| 标准编号 | GB/T 19542-2025 (GB/T19542-2025) | | 中文名称 | 饲料中磺胺类药物的测定 液相色谱-串联质谱法 | | 英文名称 | Determination of sulfonamides in feeds - Liquid chromatography-tandem mass spectrometry | | 行业 | 国家标准 (推荐) | | 中标分类 | B46 | | 国际标准分类 | 65.120 | | 字数估计 | 14,154 | | 发布日期 | 2025-08-01 | | 实施日期 | 2026-02-01 | | 旧标准 (被替代) | GB/T 19542-2007,GB/T 8381.10-2005 | | 发布机构 | 国家市场监督管理总局、国家标准化管理委员会 | GB/T 19542-2025: 饲料中磺胺类药物的测定 液相色谱-串联质谱法
ICS 65.120
CCSB46
中华人民共和国国家标准
代替GB/T 19542-2007,GB/T 8381.10-2005
饲料中磺胺类药物的测定
液相色谱-串联质谱法
2025-08-01发布
2026-02-01实施
国 家 市 场 监 督 管 理 总 局
国 家 标 准 化 管 理 委 员 会 发 布
前言
本文件按照GB/T 1.1-2020《标准化工作导则 第1部分:标准化文件的结构和起草规则》的规定
起草。
本文件代替GB/T 19542-2007《饲料中磺胺类药物的测定 高效液相色谱法》和GB/T 8381.10-
2005《饲料中磺胺喹 啉的测定 高效液相色谱法》。本文件以 GB/T 19542-2007为主,整合了
GB/T 8381.10-2005的内容。本文件与GB/T 19542-2007相比,除结构调整和编辑性改动外,主要
技术变化如下:
a) 更改了适用范围和定量限、增加了磺胺类药物的种类(见第1章,2007年版的第1章);
b) 更改了原理(见第4章,2007年版的第3章);
c) 更改了试验步骤(见第8章,2007年版的第7章);
d) 更改了试验数据处理(见第9章,2007年版的第8章);
e) 更改了精密度的要求(见第10章,2007年版的第9章)。
请注意本文件某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。
本文件由全国饲料工业标准化技术委员会(SAC/TC76)提出并归口。
本文件起草单位:中国农业科学院农业质量标准与检测技术研究所、河南中标检测服务有限公司、
山东晟华检测技术有限公司、广州汇标检测技术中心。
本文件主要起草人:索德成、樊霞、赵月钧、肖志明、郝燕娟、安志新、贾松涛、唐建、张晓、王智民、
李梦雨、张冰、陶燕、管琳、王石。
本文件所代替文件的历次版本发布情况为:
---GB/T 8381.10,2005年首次发布;
---GB/T 19542,2004年首次发布,2007年第一次修订,本次为第二次修订,并入GB/T 8381.10-
2005的内容。
饲料中磺胺类药物的测定
液相色谱-串联质谱法
1 范围
本文件描述了饲料中29种磺胺类药物液相色谱-串联质谱测定方法。
本文件适用于配合饲料、浓缩饲料、精料补充料、添加剂预混合饲料、混合型饲料添加剂和饲料原料
中磺胺米隆、磺胺胍、磺胺、磺胺醋酰、磺胺二甲异嘧啶、磺胺嘧啶、磺胺噻唑、磺胺吡啶、二甲氧苄氨嘧
啶、磺胺甲嘧啶、三甲氧苄氨嘧啶、磺胺二甲唑、磺胺对甲氧嘧啶、磺胺甲噻二唑、磺胺二甲基嘧啶、二甲
氧甲基苄胺嘧啶、磺胺甲氧哒嗪、磺胺氯哒嗪、磺胺甲 唑、磺胺间甲氧嘧啶、磺胺邻二甲氧嘧啶、磺胺二
甲异 唑、磺胺苯酰、磺胺苯吡唑、磺胺氯吡嗪、磺胺吡唑、磺胺间二甲氧嘧啶、磺胺喹 啉、磺胺硝苯的
测定。
本文件中方法检出限为0.03mg/kg,定量限为0.1mg/kg。
2 规范性引用文件
下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中,注日期的引用文
件,仅该日期对应的版本适用于本文件;不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于
本文件。
GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法
GB/T 20195 动物饲料 试样的制备
3 术语和定义
