| 标准编号 | GB/T 22250-2025 (GB/T22250-2025) | | 中文名称 | 保健食品中绿原酸的测定 | | 英文名称 | Determination of chlorogenic acid in health foods | | 行业 | 国家标准 (推荐) | | 中标分类 | X83 | | 国际标准分类 | 67.050 | | 字数估计 | 10,152 | | 发布日期 | 2025-03-28 | | 实施日期 | 10/1/2025 | | 旧标准 (被替代) | GB/T 22250-2008 | | 发布机构 | 国家市场监督管理总局、中国国家标准化管理委员会 | GB/T 22250-2025: 保健食品中绿原酸的测定
ICS 67.050
CCSX83
中华人民共和国国家标准
代替GB/T 22250-2008
保健食品中绿原酸的测定
2025-03-28发布
2025-10-01实施
国 家 市 场 监 督 管 理 总 局
国 家 标 准 化 管 理 委 员 会 发 布
前言
本文件按照GB/T 1.1-2020《标准化工作导则 第1部分:标准化文件的结构和起草规则》的规定
起草。
本文件规定了食品质量相关技术要求,食品安全相关要求见有关法律法规、政策和食品安全标准等
文件。
本文件代替GB/T 22250-2008《保健食品中绿原酸的测定》。与GB/T 22250-2008相比,除结
构调整和编辑性改动外,主要技术变化如下:
a) 更改了适用范围(见第1章,2008年版的第1章);
b) 更改了试样制备和试样处理(见7.1、7.2,2008年版的5.1);
c) 更改了色谱参考条件(见7.3,2008年版的5.3);
d) 更改了检出限、定量限(见第10章,2008年版的第1章)。
请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。
本文件由全国特殊食品标准化技术委员会(SAC/TC466)提出并归口。
本文件起草单位:中轻技术创新中心有限公司、中国食品发酵工业研究院有限公司、深圳市计量质
量检测研究院、中国海关科学技术研究中心、完美(广东)日用品有限公司、广州市东鹏食品饮料有限公
司、天津科技大学、中轻检验认证有限公司、思茅海关综合技术服务中心。
本文件主要起草人:武竹英、钟其顶、张朝晖、张协光、刘明、李军波、胡海娥、蓝雄、张翠英、刘洋、
吴一凡、陈楠楠、郭新光、别玮、韦建明、李学莉、祁正有、吉鑫、柴晓、曾侣斌、张鑫。
本文件及其所代替文件的历次版本发布情况为:
---2008年首次发布为GB/T 22250-2008;
---本次为第一次修订。
保健食品中绿原酸的测定
1 范围
本文件描述了保健食品中绿原酸的高效液相色谱测定方法。
本文件适用于片剂、硬质糖果、硬胶囊、软胶囊、口服液、饮料等剂型形态的保健食品中的绿原酸的
测定。
2 规范性引用文件
下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中,注日期的引用文
件,仅该日期对应的版本适用于本文件;不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于
本文件。
GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法
3 术语和定义
本文件没有需要界定的术语和定义。
4 原理
试样中的绿原酸用70%甲醇溶液提取,经高效液相色谱分离,紫外检测器检测,以保留时间定
性,外标法定量。
5 试剂或材料
除非另有规定,仅使用分析纯试剂。
5.1 试剂
5.1.1 水,按GB/T 6682规定的一级水。
5.1.2 乙腈(C2H3N):色谱纯。
5.1.3 石油醚(沸程30℃~60℃)。
5.2 试剂配制
5.2.1 70%(体积分数)甲醇溶液:量取700mL甲醇(色谱纯),用水定容至1000mL,混匀。
5.2.2 0.1%(体积分数)磷酸溶液:移取磷酸1mL,用水定容至1000mL,混匀。
5.3 标准物质或标准样品
绿原酸(C16H18O9,CAS号:327-97-9):纯度不低于98%,或经国家认证并授予证书的标准物质或
标准样品。
5.4 溶液配制
5.4.1 绿原酸标准储备溶液(2000μg/mL):称取20mg(精确至0.1mg)绿原酸标准物质或标准样品
(5.3),用甲醇(色谱纯)溶解并定容至10mL容量瓶中,混匀,于2℃~8℃避光保存,有效期1个月。
5.4.2 绿原酸标准中间溶液(200μg/mL):移取1mL标准储备溶液(5.4.1),用70%甲醇溶液(5.2.1)
定容至10mL容量瓶中,混匀,于2℃~8℃避光保存,有效期1周。
