1.1 丙酮(CH₃COCH₃):色谱纯。
5.1.2甲醇(CH₃OH):色谱纯。
5.1.3 甲酸(HCOOH):色谱纯。
5.1.4 正己烷(C₆Hu):色谱纯。
5.1.5乙醚(C₂H₅OC₂H₅):色谱纯。
５.２ 溶液配制
５.２.１ ２０％乙醚Ｇ正己烷淋洗液:取乙醚２０mL、正己烷８０mL,混匀.
５.２.２ ５０％乙醚Ｇ正己烷混合溶液:取乙醚５０mL、正己烷５０mL,混匀.
５.２.３ ５０％甲醇溶液:取甲醇５０mL,加水至１００mL,混匀.
５.２.４ ０.１％甲酸溶液:取甲酸１mL,加水至１０００mL,混匀.
５.３ 标准物质
５.４ 标准溶液制备
５.４.１ ２００ng/mL安眠酮标准中间液:精密量取安眠酮标准溶液适量,用甲醇稀释配制成浓度为
２００ng/mL标准中间液.置-１８℃以下避光保存,有效期３个月.
５.４.２ 内标工作液:精密量取安眠酮ＧD７标准溶液适量,用甲醇稀释配制成浓度为２００ng/mL内标工作液.置-１８℃以下避光保存,有效期３个月.
５.５ 材料
５.５.１ 固相萃取柱:硅胶柱,５００mg/３mL,或性能相当.
５.５.２ 水相聚砜醚针式滤器:０.２２μm.
６ 仪器和设备
６.１ 液相色谱Ｇ串联质谱仪:配电喷雾离子源.
６.２ 天平:感量０.０１g和感量０.００００１g.
６.３ 均质机.
６.４ 离心机:６０００r/min.
６.５ 氮吹仪.
６.６ 超声波清洗器.
６.７ 涡旋混合器.
６.８ 具塞玻璃离心管:１０mL.
７ 测定步骤
７.１ 试样的制备
按GB/T ３０８９１-２０１４中附录B的要求制样.
a) 取均质后的供试样品,作为供试试料;
b) 取均质后的空白样品,作为空白试料;
c) 取均质后的空白样品,添加适宜浓度的安眠酮标准中间液,作为空白添加试料.
７.２ 试料的保存
-１８℃以下保存,保存期３个月.
８ 测定步骤
８.１ 提取
取试样５g(准确至±０.０５g),于５０mL离心管中,加内标工作液５０μL、水３mL,涡旋混合３０s,加
正己烷１５mL,振荡提取３min,超声５min,４５００r/min离心７min,取正己烷层至２５mL容量瓶;残渣再加正己烷８mL,重复提取一次,合并正己烷液,并用正己烷稀释定容至刻度,混匀,备用.
８.２ 净化
取固相萃取柱,依次用丙酮５mL、正己烷５mL活化.精密量取备用液１０mL过柱,速度约为每秒１
滴,用２０％乙醚Ｇ正己烷淋洗液５mL淋洗,弃去流出液,抽干.用５０％乙醚Ｇ正己烷混合溶液８mL洗脱,
收集洗脱液,４０℃氮气吹干.准确加入５０％甲醇溶液１mL溶解残余物,用水相针式滤器过滤至进样小
瓶中,供液相色谱Ｇ串联质谱测定.
８.３ 标准工作曲线的制备
分别精密量取安眠酮标准中间液和内标工作液适量,用５０％甲醇溶液稀释制成含同位素内标物浓度
为４ng/mL,安眠酮浓度为０.４ng/mL、１.０ng/mL、５.０ng/mL、２５.０ng/mL和１００.０ng/mL的系列标准工作液,供液相色谱Ｇ串联质谱测定.以安眠酮特征离子质量色谱峰面积与同位素内标物特征离子质量色谱峰面积比值为纵坐标、相应的浓度为横坐标绘制标准曲线,求回归方程和相关系数.
８.４ 测定
８.４.１ 液相色谱条件
a) 色谱柱:C１８柱(１００mm×２.１mm,５μm)或相当者;
b) 流动相:A为甲醇,B为０.１％甲酸溶液,梯度洗脱条件见表１;
c) 流速:０.３mL/min;
d) 柱温:２５℃;
e) 进样量:２５μL.
８.４.２ 质谱条件
a) 离子源:电喷雾离子源;
b) 扫描方式:正离子扫描;
c) 检测方式:多反应监测;
d) 喷雾电压:４５００V;
e) 离子传输毛细管温度:３５０℃;
f) 源内碰撞诱导解离电压:１０V;
g) 雾化气流速:１２.３L/h;
h) 辅助气流速:１.７L/h;
i) 母离子、子离子和碰撞能量参考值见表２.
８.４.３ 测定法
取试样溶液和系列标准工作液等体积进样测定,作单点或多点校准,以色谱峰面积定量,内标法计算.
标准溶液及试样溶液中安眠酮的响应值均应在仪器检测的线性范围之内.通过试样中待测物的保留时
间、特征离子相对丰度与浓度相近的标准溶液的保留时间、特征离子相对丰度相对照定性.试样液中待测
物与标准品的保留时间偏差在±２.５％以内;特征离子相对丰度偏差满足表３的要求,则可判定试样中存
在相应的被测物.在上述色谱Ｇ质谱条件下,安眠酮标准溶液特征离子色谱图参见附录A.
８.５ 空白试验
取空白试料,除不加标准溶液外,采用相同的测定步骤......
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