本文件没有需要界定的术语和定义。
4 原理
试样中待测物经甲酸乙腈溶液提取后,经多重杂质吸附材料净化,液相色谱-串联质谱仪检测,基质
添加标准曲线校准,外标法定量。
5 试剂或材料
除非另有规定,仅使用分析纯试剂。
5.1 水:GB/T 6682,一级。
5.2 甲醇:色谱纯。
5.3 甲酸:色谱纯。
5.4 0.1%甲酸溶液:取甲酸(5.3)0.1mL,加入100mL水中,混匀。
5.5 提取溶液:取甲酸10mL,加入乙腈990mL,混匀。
5.6 稀释溶液:取甲酸0.1mL和甲醇10mL,加入90mL水,混匀。
5.7 标准储备溶液:精密称取29种磺胺类标准品(纯度不低于97%,相关信息见附录A)10mg(精确
至0.01mg)分别置于10mL棕色容量瓶中,用甲醇配成质量浓度约为1mg/mL的标准储备溶液,
-18℃以下保存,有效期6个月。或购买标准溶液。
5.8 混合标准中间溶液:准确移取适量标准储备溶液(5.7)分别至棕色容量瓶中,用甲醇配成浓度约为
100μg/mL的中间溶液,2℃~8℃保存,有效期1个月。
5.9 标准系列工作溶液:分别吸取混合标准中间液(5.8),用稀释溶液(5.6)稀释成质量浓度为200ng/mL、
400ng/mL、800ng/mL、2000ng/mL、4000ng/mL、8000ng/mL的标准系列工作工作液。临用现配。
5.10 滤膜:0.22μm,有机系。
5.11 强阴离子交换(SAX)填料:粒径40μm,或性能相当者。
5.12 十八烷基硅烷键合硅胶(C18)填料:粒径50μm,或性能相当者。
5.13 弗洛里硅土:粒径50μm,或性能相当者。
5.14 多重杂质吸附材料:称取10gSAX填料(5.11)、15gC18填料(5.12)、15g弗洛里硅土(5.13)于
100mL试剂瓶中,混匀,备用。
6 仪器和设备
6.1 液相色谱-串联质谱仪:配有电喷雾电离源(ESI+)。
6.2 天平:精度为0.01g和0.01mg。
6.3 离心机:转速不低于8000r/min。
6.4 涡旋振荡器。
6.5 超声波清洗器。
6.6 氮吹仪。
7 样品
按GB/T 20195制备样品,至少200g,粉碎使其全部通过0.425mm孔径的试验筛,充分混匀,装入
密闭容器中,备用。选取类型相同,均匀一致、且在待测物保留时间处,仪器响应值小于方法定量限
30%的饲料样品,作为空白样品。
8 试验步骤
8.1 提取
称取配合饲料、浓缩饲料、精料补充料、饲料原料试样5g,添加剂预混合饲料、混合型饲料添加剂试
样2g(精确至0.01g),置于50mL离心管中,准确加入20mL提取溶液(5.5),涡旋混合30s,超声提取
30min,其间每10min振摇一次,8000r/min离心5min,取上清液,备用。
8.2 净化
准确移取5mL备用液(8.1)于10mL离心管中,加入100mg多重杂质吸附材料,涡旋混合30s,
于10000r/min离心2min。将上清液转移至10mL离心管中,40℃氮气吹干,加入1.0mL稀释溶液
(5.6),涡旋混合30s,过0.22μm滤膜,上机测定。
8.3 基质标准系列溶液的制备
分别称取7份空白样品(配合饲料、浓缩饲料、精料补充料、饲料原料5g,添加剂预混合饲料、混合
型饲料添加剂2g)于50mL离心管中,分别添加0.1mL混合标准系列工作溶液,配制成不同上机浓度
(5ng/mL、10ng/mL、20ng/mL、50ng/mL、100ng/mL、200ng/mL)的基质添加标准曲线。按8.1和
8.2处理,供液相色谱-串联质谱仪测定。
8.4 测定
8.4.1 液相色谱参考条件
液相色谱参考条件如下。
a) 色谱柱:C18,柱长100mm,内径3.0mm,粒径1.7μm,或性能相当者。
b) 柱温:30℃。
c) 进样量:10μL。
d) 流动相及流速流动相:A相为0.1%甲酸溶液(5.4),B相为0.1%甲酸甲醇溶液(5.6),梯度洗脱
程序见表1。
表1 流动相梯度条件
时间
min
流速
mL/min
A相(体积分数)
B相(体积分数)
0 0.3 90 10
1 0.3 90 10
3.5 0.3 75 25
6.5 0.3 70 30
8 0.3 20 80
9 0.3 10 90
9.1 0.3 90 10
10 0.3 90 10
8.4.2 质谱参考条件
质谱参考条件如下。
a) 电离方式:电喷雾离子源。
b) 扫描方式:正离子模式。
c) 检测方式:多反应监测。
