| 标准编号 | GB 31658.19-2022 (GB31658.19-2022) | | 中文名称 | 食品安全国家标准 动物性食品中阿托品、东莨菪碱、山莨菪碱、利多卡因、普鲁卡因残留量的测定 液相色谱-串联质谱法 | | 英文名称 | (National Food Safety Standard Determination of Atropine, Scopolamine, Anisodamine, Lidocaine, and Procaine Residues in Animal Foods-Liquid Chromatography-Tandem Mass Spectrometry) | | 行业 | 国家标准 | | 中标分类 | X04 | | 字数估计 | 10,124 | | 发布日期 | 2022-09-20 | | 实施日期 | 2023-02-01 | | 发布机构 | 中华人民共和国国家卫生健康委员会、国家市场监督管理总局 | GB 31658.19-2022: 食品安全国家标准 动物性食品中阿托品、东莨菪碱、山莨菪碱、利多卡因、普鲁卡因残留量的测定 液相色谱-串联质谱法
GB 31658.19-2022 英文名称: (National Food Safety Standard Determination of Atropine, Scopolamine, Anisodamine, Lidocaine, and Procaine Residues in Animal Foods-Liquid Chromatography-Tandem Mass Spectrometry)
中华人民共和国国家卫生健康委员会
食品安全国家标准
动物性食品中阿托品、东莨菪碱、山莨菪碱、
利多卡因、普鲁卡因残留量的测定
液相色谱-串联质谱法
中华人民共和国国家标准
发 布
国 家 市 场 监 督 管 理 总 局
中华人民共和国农业农村部
前 言
本文件按照GB/T １１-２０２０«标准化工作导则 第１部分:标准化文件的结构和起草规则»的规定
起草.
本文件系首次发布.
GB ３１６５８１９-２０２２
食品安全国家标准
动物性食品中阿托品、东莨菪碱、山莨菪碱、利多卡因、普鲁卡因
残留量的测定 液相色谱Ｇ串联质谱法
１ 范围
本文件规定了动物性食品中阿托品、东莨菪碱、山莨菪碱、利多卡因、普鲁卡因残留量检测的制样和液
相色谱Ｇ串联质谱检测方法.
本文件适用于猪、牛、羊的肌肉、肝脏、肾脏和脂肪中阿托品、东莨菪碱、山莨菪碱、利多卡因、普鲁卡因
单个或多个药物残留量的测定.
２ 规范性引用文件
下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款.其中,注日期的引用文件,
仅该日期对应的版本适用于本文件;不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本
文件.
GB/T ６６８２ 分析实验室用水规格和试验方法
３ 术语和定义
本文件没有需要界定的术语和定义.
４ 原理
试样中残留的待测物经磷酸盐缓冲液提取,PEPＧ２固相萃取柱净化,液相色谱Ｇ串联质谱测定,外标法
定量.
５ 试剂和材料
除另有规定外,所有试剂均为分析纯,水为符合GB/T ６６８２规定的一级水.
５１ 试剂
５１１ 甲醇(CH３OH):色谱纯.
５１２ 乙腈(CH３CN):色谱纯.
５１３ 甲酸(HCOOH):色谱纯.
５１４ 磷酸二氢钾(KH２PO４).
５１５ 磷酸氢二钾(K２HPO４３H２O).
５１６ 磷酸(H３PO４).
５２ 溶液配制
５２１ ０１mol/L磷酸二氢钾缓冲液:取磷酸二氢钾１３６g,加水９００mL使溶解,用磷酸调节pH 至
４０±００５,用水稀释至１０００mL,混匀.
５２２ ０２mol/L磷酸氢二钾溶液:取磷酸氢二钾２２８g,加水溶解并稀释至５００mL,混匀.
５２３ ５％甲醇溶液:取甲醇５mL,加水稀释至１００mL,混匀.
５２４ ３０％乙腈溶液:取乙腈３０mL,加水稀释至１００mL,混匀.
５２５ ０１％甲酸溶液:取甲酸０５mL,加水稀释至５００mL,混匀.
５３ 标准品
阿托品(Atropine,C１７H２３NO３,CAS号:５１Ｇ５５Ｇ８)、东莨菪碱(Scopolamine,C１７H２１NO４,CAS号:５１Ｇ
３４Ｇ３)、山莨菪碱(Anisodamine,C１７H２３NO４,CAS号:５５８６９Ｇ９９Ｇ３)、利多卡因(LidocaineC１４H２２N２O,CAS
号:１３７Ｇ５８Ｇ６)、普鲁卡因(Procaine,C１３H２０N２O２,CAS号:５９Ｇ４６Ｇ１),含量均≥９９％.标准品也可为相应的盐.
５４ 标准溶液配制
５４１ 标准储备液:取阿托品、东莨菪碱、山莨菪碱、利多卡因、普鲁卡因标准品各适量(相当于各活性成
分约１０mg),精密称定,加甲醇适量使溶解并稀释定容至１０mL容量瓶,配制成浓度为１mg/mL的标准
储备液.-１８℃避光保存,有效期６个月.