5.4.3 绿原酸系列标准工作溶液:分别移取0.02mL、0.1mL、0.5mL、1.25mL、2.5mL绿原酸标准中
间溶液(5.4.2),用70%甲醇溶液(5.2.1)定容至10mL棕色容量瓶中,混匀,使绿原酸系列标准工作溶
液的质量浓度分别为0.4μg/mL、2μg/mL、10μg/mL、25μg/mL、50μg/mL。临用现配。
5.5 材料
滤膜:0.45μm,有机系。
6 仪器设备
6.1 高效液相色谱仪:配紫外检测器或相当者。
6.2 天平:精确度0.1mg和0.001g。
6.3 超声波清洗器。
6.4 高速离心机:转速不低于8000r/min。
6.5 涡旋振荡器。
6.6 氮吹仪。
7 分析步骤
7.1 试样制备
7.1.1 固体试样(片剂、硬质糖果、硬胶囊等):片剂、硬质糖果取不少于20片或不少于5g样品,经高速
粉碎机或研钵磨成粉状,混匀备用;硬胶囊取不少于20粒或不少于5g样品,取其内容物,研细(必要
时),混匀备用。
7.1.2 半固体试样(软胶囊等):取不少于20粒或不少于5g样品,剪开,挤出内容物,混匀备用。
7.1.3 液体试样(口服液、饮料等):取不少于5个最小规格包装或不少于50mL,混匀备用。
7.2 试样处理
7.2.1 片剂、硬胶囊等固体试样
称取1g(精确至0.001g)混合均匀的试样置于刻度管中,加入20mL70%甲醇溶液(5.2.1),摇
匀,超声波振荡提取30min,冷却至室温,将提取液全部转移至25mL棕色容量瓶中,用70%甲醇溶液
(5.2.1)定容,摇匀。如定容后溶液混浊,转移至50mL离心管,8000r/min离心5min。取上清液经滤
膜(5.5)过滤,待测。
7.2.2 硬质糖果等固体试样
称取1g(精确至0.001g)混合均匀的试样置于刻度管中,加入6mL水振荡溶解后,加入14mL甲
醇(色谱纯),摇匀,超声波振荡提取30min,冷却至室温,将提取液全部转移至25mL棕色容量瓶中,用
70%甲醇溶液(5.2.1)定容,摇匀。如定容后溶液混浊,转移至50mL离心管,8000r/min离心5min。
取上清液经滤膜(5.5)过滤,待测。
7.2.3 软胶囊等半固体试样
称取1g(精确至0.001g)混合均匀的试样置于刻度管中,加入15mL石油醚(5.1.3),涡旋振荡
1min,以3000r/min离心10min,弃去上层溶剂后再重复一次,氮吹将剩余溶剂挥干,加入20mL
70%甲醇溶液(5.2.1),摇匀,超声波振荡提取30min,冷却至室温,将提取液全部转移至25mL棕色容
量瓶中,用70%甲醇溶液(5.2.1)定容,摇匀。如定容后溶液混浊,转移至50mL离心管,8000r/min离
心5min。取上清液经滤膜(5.5)过滤,待测。
7.2.4 口服液、饮料等液体试样
称取1g(精确至0.001g)混合均匀的试样置于刻度管中,加入20mL70%甲醇溶液(5.2.1),摇
匀,超声波振荡提取30min,冷却至室温,将提取液全部转移至25mL棕色容量瓶中,用70%甲醇溶液
(5.2.1)定容,摇匀。如定容后溶液混浊,转移至50mL离心管,8000r/min离心5min。取上清液经滤
膜(5.5)过滤,待测。
7.3 色谱参考条件
色谱参考条件如下:
a) 色谱柱:C18柱(粒径5μm,4.6mm×250mm),或等效色谱柱;
b) 流动相:A相为乙腈(5.1.2),B相为0.1%磷酸溶液(5.2.2),梯度洗脱条件见表1;
c) 流速:1.0mL/min;
d) 检测波长:327nm;
e) 柱温:35℃;
f) 进样量:10μL。
表1 梯度洗脱条件
时间
min
流动相A
流动相B
0 10 90
5 10 90
18 40 60
18.5 80 20
20 80 20
21 10 90
25 10 90
7.4 标准曲线的制作
将绿原酸系列标准工作溶液分别注入高效液相色谱仪中,测定其峰面积,以标准系列工作溶液的质
量浓度为横坐标,以峰面积为纵坐标,绘制标准曲线。绿原酸标准溶液(50μg/mL)高效液相色谱图见
附录A中的图A.1。
7.5 试样溶液的测定
将试样溶液注入高效液相色谱仪中,通过保留时间定性,得到待测物的峰面积,根据标准曲线得到
待测试样溶液中绿原酸的质量浓度。若待测物含量超出标准曲线的测定范围,应使用70%甲醇溶液
(5.2.1)进行稀释,使其上机质量浓度在线性范围内再进行定量。试样(硬质糖果)中绿原酸高效液相色
谱图见图A.2。
平行做两份试验。
8 结果计算和表述
试样中绿原酸的含量按公式(1)进行计算:
X=ρ×
V×f×100
m×1000
(1)
式中:
X ---试样中绿原酸的含量,单位为毫克每百克(mg/100......
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