d) 喷雾电压:5000V。
e) 雾化温度:320℃。
f) 脱溶剂气、锥孔气、碰撞气均为高纯氮气及其他合适气体,使用前应调节各气体流量以使质谱
灵敏度达到检测要求。
g) 毛细管电压、解离电压、碰撞能量等电压值应优化至最佳灵敏度。定性离子对、定量离子对及
对应的解离电压和碰撞能量见表2。
表2 定性离子对、定量离子对及对应的解离电压和碰撞能量的参考值
序号 待测物名称
参考出峰时间
min
离子对
m/z
解离电压
碰撞能
eV
1 磺胺米隆 1.42
187.0 >76.6
187.0 >105.8a
2 磺胺胍 1.82
215.0 >92.0
215.0 >108.0a
3 磺胺 2.08
173.0 >92.0
173.0 >156.0a
4 磺胺醋酰 2.85
215.0 >92.0
215.0 >108.0a
5 磺胺二甲异嘧啶 3.05
279.0 >124.0
279.0 >186.0a
6 磺胺嘧啶 3.09
251.0 >92.0
251.0 >155.9a
7 磺胺噻唑 3.25
256.0 >92.0
256.0 >155.9a
8 磺胺吡啶 3.52
250.0 >92.0
250.0 >156.0a
9 二甲氧苄氨嘧啶 3.62
261.1 >123.1a
261.1 >245.2
10 磺胺甲嘧啶 3.79
265.1 >92.0
265.1 >156.0a
11 三甲氧苄氨嘧啶 3.91
291.1 >261.2a
291.1 >230.2
12 磺胺二甲唑 4.37
268.0 >92.0
268.0 >155.9a
13 磺胺对甲氧嘧啶 4.44
281.0 >92.0
281.0 >155.9a
14 磺胺甲噻二唑 4.63
271.1 >92.0
271.1 >155.9a
15 磺胺二甲基嘧啶 4.81
279.0 >92.0
279.0 >186.0a
16 二甲氧甲基苄胺嘧啶 5.10
275.1 >123.2a
275.1 >259.2
表2 定性离子对、定量离子对及对应的解离电压和碰撞能量的参考值 (续)
序号 待测物名称
参考出峰时间
min
离子对
m/z
解离电压
碰撞能
eV
17 磺胺甲氧哒嗪 5.20
281.0 >92.0
281.0 >155.9a
18 磺胺氯哒嗪 5.96
285.0 >92.0
285.0 >156.0a
19 磺胺甲 唑 6.35
254.0 >92.1
254.0 >155.9a
20 磺胺间甲氧嘧啶 6.62
281.0 >92.0
281.0 >155.9a
21 磺胺邻二甲氧嘧啶 7.10
311.1 >92.0
311.1 >155.9a
22 磺胺二甲异 唑 7.49
268.0 >92.0
268.0 >155.9a
23 磺胺苯酰 8.31
277.0 >92.0
277.0 >155.9a
24 磺胺苯吡唑 8.67
315.3 >158.2a
315.3 >160.0
25 磺胺氯吡嗪 8.76
285.0 >92.0
285.0 >156.0a
26 磺胺吡唑 8.84
329.0 >156.2a
329.0 >294.0
27 磺胺间二甲氧嘧啶 8.87
311.0 >92.0
311.0 >155.9a
28 磺胺喹 啉 8.97
301.1 >92.0
301.1 >155.9a
29 磺胺硝苯 9.31
336.1 >156.0a
336.1 >294.0
a 定量离子。
8.4.3 基质匹配标准系列溶液和试样溶液测定
在仪器的最佳条件下,分别取基质匹配标准系列溶液(8.3)和试样溶液(8.2)上机测定。29种磺胺
类药物的定量离子色谱图见附录B。
8.4.4 定性
选择1个母离子和2个子离子,在相同试验条件下,样品中待测物质的保留时间与标准溶液中对应
的保留时间偏差在±2.5%之内;且样品质谱图中定性离子的相对丰度与浓度接近的标准溶液谱图中对
应的定性离子的相对丰度进行比较,若偏差不超过表3规定的范围,则可判定为样品中存在对应的待
测物。
表3 定性确证时相对离子丰度的最大允许偏差
相对离子丰度
>50 >20~50 >10~20 ≤10
最大允许偏差
±20 ±25 ±30 ±50
8.4.5 定量
以基质匹配标准系列溶液中待测物的质量浓度为横坐标、色谱峰面积为纵坐标,绘制标准曲线,标
准曲线的相关系数应不低于0.99。试样溶液与标准溶液中待测物的响应值均应在仪器检测的线性范围
