| 标准编号 | GB/T 28063-2011 (GB/T28063-2011) | | 中文名称 | 菜豆荚斑驳病毒检疫鉴定方法 | | 英文名称 | Detection and identification of Bean pod mottle virus | | 行业 | 国家标准 (推荐) | | 中标分类 | B16 | | 国际标准分类 | 65.020.01 | | 字数估计 | 14,196 | | 发布日期 | 2011-12-30 | | 实施日期 | 2012-06-01 | | 标准依据 | 国家标准批准发布公告2011年第23号 | | 发布机构 | 中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局、中国国家标准化管理委员会 | | 范围 | 本标准规定了菜豆荚斑驳病毒血清学和分子生物学的检测鉴定的程序和方法。本标准适用于可能携带该病毒的豆科作物的种子、苗木等植物繁殖材料的检测鉴定, 也适用于传播该病毒介体昆虫的检测鉴定。 | GB/T 28063-2011
Detection and identification of Bean pod mottle virus
ICS 65.020.01
B16
中华人民共和国国家标准
菜豆荚斑驳病毒检疫鉴定方法
2011-12-30发布
2012-06-01实施
中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局
中国国家标准化管理委员会发布
前言
本标准按照GB/T 1.1-2009给出的规则起草。
本标准由全国植物检疫标准化技术委员会(SAC/TC271)提出并归口。
本标准起草单位:中华人民共和国厦门出入境检验检疫局、中华人民共和国福建出入境检验检疫局、
中华人民共和国深圳出入境检验检疫局。
本标准主要起草人:廖富荣、沈建国、郑耘、陈青、林石明、陈红运、黄蓬英、吴媛。
菜豆荚斑驳病毒检疫鉴定方法
1 范围
本标准规定了菜豆荚斑驳病毒血清学和分子生物学的检测鉴定方法。
本标准适用于可能携带该病毒的豆科作物的种子、苗木等植物繁殖材料的检测鉴定,也适用于传播
该病毒介体昆虫的检测鉴定。
2 菜豆荚斑驳病毒基本信息
中文名:菜豆荚斑驳病毒。
英文名:beanpodmottlevirus。
英文缩写:BPMV。
属豇豆花叶病毒科Comoviridae、豇豆花叶病毒属Comovirus。
菜豆夹斑驳病毒的其他信息参见附录A。
3 方法原理
利用基于抗原抗体反应的双抗夹心酶联免疫吸附测定(DAS-ELISA)、反转录和体外DNA扩增技
术的反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)进行检测鉴定。
4 主要仪器设备
本标准的检测鉴定方法主要使用以下仪器设备:
微量榨汁机、酶标仪、洗板机、微量天平(感量:0.001g)、PCR仪、荧光PCR仪、电泳仪、水平电泳
槽、凝胶成像仪、高速冷冻台式离心机、水浴槽、pH 计和各种量程的可调移液器(1000μL、200μL、
100μL、20μL、2μL)。
5 检测样品的制备
5.1 DAS-ELISA和IC-RT-PCR检测样品的制备
对每批送检样品进行症状检查,优先选取具有褐色或黑色斑驳症状的种子(从种脐开始),或者选取
具有斑驳、皱缩、褪绿等症状的叶片。
种子样品:称取0.5g~1.0g的种皮作为检测样品,在液氮中充分研磨,回温后按1∶10比例加入
样品提取缓冲液继续研磨。
叶片样品:称取0.5g~1.0g的叶片作为检测样品,在研钵中研磨或在液氮中研磨,按1∶10比例
加入样品提取缓冲液继续研磨。
把研磨后的样品转移到......
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