GB/T 17999.10-2008 相关标准英文版PDF
| 标准号码 | 价格美元 | 第2步(购买) | 交付天数 | 标准名称 |
| GB/T 17999.10-2008 | 189 | GB/T 17999.10-2008 | [PDF]天数 <=3 | SPF鸡 微生物学监测 第10部分：SPF鸡 间接免疫荧光试验 |
| 基本信息 | |
|---|---|
| 标准编号 | GB/T 17999.10-2008 (GB/T17999.10-2008) |
| 中文名称 | SPF鸡 微生物学监测 第10部分：SPF鸡 间接免疫荧光试验 |
| 英文名称 | SPF chicken -- Microbiological surveillance -- Part 10: Indirect immunofluorescent assay for SPF chicken |
| 行业 | 国家标准 (推荐) |
| 中标分类 | B41 |
| 国际标准分类 | 11.220 |
| 字数估计 | 8,864 |
| 发布日期 | 2008-12-31 |
| 实施日期 | 2009-05-01 |
| 旧标准 (被替代) | GB/T 17999.9-1999 |
| 标准依据 | 国家标准批准发布公告2008年第27号(总第140号) |
| 发布机构 | 中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局、中国国家标准化管理委员会 |
| 范围 | GB/T 17999的本部分规定了间接免疫荧光试验的技术要求等。本部分适用于对SPF鸡进行鸡传染性贫血病毒(Chicken Infectious Anaemia Virus, CIAV)抗体的检测。 |
GB/T 17999.10-2008
ICS １１．２２０
B４１
中华人民共和国国家标准
GB/T １７９９９．１０-２００８
代替GB/T １７９９９．９-１９９９
SPF鸡 微生物学监测
第１０部分：SPF鸡 间接免疫荧光试验
２００８-１２-３１发布
２００９-０５-０１实施
中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局
中国国家标准化管理委员会发布
前言
GB/T １７９９９《ＳＰＦ鸡 微生物学监测》分为１０个部分：
---第１部分：ＳＰＦ鸡 微生物学监测总则；
---第２部分：ＳＰＦ鸡 红细胞凝集抑制试验；
---第３部分：ＳＰＦ鸡 血清中和试验；
---第４部分：ＳＰＦ鸡 血清平板凝集试验；
---第５部分：ＳＰＦ鸡 琼脂扩散试验；
---第６部分：ＳＰＦ鸡 酶联免疫吸附试验；
---第７部分：ＳＰＦ鸡 胚敏感试验；
---第８部分：ＳＰＦ鸡 鸡白痢沙门氏菌检验；
---第９部分：ＳＰＦ鸡 试管凝集试验；
---第１０部分：ＳＰＦ鸡 间接免疫荧光试验。
本部分为GB/T １７９９９的第１０部分。
本部分代替GB/T １７９９９．９-１９９９《ＳＰＦ鸡 间接免疫荧光试验》。
本部分与GB/T １７９９９．９-１９９９相比主要变化如下：
---增加了规范性附录Ａ“试剂的配制”和资料性附录Ｂ“细胞计数方法”；
---详细界定了试验成立条件和待检样品的判定标准。
本部分的附录Ａ为规范性附录，附录Ｂ为资料性附录。
本部分由中华人民共和国农业部提出。
本部分由全国动物防疫标准化技术委员会（ＳＡＣ/TＣ１８１）归口。
本部分起草单位：中国农业科学院哈尔滨兽医研究所、中国动物卫生与流行病学中心、济南斯帕法
斯家禽有限公司。
本部分主要起草人：曲连东、刘家森、韩凌霞、邵卫星、朱果、单忠芳、姜骞、司昌德、于海波、孟庆文。
本部分所代替标准的历次版本发布情况为：
---GB/T １７９９９．９-１９９９。
GB/T １７９９９．１０-２００８
SPF鸡 微生物学监测
第１０部分：SPF鸡 间接免疫荧光试验
１ 范围
GB/T １７９９９的本部分规定了间接免疫荧光试验的技术要求等。
本部分适用于对ＳＰＦ鸡进行鸡传染性贫血病毒（ＣｈｉｃｋｅｎＩｎｆｅｃｔｉｏｕｓＡｎａｅｍｉａＶｉｒｕｓ，ＣＩＡＶ）抗体的
检测。
２ 原理
间接免疫荧光试验，以病毒感染细胞作抗原，与待检血清中的特异抗体结合，再与荧光色素标记的
抗抗体结合，形成抗原-抗体-抗抗体复合物。荧光色素在紫外光或蓝紫光的作用下，激发出可见的荧
光，因此出现荧光就说明标记物的存在，同时也反映了特异性抗体的存在。常采用已知抗原及荧光色素
标记的抗抗体检测相应的抗体。
３ 试剂和器材
３．１ 试剂
３．１．１ ＣＩＡＶ病毒ＤＥＬＲＯＳＥ株。
３．１．２ 阴性、阳性血清。
３．１．３ 被检血清。
３．１．４ 磷酸盐缓冲液（ＰＢＳ）（见附录Ａ）。
３．１．５ 异硫氰荧光素（ＦＩＴＣ）标记抗鸡ＩｇＧ（按说明稀释使用）。
３．１．６ 缓冲甘油或封片剂（见附录Ａ）。
３．１．７ 丙酮。
３．２ 器材
３．２．１ 抗原片。
３．２．２ 湿盒。
３．２．３ ３７℃培养箱。
３．２．４ 荧光显微镜。
４ 操作程序
４．１ 感染细胞的制备
用含１５％新生牛血清的ＤＭＥＭ 培养基在３９℃和５％二氧化碳环境中培养 ＭＤＣＣ-ＭＳＢ１细胞。
细胞长至每毫升５×１０６ 个时（细胞计数参见附录Ｂ），接种ＣＩＡＶ，并换成含５％新生牛血清的ＤＭＥＭ
培养基，继续培养３６ｈ～４８ｈ。
４．２ 抗原片的制备
４．２．１ 细胞病变（细胞体积增大２倍～３倍）约达５０％～７５％时，收集细胞培养物，以１５００ｒ／ｍｉｎ离心
１０ｍｉｎ，弃上清液，用ＰＢＳ洗涤细胞沉淀物３次，并细胞计数，用ＰＢＳ重悬细胞浓度。
４．２．２ 取１０μＬ细胞悬液（约含细胞１０
５ 个......