内,如超出线性范围,应重新测定。单点校准定量时,试样溶液中待测组分质量浓度与标准溶液质量浓
度相差不超过30%。
9 试验数据处理
试样中待测物含量以质量分数wi 计,数值以毫克每千克(mg/kg)表示。多点校准按公式(1)计
算,单点校准按公式(2)计算。
wi=
Pi×V1×V3
V2×m×1000
(1)
式中:
Pi ---由标准曲线得到的试样溶液中待测物质量浓度,单位为纳克每毫升(ng/mL);
V1 ---试样提取溶液总体积,单位为毫升(mL);
V3 ---复溶试样溶液定容体积,单位为毫升(mL);
V2 ---净化用试样提取溶液体积,单位为毫升(mL);
m ---试样质量,单位为克(g);
1000---换算系数。
wi=
Ai×cs×V1×V3
As×V2×m×1000
(2)
式中:
Ai ---试样溶液中待测物色谱峰面积;
cs ---标准溶液中待测物的质量浓度,单位为纳克每毫升(ng/mL);
V1 ---试样提取溶液总体积,单位为毫升(mL);
V3 ---复溶试样溶液定容体积,单位为毫升(mL);
As ---标准溶液待测物色谱峰面积;
V2 ---净化用试样提取溶液体积,单位为毫升(mL);
m ---试样质量,单位为克(g);
1000---换算系数。
测定结果以平行测定的算术平均值表示,保留3位有效数字。
10 精密度
在重复性条件下,两次独立测定结果与其算术平均值的绝对差值不大于该算术平均值的20%。
附 录 A
(资料性)
29种磺胺类药物标准品的相关资料
29种磺胺类药物标准品的中英文名称、化学分子式和CAS号见表A.1。
表A.1 29种磺胺类药物标准品的中英文名称、化学分子式和CAS号
序号 中文名称 英文名称 化学分子式 CAS号
1 磺胺米隆 Mafenide C7H10N2O2S 138-39-6
2 磺胺胍 Sulfaguanidine C7H10N4O2S 57-67-0
3 磺胺 Sulfanilamide C6H8N2O2S 63-74-1
4 磺胺醋酰 Sulfacetamide C8H10N2O3S 144-80-9
5 磺胺二甲异嘧啶 Sulfisomidine C12H14N4O2S 515-64-0
6 磺胺嘧啶 Sulfadiazine C10H10N4O2S 68-35-9
7 磺胺噻唑 Sulfathiazole C9H9N3O2S2 72-14-0
8 磺胺吡啶 Sulfapyridine C11H11N3O2S 144-83-2
9 二甲氧苄氨嘧啶 Diaveridine C13H16N4O2 5355-16-8
10 磺胺甲嘧啶 Sulfamerazine C11H12N4O2S 127-79-7
11 三甲氧苄氨嘧啶 Trimethoprim C14H18N4O3 738-70-5
12 磺胺二甲唑 Sulfafurazole C11H13N3O3S 729-99-7
13 磺胺对甲氧嘧啶 Sulfametoxydiazine C11H12N4O3S 651-06-9
14 磺胺甲噻二唑 Sulfamethizole C9H10N4O2S2 144-82-1
15 磺胺二甲基嘧啶 Sulfamethazine C12H14N4O2S 57-68-1
16 二甲氧甲基苄胺嘧啶 Ormetoprim C14H18N4O2 6981-18-6
19 磺胺甲 唑 Sulfamethoxazole C10H11N3O3S 723-46-6
20 磺胺间甲氧嘧啶 Sulfamonomethoxine C11H12N4O3S 1220-83-3
21 磺胺邻二甲氧嘧啶 Sulfadoxine C12H14N4O4S 2447-57-6
22 磺胺二甲异 唑 Sulfisoxazole C11H13N3O3S 127-69-5
23 磺胺苯酰 Sulfabenzamide C13H12N2O3S 127-71-9
24 磺胺苯吡唑 Sulfaphenazole C15H14N4O2S 526-08-9
25 磺胺氯吡嗪 Sulfachloropyrazine C10H9ClN4O2S 102-65-8
26 磺胺吡唑 Sulfapyrazole C16H16N4O2S 852-19-7
27 磺胺间二甲氧嘧啶 Sulfadimethoxin......
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