| 标准编号 | GB/T 27528-2011 (GB/T27528-2011) | | 中文名称 | 口蹄疫病毒实时荧光RT-PCR检测方法 | | 英文名称 | Real-time RT-PCR for detection of foot and mouth disease virus | | 行业 | 国家标准 (推荐) | | 中标分类 | B41 | | 国际标准分类 | 11.220 | | 字数估计 | 9,924 | | 发布日期 | 2011-11-21 | | 实施日期 | 2012-03-01 | | 引用标准 | GB/T 6682; GB/T 18088; GB/T 18935; GB 19489; SN/T 1193 | | 标准依据 | 国家标准批准发布公告2011年第18号 | | 发布机构 | 中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局、中国国家标准化管理委员会 | | 范围 | 本标准规定了口蹄疫病毒实时荧光RT-PCR检测方法。本标准适用于口蹄疫病毒的检测与鉴定。 | GB/T 27528-2011
Real-time RT-PCR for detection of foot and mouth disease virus
ICS 11.220
B41
中华人民共和国国家标准
口蹄疫病毒实时荧光RT-PCR检测方法
2011-11-21发布
2012-03-01实施
中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局
中国国家标准化管理委员会发布
前言
本标准的附录A、附录B为规范性附录。
本标准由中华人民共和国农业部提出。
本标准由全国动物防疫标准化技术委员会(SAC/TC181)归口。
本标准起草单位:中华人民共和国深圳出入境检验检疫局、中国检验检疫科学研究院、北京盈九思
科技发展有限公司。
本标准主要起草人:秦智锋、林祥梅、吴绍强、花群义、卢体康、刘建、陈书琨、吕建强、曾少灵、
詹爱军、韩雪清、孙洁、曹琛福、贾广乐、高小博、陈兵、阮周曦、梅琳、张彩虹、陶虹。
口蹄疫病毒实时荧光RT-PCR检测方法
1 范围
本标准规定了口蹄疫病毒实时荧光RT-PCR检测方法。
本标准适用于口蹄疫病毒的检测与鉴定。
2 规范性引用文件
下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件,其随后所有
的修改单(不包括勘误的内容)或修订版均不适用于本标准,然而,鼓励根据本标准达成协议的各方研究
是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件,其最新版本适用于本标准。
GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法
GB/T 18088 出入境动物检疫采样
GB/T 18935 口蹄疫诊断技术
GB 19489 实验室 生物安全通用要求
SN/T 1193 基因检验实验室技术要求
3 缩略语
下列缩略语适用于本标准。
Ct值:循环阈值(cyclethreshold)。
4 试剂耗材和仪器设备
4.1 试剂耗材
4.1.1 除非另有说明,在检测中使用的试剂均为分析纯,实验室用水应符合GB/T 6682的要求。
4.1.2 口蹄疫病毒实时荧光RT-PCR试剂:-20℃保存,见附录A。
4.1.3 引物和探针序列
下游引物(FMDV-R)序列为:5′GCGAGTCCTGCCACGGA3′。
FAM和BHQ。
4.1.4 DEPC处理水:见附录B。推荐购买商品化DEPC处理的无DNA酶和RNA酶的水。
4.1.5 氯仿:分析纯,常温保存。
4.1.6 异丙醇:分析纯,使用前预冷至-20℃。
4.1.7 75%乙醇:用DEPC水和无水乙醇配制,使用前预冷至-20℃。
4.1.8 石英砂:市售化学纯,121℃,15min高压灭菌后备用。
4.1.9 0.01mol/LPBS,pH7.6~7.8:见附录B。
4.1.10 阳性对照为灭活疫苗毒或组织培养灭活毒,-20℃保存备用。阴......
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