| 标准编号 | GB/T 39995-2021 (GB/T39995-2021) | | 中文名称 | | | 英文名称 | Determination of sterols | | 行业 | 国家标准 (推荐) | | 中标分类 | A40 | | 字数估计 | 10,187 | | 发布机构 | 国家市场监督管理总局、中国国家标准化管理委员会 | GB/T 39995-2021: 甾醇类物质的测定
GB/T 39995-2021 英文名称: Determination of sterols
ICS 07.080
CCSA40
中华人民共和国国家标准
1 范围
本文件规定了甾醇类物质的液相色谱-质谱/质谱测定方法。
本文件适用于猪油、菜籽油、核桃、山楂、油麦菜、葛根、大米、小麦、黑青豆中游离态的胆甾烷醇、菜
籽甾醇、菜油甾醇、豆甾醇、β-谷甾醇、岩藻甾醇、羊毛甾醇、豆甾烷醇、麦角甾醇含量的测定。
4 原理
样品经无水乙醇回流提取,提取液过0.22μm尼龙滤膜后供液相色谱-质谱/质谱仪测定,标准曲线内标法定量。
5 试剂或材料
除非另有说明,本方法使用的试剂均为分析纯。水为GB/T 6682规定的一级水。
5.1 甲醇:色谱纯。
5.2 无水乙醇:色谱纯。
5.3 甾醇标准品:胆甾烷醇、菜籽甾醇、菜油甾醇、豆甾醇、β-谷甾醇、岩藻甾醇、羊毛甾醇、豆甾烷醇、麦
角甾醇、6-酮胆甾烷醇,化合物信息参见附录A中表A.1,纯度均≥93%。
5.4 内标储备液:准确称取适量6-酮胆甾烷醇标准品(精确至0.01mg),用无水乙醇溶解并配制成质量
浓度为500mg/L的内标储备溶液,于0℃~4℃下避光保存备用,有效期为1个月。
5.5 内标工作溶液:准确移取内标储备液2.0mL于1000mL容量瓶中,加无水乙醇稀释并定容至刻
度,混匀,配制成质量浓度为1.0μg/mL内标工作溶液,现配现用。
5.6 甾醇单一标准储备液:分别准确称取适量的甾醇标准品(精确至0.01mg),用无水乙醇溶解并配制
成质量浓度均为500mg/L的甾醇单一标准储备溶液,于0℃~4℃下避光保存备用,有效期为1个月。
5.7 甾醇混合标准溶液:分别准确移取各甾醇单一标准储备液2.0mL于50mL具塞离心管中,于
40℃ 下氮气吹干,准确加入10mL内标工作溶液复溶,混匀,配制成质量浓度均为100mg/L的甾醇
混合标准溶液,现配现用。
5.8 甾醇混合标准工作溶液:准确移取适量甾醇混合标准溶液,用内标工作溶液稀释配制成质量浓度
分别为20mg/L、10mg/L、5mg/L、2.5mg/L、1.0mg/L、0.5mg/L、0.25mg/L的系列甾醇混合标准工作溶液,现配现用。
5.9 0.22μm尼龙滤膜。
6 仪器设备
6.1 液相色谱-质谱/质谱仪(LC-MS/MS):配大气压化学离子源(APCI)。
6.2 分析天平:感量为0.0001g、0.01g和0.01mg。
6.3 涡旋混匀器。
6.4 回流冷凝装置。
6.5 氮吹仪。
6.6 粉碎机。
6.7 匀浆机。
6.8 离心机。
7 样品
7.1 猪油、菜籽油
按GB/T 15687的规定进行制备。
7.2 核桃、山楂、大米、小麦、油麦菜、葛根、黑青豆
取核桃、山楂、大米、小麦、黑青豆等有代表性干制样品约1kg,用粉碎机粉碎,混匀,制备好的试样
均分成两份,装入洁净的盛样容器内,密封并标识,于0℃~4℃下避光保存,尽快测定。
取油麦菜、葛根等有代表性新鲜样品约1kg,用匀浆机制成匀浆,制备好的试样均分成两份,装入
洁净的盛样容器内,密封并标识,现制现用。
8 试验步骤
8.1 试样处理
8.1.1 猪油、菜籽油
称取试样0.4g(精确至0.001g)于250mL圆底烧瓶中,加入70mL内标工作溶液(5.5),称重,充
分混匀后放入回流冷凝器中,加热并保持提取液微沸,30min后停止加热并冷却至室温,用无水乙醇
(5.2)补足失重,混匀,吸取5mL提取液于8000r/min下离心5min,取2mL上清液过0.22μm尼龙滤膜,待测。
8.1.2 核桃、山楂、大米、小麦、油麦菜、葛根、黑青豆
称取试样1.0g(精确至0.001g)于250mL圆底烧瓶中,加入70mL内标工作溶液(5.5),称重,充
分混匀后放入回流冷凝器中,加热并保持......
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