５４２ 混合标准中间液:准确量取标准储备液各１mL,于１００mL容量瓶中,用甲醇稀释至刻度,配制成
浓度为１０μg/mL的混合标准工作液.-１８℃避光保存,有效期１个月.
５４３ 系列标准工作液:准确量取混合标准中间液适量,用３０％乙腈溶液稀释,配制成浓度分别为
１ng/mL、２ng/mL、５ng/mL、１０ng/mL、２０ng/mL、５０ng/mL和１００ng/mL的系列标准溶液.现配
现用.
５５ 材料
１) 此处列出PEPＧ２固相萃取柱仅是为了提供参考,并不涉及商业目的,鼓励标准使用者尝试采用不同厂家或型号的固相萃取柱.
５５１ PEPＧ２固相萃取柱１):填料为官能化聚苯乙烯/二乙烯苯,６０mg/３mL,或相当者.
５５２ 微孔尼龙滤膜:０２２μm.
６ 仪器和设备
６１ 液相色谱Ｇ串联质谱仪:配电喷雾离子源.
６２ 分析天平:感量００１g和０００００１g.
６３ 涡旋混合器.
６４ 涡旋振荡器.
６５ 高速冷冻离心机:转速可达１００００r/min.
６６ 固相萃取装置.
６７ 组织匀浆机.
６８ pH计.
７ 试料的制备与保存
７１ 试料的制备
取适量新鲜或解冻的空白或供试组织,绞碎,并使均质.
a) 取均质后的供试样品,作为供试试料;
b) 取均质后的空白样品,作为空白试料;
c) 取均质后的空白样品,添加适宜浓度的标准溶液,作为空白添加试料.
７２ 试料的保存
-１８℃以下保存.
８ 测定步骤
８１ 提取
取试料２g(准确至±００５g)于５０mL离心管中,准确加入０１mol/L磷酸二氢钾缓冲液２０mL
(脂肪样品在６０℃水浴加热１０min),涡旋１min,振荡１０min,４℃下１００００r/min离心１０min.准确移
取１０mL上清液至另一离心管中,加入０２mol/L磷酸氢二钾溶液５mL,混匀后备用.若溶液浑浊,
１００００r/min离心１０min,取上清液备用.
８２ 净化
PEPＧ２固相萃取柱分别用甲醇３mL、水３mL活化,移取全部备用液,过柱,用水３mL、５％甲醇溶液
３mL淋洗,抽干,准确移取３０％乙腈溶液２mL洗脱,抽干,收集洗脱液,过微孔尼龙滤膜,供液相色谱Ｇ串
联质谱测定.
８３ 基质匹配标准曲线的制备
准确移取系列标准工作液各１００μL,用经８１~８２步骤处理后的空白试样洗脱液稀释至１mL,配
制成浓度为０１ng/mL、０２ng/mL、０５ng/mL、１ng/mL、２ng/mL、５ng/mL和１０ng/mL的系列基质
匹配标准溶液,过微孔尼龙滤膜后,供液相色谱Ｇ串联质谱测定.以各药物特征离子质量色谱峰面积为纵
坐标,基质匹配标准溶液浓度为横坐标,绘制基质匹配标准曲线,求回归方程和相关系数.
８４ 测定
８４１ 液相色谱参考条件
a) 色谱柱:C１８色谱柱(１００mm×２１mm,１７μm),或相当者;
b) 柱温:３５℃;
c) 进样量:２μL;
d) 流速:０３mL/min;
e) 流动相:A为０１％甲酸溶液;B为甲醇.梯度洗脱程序见表１.
８４２ 质谱参考条件
a) 离子源:电喷雾离子源;
b) 扫描方式:正离子扫描;
c) 检测方式:多反应监测;
d) 喷雾电压:１０kV;
e) 鞘气:３０Arb;
f) 辅助气:５Arb;
g) 离子迁移管温度:３２５℃;
h) 雾化温度:３００℃;
i) 待测药物的保留时间、定性离子对、定量离子对、锥孔电压和碰撞能量的参考值见表２.
８４３１ 定性测定
在同样测试条件下,试料溶液中待测物药物峰的保留时间与基质匹配标准溶液相应峰的保留时间相
对偏差在±２５％以内,且检测到的相对离子丰度,应当与浓度相当的基质匹配标准溶液相对离子丰度一
致.其允许偏差应符合表３要求.
８４３２ 定量测定
取试料溶液和相应的基质匹配标准溶液,作单点或多点校准,按外标法以色谱峰面积定量.基质匹配
标准工作液及试样溶液中待测物响应值均应在仪器检测的线性范围内.在上述色谱Ｇ质谱条件下,基质匹
配标准溶液的特征离子质量色谱图......
|