| 标准编号 | SN/T 2482-2010 (SN/T2482-2010) | | 中文名称 | 马铃薯丛枝植原体检疫鉴定方法 | | 英文名称 | Identification of potato witches broom phytoplasma | | 行业 | 商检行业标准 (推荐) | | 中标分类 | B16 | | 国际标准分类 | 07.080 | | 字数估计 | 9,990 | | 发布日期 | 2010-01-10 | | 实施日期 | 2010-07-16 | | 标准依据 | National Quality Inspection [2010] No. 13 | | 发布机构 | 海关总署 | | 范围 | 本标准规定了马铃薯丛枝植原体的检疫鉴定方法。本标准适用于所有进境科薯、商品薯、组培苗和脱毒苗等马铃薯种质中马铃薯丛枝植黑体的检疫鉴定。 | SN/T 2482-2010
Identification of potato witches" broom phytoplasma
书中华人民共和国出入境检验检疫行业标准
SN／T２４８２-２０１０
马铃薯丛枝植原体检疫鉴定方法
２０１０-０１-１０发布
２０１０-０７-１６实施
中 华 人 民 共 和 国
国家质量监督检验检疫总局 发 布
前言
本标准的附录Ａ和附录Ｂ均为资料性附录。
本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。
本标准由中华人民共和国辽宁出入境检验检疫局、中国检验检疫科学研究院负责起草。
本标准主要起草人：王秀芬、赵文军、刘伟、彭金火、牟海青、周铭、朱水芳。
本标准系首次发布的出入境检验检疫行业标准。
SN／T２４８２-２０１０
马铃薯丛枝植原体检疫鉴定方法
１ 范围
本标准规定了马铃薯丛枝植原体的检疫鉴定方法。
本标准适用于所有进境种薯、商品薯、组培苗和脱毒苗等马铃薯种质中马铃薯丛枝植原体的检疫
鉴定。
２ 原理
２．１ 学名和分类地位
学名：Ｐｏｔａｔｏｗｉｔｃｈｅｓ’ｂｒｏｏｍｐｈｙｔｏｐｌａｓｍａ
缩写：ＰＷＢ
分类地位：细菌界（Ｂａｃｔｅｒｉａ），硬壁菌门（Ｆｉｒｍｉｃｕｔｅｓ），柔膜菌纲（Ｍｏｌｉｃｕｔｅｓ），非固醇菌原体目
（Ｃｌｏｖｅｒｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎｇｒｏｕｐ，１６ＳｒⅥ）。
其他资料参见附录Ａ。
２．２ 鉴定原理
马铃薯丛枝植原体的分子生物学特性为本标准鉴定方法的主要依据。
３ 仪器和用具
３．１ 仪器设备：ＰＣＲ仪、超净工作台、电泳仪、凝胶成像分析仪、冷冻离心机、电子天平（１／１００００ｇ）、
ｐＨ计、水浴锅、振荡器等。
３．２ 用具；可调移液器（０μＬ～２０μＬ、２０μＬ～２００μＬ、２００μＬ～１０００μＬ）及相关吸头、研钵、离心管
（１．５ｍＬ、１０ｍＬ）、ＰＣＲ管（０．２ｍＬ）、量筒、烧杯、镊子等。
４ 试剂
４．１ 研磨液
磷酸氢二钠（Ｎａ２ＨＰＯ４） ０．１ｍｏｌ／Ｌ
磷酸二氢钠（ＮａＨ２ＰＯ４） ０．０３ｍｏｌ／Ｌ
ＥＤＴＡ １０ｍｍｏｌ／Ｌ（ｐＨ８．０）
蔗糖 １０％（质量浓度）
ＰＶＰ-４０ ２％（质量浓度）
调整ｐＨ至７．６，然后过滤除菌。
使用前加入０．１５％（质量浓度）牛血清白蛋白（ＢＳＡ）和１ｍｍｏｌ／Ｌ抗坏血酸维生素Ｃ。
４．２ CTAB缓冲液
ＣＴＡＢ ２％（质量浓度）
Ｔｒｉｓ-ＨＣｌ......
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