| 标准编号 | GB/T 33410-2016 (GB/T33410-2016) | | 中文名称 | 生化试剂中蛋白酶K活性检测方法 | | 英文名称 | Determination of the activity of protease K in biochemical reagents | | 行业 | 国家标准 (推荐) | | 中标分类 | G66 | | 国际标准分类 | 71.040.30 | | 字数估计 | 6,620 | | 发布日期 | 2016-12-30 | | 实施日期 | 2017-07-01 | | 标准依据 | 国家标准公告2016年第27号 | | 发布机构 | 中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局、中国国家标准化管理委员会 | GB/T 33410-2016
Determination of the activity of protease K in biochemical reagents
ICS 71.040.30
G66
中华人民共和国国家标准
生化试剂中蛋白酶K活性检测方法
2016-12-30发布
2017-07-01实施
中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局
中国国家标准化管理委员会发布
前言
本标准按照GB/T 1.1-2009给出的规则起草。
本标准由全国生化检测标准化技术委员会(SAC/TC387)提出并归口。
本标准起草单位:深圳市计量质量检测研究院、中国测试技术研究院、中国标准化研究院。
本标准主要起草人:林霖、周李华、赖心田、兰全学、马爱进、陈国培、李淅、潘兰芳、杨国武。
生化试剂中蛋白酶K活性检测方法
1 范围
本标准规定了生化试剂中蛋白酶K活性检测方法。
本标准适用于分子生物学实验中使用的蛋白酶K活性的测定。
2 规范性引用文件
下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件,仅注日期的版本适用于本文
件。凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。
GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法
3 术语和定义
下列术语和定义适用于本文件。
3.1
在55℃,pH8.0时,1min内水解酪蛋白产生1μgL-酪氨酸为一个酶活性单位。
注:活性单位为U/mg、U/g或U/mL。
4 原理
蛋白酶K是一种切割活性较广的丝氨酸蛋白酶,可催化含有较多的丝氨酸位点的α-酪蛋白水解。
本方法中采用α-酪蛋白为反应底物,经蛋白酶K催化水解为L-酪氨酸,在275nm处测定吸光度值。再
通过测量各个浓度的L-酪氨酸标准溶液在275nm处的吸光度值,并构建标准曲线得出线性回归方程,
以外标法定量。计算蛋白酶K的酶活性。
5 仪器设备及器具
5.1 恒温水浴锅:控温精度±0.2℃。
5.2 pH计:精确至0.01pH。
5.3 紫外-可见分光光度计:吸光度值......
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