| 标准编号 | GB/T 25887-2010 (GB/T25887-2010) | | 中文名称 | 奶牛脊椎畸形综合征检测 PCR-RFLP法 | | 英文名称 | Method of PCR-RFLP for detecting complex vertebral malformation in dairy cattle | | 行业 | 国家标准 (推荐) | | 中标分类 | B43 | | 国际标准分类 | 65.020.30 | | 字数估计 | 8,826 | | 发布日期 | 1/10/2011 | | 实施日期 | 6/1/2011 | | 引用标准 | GB/T 6682 | | 标准依据 | 国家标准批准发布公告2011年第1号(总第166号) | | 发布机构 | 中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局、中国国家标准化管理委员会 | | 范围 | 本标准规定了奶牛脊椎畸形综合征的PCR-RFLP检测技术。本标准适用于奶牛脊椎畸形综合征的检测与诊断。 | GB/T 25887-2010
Method of PCR-RFLP for detecting complex vertebral malformation in dairy cattle
ICS 65.020.30
B43
中华人民共和国国家标准
奶牛脊椎畸形综合征检测 PCR-RFLP法
2011-01-10发布
2011-06-01实施
中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局
中国国家标准化管理委员会发布
前言
本标准的附录B为规范性附录,附录A、附录C为资料性附录。
本标准由中华人民共和国农业部提出。
本标准由全国畜牧业标准化技术委员会归口。
本标准起草单位:华中农业大学。
本标准主要起草人:张淑君、杨利国、李翔、胡修忠、刘文举、宋利军。
奶牛脊椎畸形综合征检测 PCR-RFLP法
1 范围
本标准规定了奶牛脊椎畸形综合征的PCR-RFLP检测技术。
本标准适用于奶牛脊椎畸形综合征的检测与诊断。
2 规范性引用文件
下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件,其随后所有
的修改单(不包括勘误的内容)或修订版均不适用于本标准,然而,鼓励根据本标准达成协议的各方研究
是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件,其最新版本适用于本标准。
GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法
3 术语和定义
下列术语和定义适用于本标准。
3.1
奶牛的一种常染色体隐性遗传病,主要表现为母牛流产、胎儿早期死亡、出生后不久死亡,患病犊牛
主要症状表现为:颈短、脊椎畸形、心脏畸形、腿部畸形、系部呈现对称的内向僵直等。
3.2
SLC35A3基因 SLC35A3gene
定位于牛第3号染色体上,在基因序列数据库(GenBank)中的登录号为AY160683,全长14901bp,
mRNA为981bp,由7个外显子和6个内含子组成,该基因编码核糖转运蛋白,与脊柱发育有关,是奶牛
脊椎畸形综合征的致病基因。
3.3
检测DNA用限制性内切酶酶切后形成的特定DNA片段的大小。因此凡是可以引起酶切位点变
异的突变如点突变(新产生和去除酶切位点)和一段DNA的重新组织(如插入和缺失造成酶切位点间
的长度发生变化)等均可导致RFLP的产生。
4 原理
SLC35A3基因第四外显子中第559位碱基由G突变为T时,其对应编码的氨基酸由缬氨酸改变
为苯丙氨酸,导致奶牛脊椎畸形综合征的发生。采用PCR-RFLP技术检测牛样本基因组DNA变异,即
采用PCR技术扩增SLC35A3基因片段,限制性内切酶消化PCR扩增产物,电泳检测酶......
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