| 标准编号 | GH/T 1293-2020 (GH/T1293-2020) | | 中文名称 | 玫瑰茄红色素含量的测定 高效液相色谱法 | | 英文名称 | (Roselle Red Pigment Determination by High Performance Liquid Chromatography) | | 行业 | 供销行业标准 (推荐) | | 中标分类 | B36 | | 国际标准分类 | 67.05 | | 发布日期 | 2020-06-04 | | 实施日期 | 2020-09-01 | | 标准依据 | 行业标准信息服务平台(2020.07.22) | | 发布机构 | 中华全国供销合作总社 | GH/T 1293-2020: 玫瑰茄红色素含量的测定 高效液相色谱法
GH/T 1293-2020 英文名称: (Roselle Red Pigment Determination by High Performance Liquid Chromatography)
中 华 人 民 共 和 国 供 销 合 作 行 业 标 准
玫瑰茄红色素含量的测定 高效液相色谱法
中华全国供销合作总社 发 布
前 言
本标准按照GB/T 1.1―2009给出的规则起草。
本标准由中华全国供销合作总社提出。
本标准由全国辛香料标准化技术委员会（SAC/TC 408）归口。
本标准起草单位：中华全国供销合作总社南京野生植物综合利用研究院、江苏省理化测试中心、江
苏佳信检测技术有限公司、南京市高淳区综合检验检测中心、安徽华测检测技术有限公司、谱尼测试集
团江苏有限公司。
本标准主要起草人：高宏、黄晓德、赵伯涛、付琳、罗亮、单春生、钱骅、金枝、陈仕荣、张卫明、
张锋伦、陈斌、施祖灏、殷辉莉、金泽、郭芳芳。
玫瑰茄红色素含量的测定 高效液相色谱法
1 范围
本标准规定了玫瑰茄红色素中主要着色物质总含量的高效液相色谱测定方法。
本标准适用于玫瑰茄花萼及玫瑰茄红产品的分析与检验。
2 规范性引用文件
下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。
凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。
GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法
GB/T 12729.2 香辛料和调味品 取样方法
4 原理
试样中的主要着色物质经水、甲醇或乙醇的强酸性溶液提取后，置于沸水浴中进行水解为苷元，如
矢车菊素、飞燕草素等着色物质，经过高效液相色谱柱进行分离后用可见光检测器于530 nm下进行检测，
以标准品保留时间进行定性，外标法进行定量。
5 试剂与仪器设备
5.1 试剂
5.1.1 水：GB/T 6682 规定的一级水。
5.1.2 甲醇：色谱纯。
5.1.3 无水乙醇：色谱纯。
5.1.4 甲酸：色谱纯。
5.1.5 盐酸：分析纯。
5.1.6 10%盐酸甲醇溶液（V/V）：取 10 mL浓盐酸、90 mL甲醇混匀。
5.1.7 提取溶剂：无水乙醇、水、浓盐酸按照体积比 2∶1∶1 的比例混合。
5.1.8 飞燕草色素：CAS 号 528-53-0，纯度 ≥96%。
5.1.9 矢车菊素：CAS 号 528-58-5，纯度 ≥98%。
5.2 仪器与材料
5.2.1 高效液相色谱仪，配有可见光检测器。
5.2.2 分析天平，感量 0.001 g 和 0.000 1 g。
5.2.3 离心机，转速≥4000 r/min。
5.2.4 高速粉碎机。
5.2.5 微孔滤膜，孔径 0.22 μm。
5.2.6 容量瓶。
5.2.7 微量进样器。
6 试样处理
6.1 玫瑰茄红
50℃真空干燥后，于室温下避光密闭保存。
6.2 玫瑰茄花萼
50℃真空干燥后，经高速粉碎机粉碎过20目筛。
7 试液的制备
7.1 样品溶液
按玫瑰茄红0.2 g（精确至0.000 1 g）、玫瑰茄花萼5 g（精确至0.001 g）称样量称取样品，于具塞三
角瓶中，加入50 mL提取溶剂，摇匀后，超声提取30 min，提取温度40 ℃，冷却至室温，用提取溶剂定
容至500 mL，取10 mL于沸水浴中水解1 h，取出冷却，定容至100 mL，用0.22 μm微孔滤膜过滤，备测。
7.2 混合标准工作溶液
准确称取飞燕草色素、矢车菊素的标准品5 mg（精确至0.000 1 g），分别用10 mL的10 %盐酸甲醇
溶液溶解后，混匀并定容至100 mL，即为50 μg/mL的混合标准液母液。准确移取玫瑰茄红色素混合标
准溶液母液，用10 %盐酸甲醇溶液稀释成质量浓度分别为1.25 μg/mL、2.5 μg/mL、5.0 μg/mL、10.0 μg/mL、
20.0 μg/mL的系列标准工作溶液，
8 测定
8.1 高效液相色谱条件
--色谱柱： C18柱， 250 mm×4.6 mm×5 μm 或性能相当者；
--流动相：0.5 %甲酸水溶液， 0.5 %甲酸乙腈溶液；
--检测波长：530 nm；
--柱温：30 ℃；
--流速：0.6 mL/min;
--进样量：20 μL；
--梯度洗脱条件见表 1。
8.2 标准曲线绘制
按8.1色谱条件，分别将系列标准工作溶液注入液相色谱仪进行测定。以测得的峰面积为纵坐标，
对应的标准溶液质量浓度为横坐标，绘制标准曲线......
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